Nauji duomenys apie chagos grybo kovos su burnos vėžiu mechanizmus

Neseniai atliktame tyrime, paskelbtame Mokslinėse ataskaitose, mokslininkai ištyrė chaga grybų ekstraktų priešnavikinio aktyvumo žmogaus burnos vėžio HSC-4 ląstelėse mechanizmus.

Burnos vėžys yra pasaulinė sveikatos problema, kurios gydymo galimybės yra ribotos dėl šalutinio poveikio ir pasekmių. Pagrindiniai gydymo būdai yra chirurgija, spindulinė terapija ir chemoterapija, nors tai gali pakenkti sveikiems audiniams, paveikti kalbą ir pabloginti gyvenimo kokybę.

Metabolizmo takų auglio ląstelėse supratimas ir taikymas suteikia galimybę kurti naujus terapinius agentus. Chaga grybas turi priešvėžinių savybių nuo kelių vėžio rūšių; tačiau mechanizmas nėra aiškus.

Šiame tyrime mokslininkai ištyrė, ar chaga grybas turi įtakos burnos vėžio vystymuisi ir metabolizmui.

Po gydymo grybų ekstraktu tyrėjai ištyrė ląstelių išgyvenimą, proliferacijos gebėjimą, glikolitinius kelius, apoptozę ir mitochondrijų kvėpavimo mechanizmus.

Jie HSC-4 ląsteles gydė grybelio ekstraktu 0 μg/ml, 160 μg/ml, 200 μg/ml, 400 μg/ml ir 800,0 μg/ml per dieną, kad įvertintų jo poveikį burnos ląstelių elgsenai.. Piktybinis navikas, įskaitant ląstelių ciklą, proliferaciją, gyvybingumą, mitochondrijų kvėpavimą, apoptozę ir glikolizę.

Komanda išanalizavo apdorotas ląsteles pagal jų ciklą, naudodama ląstelių skaičiavimo rinkinio-8 (CCK-8) tyrimus, kad nustatytų ląstelių gyvybingumą.

Siekiant ištirti, ar chaga grybo slopinamasis poveikis naviko proliferacijai ir išgyvenimui gydomose ląstelėse yra susijęs su signalo keitikliu ir 3 transkripcijos aktyvatoriumi (STAT3), jie išmatavo STAT3 aktyvaciją po gydymo 200,0 μg/ml ekstrakto doze. p>

Jie taip pat atliko srauto citometriją, kad analizuotų ląstelių pasiskirstymą, ir Western blot metodą, kad išskirtų visus ląstelių baltymus.

Tyrėjai naudojo skysčių chromatografiją ir tandeminę masės spektrometriją (LC-MS), kad nustatytų komponentus, atsakingus už chaga grybų ekstrakto priešvėžines savybes.

Kandidatų junginių koncentracijos buvo nustatytos naudojant didelio efektyvumo skysčių chromatografiją su fotodiodiniu detektoriumi (HPLC-DAD).

Jie ištyrė glikolizės reguliavimą apdorotų ląstelių ekstraktais, naudodami ekstraląstelinio rūgštėjimo greičio (ECAR) tyrimą. Jie užfiksavo realaus laiko ECAR matavimus apdorotose ląstelėse po gliukozės, oligomicino ir 2-deoksi-D-gliukozės (2-DG) suleidimo.

Komanda ištyrė energijos jutiklio, vadinamo adenozino monofosfatu aktyvuota baltymų kinaze (AMPK) aktyvavimą ir ląstelių deguonies suvartojimo greitį (OCR).

Jie taip pat įvertino lėtinio energijos trūkumo poveikį autofagijai, susijusiai su apoptotine ląstelių mirtimi gydomose ląstelėse.

Jie ištyrė, ar 200,0 μg/ml chaga ekstrakto koncentracija paveikė apoptozę, kurią stimuliuoja p38 mitogeno aktyvuotos proteinkinazės (MAPK) ir branduolinis kappa B faktorius (NF-κB).

Ekstraktas sulėtino HSC-4 ląstelių augimą, slopindamas ląstelių ciklą ir proliferaciją, sumažindamas vėžio ląstelių energijos suvartojimą ir padidindamas ląstelių mirtį dėl autofagijos ir apoptozės.

Ekstraktas žymiai padidino burnos vėžio ląstelių augimo fazes (G0/G1), tuo pačiu sumažindamas sintezės fazę (S). Western blot tyrimo metu buvo nustatyta, kad ekstraktas žymiai sumažino fosfo-STAT3 ekspresiją po 15 minučių ir išlaikė ją 120 minučių.

LC-MS nustatė tris galimas priešvėžines medžiagas: 2-hidroksi-3,4-dimetoksibenzenkarboksirūgštį, siringo rūgštį ir protokatecho rūgštį. Ekstraktas slopino glikolizę, glikolitinį pajėgumą ir glikolitines atsargas apdorotose ląstelėse.

Jis taip pat suaktyvino AMPK, skatindamas autofagiją ir slopindamas glikolitinius kelius apdorotose ląstelėse. Ekstraktu sukėlus autofagiją, padidėjo nuo dozės priklausantis bazinis mitochondrijų kvėpavimo dažnis ir adenozino trifosfato (ATP) apykaita.

Tačiau reikšmingų didžiausių mitochondrijų kvėpavimo dažnių pokyčių nepastebėta, išskyrus atvejus, kai ekstrakto koncentracija buvo didžiausia. Be to, mokslininkai pastebėjo nuo dozės priklausantį reikšmingą mitochondrijų kvėpavimo rezervo pajėgumo sumažėjimą.

Rezultatai parodė, kad chaga grybai sumažino mitochondrijų membranų potencialą apdorotose ląstelėse dėl nuolatinės autofagijos, kurią skatina glikolizės slopinimas, o tai reiškia, kad mitochondrijų disfunkcija sukelia apoptozę.

NF-κB ir p38 MAPK aktyvinimas ekstraktu padidino apoptozę. Ekstraktas padidino ankstyvą apdorotų ląstelių apoptozę priklausomai nuo dozės.

Tačiau reikšmingų vėlyvosios apoptozės skirtumų nepastebėta, kai ekstrakto koncentracija nuo 0 iki 400 μg/ml. Didelės čagos ekstrakto dozės gali paveikti kitų ląstelių fiziologijas ir sumažinti maksimalų mitochondrijų kvėpavimo pajėgumą.

Mokslininkai nustatė, kad chaga ekstraktas slopino mitochondrijų membranų potencialą ir glikolitinį aktyvumą HSC-4 ląstelių linijoje, todėl sumažėjo ATP lygis ir autofagija.

AMPK aktyvinimas turėjo įtakos sukeldamas autofagiją. STAT3 defosforilinimas slopina ląstelių ciklą, skatindamas apoptotinius kelius, aktyvindamas NF-κB ir p38 MAPK.

Įvairūs ląstelių signalizacijos mechanizmai sukėlė ekstrakto slopinamąjį poveikį. Ekstrakte buvo trys priešvėžiniai junginiai: 2-hidroksi-3,4-dimetoksibenzenkarboksirūgštis, siringo rūgštis ir protokatecho rūgštis.

Nors norint nustatyti, ar ekstraktas slopina naviko augimą, reikia atlikti daugiau ikiklinikinių tyrimų, tyrimo rezultatai rodo, kad grybų ekstraktas gali būti galimas papildomas terapinis agentas gydant burnos vėžiu sergančius pacientus.