Tuliaremijos sukėlėjas

Tuliaremija yra pagrindinė gyvūnų (graužikų) liga, žmonėms ji pasireiškia kaip ūminė infekcinė liga, pasižyminti įvairia klinikine forma ir lėtu sveikimu. Tuliaremijos sukėlėją – Francisella tularensis – 1912 m. atrado G. McCoy ir S. Chapin epizootijos metu tarp voverių Tulare ežero rajone (Kalifornija), kurią išsamiai ištyrė E. Francis, kurio garbei pavadinta gentis.

Tai labai maži, 0,2–0,7 µm dydžio, kokoidiniai arba elipsoidiniai polimorfiniai lazdelės, kurios, naudojant specialius dažymo metodus, labai dažnai nusidažo bipoliniu būdu; jie nejudrūs, gramneigiami, nesudaro sporų; katalazės neigiami, sudaro H2S, griežti aerobai, augimo optimali temperatūra yra 37 °C, pH 6,7–7,2. Virulentiškos padermės turi kapsulę, fermentuojant kai kuriuos angliavandenius (gliukozę, maltozę, manozę, fruktozę, dekstriną), be dujų sudaro rūgštį, fermentacijos laipsnis tarp padermių skiriasi, G + C kiekis DNR yra 33–36 mol. F. tularensis neauga įprastose terpėse. G. McCoy ir Sh. Chapin naudojo koaguliuotą trynio terpę. Ant jos tuliaremijos bacilos auga gležnų mažų kolonijų, panašių į rasos lašus, pavidalu, tada kultūra įgauna gležnos šagreninės dangos su silpnai išreikšta gleivinga konsistencija pobūdį. E. Francis pasiūlė tularemijos bacilų auginimui maistinį agarą, kuriame yra 0,05–0,1 % cistino, 1 % gliukozės ir 5–10 % kraujo. Tokioje terpėje augimas yra vešlesnis ir šiurkštesnis: kolonijos yra apvalios, lygiu paviršiumi, pieniškos spalvos, drėgnos, gleivingos konsistencijos, apsuptos būdingo žalio aureolės. Augimas lėtas, kolonijos pasiekia maksimalų dydį 3–5 dieną (1–4 mm). Tuliaremijos bakterijos gerai dauginasi vištos embriono trynio maišelyje, sukeldamos jo žūtį 3–4 dieną.

F. tularensis augimui būtinos šios aminorūgštys: argininas, leucinas, izoleucinas, lizinas, metioninas, prolinas, treoninas, histidinas, valinas, cistinas, kai kuriems porūšiams – serinas, tirozinas, asparto rūgštis; be to, augimui joms taip pat reikalingos pantoteno rūgštis, tiaminas ir Mg2 jonai. Atsižvelgiant į šias savybes, F. tularensis auginimui gali būti naudojamos sintetinės terpės.

Francisella gentis priklauso Gammaproteobakterijų klasei, Proteobakterijų tipui. Šiai genčiai taip pat priklauso F. novicida, kurios patogeniškumas žmonėms nenustatytas.

Tuliaremijos sukėlėjas yra viduląstelinis parazitas. Jo virulentiškumą lemia kapsulė, slopinanti fagocitozę; neuraminidazė, skatinanti adheziją; endotoksinas; ląstelės sienelės alergeninės savybės, taip pat gebėjimas daugintis fagocituose ir slopinti jų naikinamąjį poveikį. Virulentiškumo mechanizmai dar nėra iššifruoti. Be to, tuliaremijos baciloje rasti receptoriai, galintys sąveikauti su IgG imunoglobulinų Fc fragmentais. Dėl tokio prisijungimo sutrinka komplemento sistemų ir makrofagų aktyvumas.

S formos (virulentiška) F. tularensis turi du antigenus – O ir Vi (kapsulinį antigeną). O antigenas yra susijęs su Brucella antigenais. Disociacija S->SR->R lemia kapsulės praradimą, virulentiškumą ir imunogeniškumą. F. tularensis rūšis skirstoma į tris geografines rases (porūšius):

• Holarctic (mažai patogeniškas naminiams triušiams, nefermentuoja glicerolio ir neturi citrulino ureidazės fermento, randamo šiaurinio pusrutulio šalyse);
• Vidurinės Azijos (mažai patogeniškas triušiams, turi citrulino ureidazę ir fermentuoja glicerolį);
• Nearktinis (amerikietiškas), patogeniškesnis triušiams, fermentuoja glicerolį, turi citrulino ureidazę.

Be to, Amerikos ir Centrinės Azijos porūšių padermės pasižymi fosfatazės aktyvumu, kurio nėra Holarktikos porūšių padermėse.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Tuliaremijos sukėlėjo atsparumas

F. tularensis yra gana stabilus išorinėje aplinkoje, ypač jei yra patologinėje medžiagoje. Pašaruose, grūduose, užterštuose sergančių graužikų išmatomis, jis išgyvena iki 4 mėnesių; vandenyje – iki 3 mėnesių; lede – daugiau nei 1 mėnesį. Jis jautrus tiesioginiams saulės spinduliams (žūsta per 30 minučių), aukštai temperatūrai (60 °C temperatūroje žūsta per 10 minučių), veikiamas 3 % lizolio tirpalo, 50 % alkoholio, formalino ir kitų antiseptikų žūsta per 5–10 minučių.

