Derminis lygiavertiškumas. Kilmės istorija ir klinikinių tyrimų rezultatai

Devintojo dešimtmečio pabaigoje Stanfordo universitete buvo sukurta skysta galvijų kolageno forma, kuri kūno temperatūroje virto minkštu elastingu substratu. Vaistas buvo užregistruotas ir patvirtintas naudoti daugelyje Europos šalių kaip implantuojama medžiaga, vadinama „Zyderm Collagen Implantant“. Šis vaistas tapo pirmuoju implantu. Vėliau atsirado ir kitų kontūrinės plastikos priemonių, tokių kaip „Restylane“, „Perlane“, „Pharmacrylic gel“, „Artecol“, „Biopolymer gel“ ir kitų. Šie vaistai pradėti naudoti ne tik kontūrų modeliavimui ir su amžiumi susijusių odos pokyčių korekcijai, bet ir gydymui, tiksliau, randų reljefo išlyginimui. Visi jie buvo suleidžiami po rando apačia.

Pažangesnių hipotrofinių randų gydymo metodų paieška paskatino mus sukurti idėją šiam tikslui panaudoti dirbtinai sukurtą odos analogą – „odos ekvivalentą“ (DE), kuriame taip pat būtų naudojamas skystas kolagenas. Dirbtinių odos pakaitalų variantų buvo daug, tačiau bendra idėja buvo sukurti į odą panašų audinį iš dermos struktūrinių komponentų, kuris nebūtų atmestas transplantacijos atveju ir būtų geras substratas dermos ir epidermio komponentų įaugimui. Yra žinoma, kad pagrindiniai dermos struktūriniai komponentai yra ląsteliniai, skaiduliniai elementai ir intersticinė medžiaga. Skaidulinius elementus daugiausia reprezentuoja kolageno ir elastino skaidulos, intersticinę medžiagą – glikoproteinai, proteoglikanai ir glikozaminoglikanai. Pagrindinis funkcinis ląstelinis dermos elementas yra fibroblastai, ląstelinė fibroblastų populiacija yra beveik visų dermos struktūrinių komponentų susidarymo šaltinis. Todėl kurdami „odos pakaitalą“, dauguma mokslininkų naudoja kolageno substratą, sumaišytą su fibroblastais ir glikozaminoglikanais. Ant viršaus vienaip ar kitaip uždedamas keratinocitų sluoksnis, kad būtų sukurtas pilnas odos sluoksnis ir greičiau atkurtas persodinto odos ekvivalento gyvybingumas, o tai palengvina daugybė keratinocitų išskiriamų augimo faktorių. Vieną pirmųjų „gyvo odos ekvivalento“ versijų 1983 m. pasiūlė E. Bell ir kt. Odos fibroblastai buvo maišomi su kolagenu, plazma ir augimo terpe, todėl susidarė gelis, kurio paviršiuje buvo auginami keratinocitai. Visa tai buvo kultivuojama 1-2 savaites in vilro, po to odos ekvivalentas buvo laikomas subrendusiu ir atstovavo gyvybingam audiniui permatomos elastingos masės pavidalu. Autoriai pasiūlė jį perkelti ant nudegimų pacientų žaizdų paviršių, kad būtų atkurta pilnas odos sluoksnis. Kai kurie autoriai kaip odos ekvivalento pagrindą naudojo kolageno kempinę arba kolageno matricą, padengtą proteoglikanais ir užpildytą fibroblastais, o ant jos buvo auginami autologiniai keratinocitai. Dėl to buvo sukurtas vadinamasis trimatis odos modelis. Keratinocitų kultivavimui, siekiant juos vėliau perkelti ant žaizdų paviršių, kai kurie autoriai taip pat naudojo dirbtinę kolageno, glikozaminoglikanų ir chitozano matricą, lavonų odą ir kiaulių odą kaip substratą. Praėjus 7–14 dienų nuo kultivavimo pradžios, ant pacientų ar gyvūnų žaizdų buvo persodintas viso sluoksnio transplantatas, kuriame buvo derma ir epidermis.

Dirbtinis odos pakaitalas buvo naudojamas ne tik nudegimų aukų odai atkurti, bet ir vaistų citotoksiškumui tirti bei augimo faktoriams in vitro tirti.

Mūsų požiūriu, chirurginės gilių hipotrofinių randų dermabrazijos, derinamos su MPC transplantacija, efektyvumas nepakankamas, todėl buvo bandoma išlyginti odos reljefą, į hipotrofinio rando įdubą įšvirkščiant odos ekvivalento analogą. Odos ekvivalento kūrimo substratu tapo laboratorijoje gautas skystas kolagenas, į kurį buvo įvesta fibroblastų suspensija. Odos ekvivalentas, kaip ir MPC, buvo sukurtas specializuotoje, šiai veiklai sertifikuotoje laboratorijoje ir operacijos dieną bei valandą stikliniame butelyje su ledu buvo pristatytas į kliniką.

Operacinis rando poliravimas buvo atliktas standartine technika, po odos antiseptinio apdorojimo ir vietinės nejautros 2 % lidokainu, novokainu arba ultrakainu. Poliravimas išlygino rando paviršių ir tuo pačiu sudarė sąlygas kultivuojamų ląstelių ar ląstelių kompozicijų prigijimui. Po to atvėsintas skystas kolageno gelis su į jį inokuliuotais fibroblastais buvo sterilia mentele užteptas ant nupoliruoto hipotrofinių randų paviršiaus (į rando įdubimą), kur jis polimerizavosi veikiamas kūno temperatūros.

Dėl to po 5–10 minučių kolagenas su fibroblastais polimerizavosi iš skystos būsenos į tirštą gelio būseną. DE sutirštėjus, ant viršaus buvo uždėtas tvarstis su suspensija arba MPC ant pagrindo.

Buvo pritvirtintas daugiasluoksnis sterilus tvarstis, kaip ir MPC transplantacijos atveju. Priklausomai nuo rando paviršiaus, žaizdos uždangalo, ant kurio buvo keratinocitai, ir šlifavimo tipo, tvarstis buvo atmetamas per 7–12 dienų.

Hipotrofinių randų kombinuoto gydymo metodas, naudojant chirurginę dermabraziją ir vėlesnę „odos ekvivalento“ bei keratinocitų transplantaciją daugiasluoksnio sluoksnio, užauginto ant specialių žaizdų tvarsčių, arba suspensijos pavidalu į rando įdubą, leidžia pasiekti žymiai geresnių, kosmetiškai priimtinų rezultatų, sumažinant arba visiškai išnykstant (-) audiniui. Odos ekvivalentas sudaro paties paciento audinį (dermą), randinis audinys lieka po naujai susiformavusiu audiniu. MPC sukuria normalaus storio ir funkcinio aktyvumo epidermį, dėl kurios bendra rando išvaizda per kelis mėnesius linkusi žymiai pagerėti.

Ši hipotrofinių randų gydymo taktika šiandien gali būti vadinama optimalia sprendžiant šią problemą. Tačiau mūsų naudotas DE variantas kolageno gelio su į jį įskiepytais fibroblastais pavidalu nėra labai patogus dirbti. DE, skirtas dirbti su hipotrofiniais randais, iš pradžių turėtų būti storesnis, kad jį būtų galima įdėti į rando ertmę, paskirstyti joje, o tada ant viršaus uždėti žaizdos dangą su keratinocitais. Taigi, galime teigti, kad ši kryptis dirbant su hipotrofiniais randais yra tik nubrėžta, tačiau jos tolesnės plėtros ir tyrimų prognozės yra labai optimistinės.

Daugiasluoksnių keratinocitų sluoksnių, kaip terapinės medžiagos, gavimo sudėtingumas ir didelė kaina paskatino poreikį ieškoti kitų ląstelių kompozicijų variantų. Tyrėjams didelį susidomėjimą kelia fibroblastų kultivavimas, kurie, persodinti ant žaizdų paviršių, duoda daugeliu atžvilgių panašų į keratinocitų transplantacijos rezultatus, tačiau yra daug paprastesnė ir pigesnė ląstelinė medžiaga. Savo tyrimuose keliems pacientams, turintiems hipotrofinių randų, po randais suleidome mezoterapinę fibroblastų suspensijos injekciją.

Po randais, naudojant mezoterapinius metodus (mikropapulinį, infiltracinį), buvo įvesta fibroblastų suspensija augimo terpėje, kurioje buvo 1,5–2 milijonai ląstelių 1 ml. Gydymo seansų skaičius buvo nuo 4 iki 10, priklausomai nuo rando amžiaus, paciento amžiaus ir defekto gylio. Intervalas tarp seansų buvo 7–10 dienų. Paprastai autologinių ir alogeninių fibroblastų suspensijos įvedimas buvo lydimas nedidelės, trumpalaikės kraujagyslinės reakcijos.

Klinikinių tyrimų metu nustatyta, kad persodintų MPC įtakoje sumažėja uždegiminės reakcijos trukmė odoje ir randuose po chirurginės dermabrazijos, o žaizdų paviršių epitelizacija pagreitėja vidutiniškai 3–4 dienomis.

Dirbant su normotrofiniais ir hipertrofiniais randais, svarbiausia yra paspartinti pooperacinių erozijų gijimą, nes būtent čia slypi optimalaus terapinio poveikio pasiekimo galimybė.

Odos ekvivalento transplantacija lėmė hipotrofinių randų užpildymą (-) audiniu, jų reljefo išlyginimą, susiliejimą su aplinkine oda, dėl ko randų plotas tapo žymiai mažesnis.

Fibroblastų suspensijos įvedimas į hipotrofinius randus taip pat lėmė odos reljefo išlyginimą ir randų ploto sumažėjimą.

Visais ląstelių transplantacijos atvejais buvo pastebėtas šalutinis poveikis, kai per kelis mėnesius pagerėjo randų estetinė išvaizda, jie linko transformuotis į odą primenančią struktūrą.

Visi mūsų pastebėti efektai susiję su persodintų ląstelių biostimuliacinio potencialo įgyvendinimu. Mums atrodo, kad transplantatuose ląstelių sluoksnių skaičius paprastai yra 10–30 % didesnis. Todėl bendras ląstelių potencialas ploto vienete jau yra 10–30 % didesnis nei įprastai. Be to, geriausi keratinocitų ir fibroblastų persodinimo rezultatai gauti persodinant ląstelių medžiagą iš jaunų sveikų žmonių. Beje, šis faktas kalba už alogeninės kultūros, gautos iš jaunų ir sveikų donorų, naudojimą. Tokios kultūros bioenergetinis ir informacinis potencialas perkeliamas į recipiento ląsteles, kartais ir nelabai jaunas, dėl to pagerėja recipiento audinių ir ląstelių „kokybė“.

Taigi, keratinocitų ir fibroblastų kultūros naudojimas leidžia:

• Pagreitina randų epitelizaciją po dermabrazijos.
• Sumažinkite randų matomumą ne tik sulygindami jų paviršių su aplinkinės odos paviršiumi, bet ir suformuodami virš jų visavertį epidermį.
• Pagerinkite chirurginės dermabrazijos rezultatus dėl persodintų ląstelių citokinų poveikio randui, kuris ilgainiui linkęs transformuotis į odą panašią struktūrą.
• Gauti estetiškai žymiai priimtinesnius pacientų, turinčių normotrofinius, hipotrofinius, hipertrofinius, atrofinius randus ir strijas, gydymo rezultatus.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]