Tuliaremijos epidemiologija

Pagrindinis tuliaremijos šaltinis gamtoje yra graužikai, tarp kurių natūraliomis sąlygomis stebimos epizootijos. Žmonės užsikrečia tik nuo gyvūnų; sukėlėjas nėra perduodamas iš žmogaus žmogui. Sukėlėjas rastas 82 graužikų ir kiškiažvėrių rūšyse, dažniausiai aptinkamas 4 šeimų atstovuose: pelių tipo graužikuose (Muridae), kiškiuose (Leporidae), voverėse (Sciuridae) ir jurginuose (Dipodidae). Rusijoje pagrindiniai nešiotojai yra pelių tipo graužikai: vandens žiurkės, paprastieji pelėnai, naminės pelės ir ondatros.

Pagal jautrumą tuliaremijai gyvūnai gali būti suskirstyti į keturias grupes:

• 1 grupė – jautriausi (pelėnai, vandens žiurkės, naminės pelės, baltosios pelės, jūrų kiaulytės ir kai kurie kiti). Minimali mirtina dozė yra viena mikrobinė ląstelė;
• 2 grupė – mažiau jautrios (pilkosios žiurkės, kurkutės ir kt.). Minimali mirtina dozė yra 1 milijardas mikrobų ląstelių, tačiau vienos mikrobų ląstelės pakanka, kad užkrėstų kai kurias iš jų;
• 3 grupė (plėšrūnai – katės, lapės, šeškai). Atsparūs didelėms infekcinėms dozėms, liga tęsiasi be matomų apraiškų;
• 4 grupė – imuniniai nuo tuliaremijos (kanopiniai, šaltakraujai gyvūnai, paukščiai).

Žmonėms minimali užkrečiamoji dozė yra viena mikrobinė ląstelė. Žmonės gali užsikrėsti visais įmanomais būdais: tiesioginio ir netiesioginio kontakto su sergančiais graužikais, jų lavonais ar graužikų užkrėstais daiktais metu; per maistą (vartojant graužikų užkrėstą maistą ir vandenį), ore esančiomis dulkėmis ir perdavimo būdu. Tuliaremijos bakterijų infekcija nustatyta 77 kraujasiurbių nariuotakojų rūšims. Ypač svarbios yra iksodidinės erkės, kurių organizme ligos sukėlėjas išlieka visą gyvenimą ir netgi transovarialiniu būdu perduodamas palikuonims. Šios aplinkybės prisideda prie ligos įsitvirtinimo gamtoje. Žmonės erkėmis užsikrečia ne įkandus, o dėl to, kad ligos sukėlėjas patenka ant odos kartu su erkės išmatomis.

Rusijoje yra 7 pagrindiniai tuliaremijos židinių kraštovaizdžio tipai: pelkės, pievos, stepės, miškai, priekalnės, tundra ir tugai (dykuma).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Tuliaremijos simptomai

Tuliaremijos sukėlėjas į organizmą prasiskverbia per išorinius dangalus (pažeistą ir nepažeistą odą bei gleivines). Įsiskverbimo vietoje dažnai susidaro opos. Per limfagysles bakterijos patenka į regioninį limfmazgį ir laisvai jame dauginasi; uždegiminis procesas veda prie burbulo susidarymo. Iš čia sukėlėjas prasiskverbia į kraują, bakteremija sukelia proceso generalizaciją, jame dalyvauja įvairūs organai ir audiniai, bakterijų dauginimasis veda prie granulomų ir nekrozinių opų susidarymo. Alerginis organizmo pertvarkymas susijęs su bakteremija ir generalizacija. Tuliaremijos inkubacinis periodas svyruoja nuo 2 iki 8 dienų. Liga prasideda ūmiai: atsiranda karščiavimas, galvos skausmas, raumenų skausmas, veido hiperemija. Tolesnė eiga priklauso nuo patekimo vartų vietos, pagal kurią skiriamos šios klinikinės tuliaremijos formos: opinė-liaukinė (buboninė), akies-liaukinė, angininė-liaukinė, pilvo ir plaučių. Mirtingumas nuo tuliaremijos neviršija 1-2%.

Poinfekcinis imunitetas yra stiprus, patvarus, daugeliu atvejų trunkantis visą gyvenimą, ląstelinio pobūdžio, jį daugiausia sukelia T limfocitai ir makrofagai, mažesniu mastu – antikūnai. Asmenų, turinčių imunitetą, fagocitozė yra visiška.

Tuliaremijos laboratorinė diagnostika

Tuliaremijos diagnozei naudojami visi mikrobiologiniai metodai. Tyrimas atliekamas saugiose laboratorijose. Tyrimo medžiaga – kraujas, burbulo punkcija, opos išgrandžiavimas, junginės išskyros, ryklės apnašos, skrepliai ir kt. – priklauso nuo klinikinės ligos formos. Be to, tyrimui gali būti imamas vanduo ir maisto produktai. Natūraliuose tuliaremijos židiniuose atliekami planiniai sistemingi tyrimai, siekiant išskirti tuliaremijos sukėlėją iš graužikų.

Bakteriologinis tuliaremijos diagnozavimo žmonėms metodas retai duoda teigiamų rezultatų. Grynoji kultūra paprastai išskiriama, sukaupus ją iš jautrių laboratorinių gyvūnų. Biologiniams tyrimams naudojamos baltosios pelės ir jūrų kiaulytės. Pelės užkrečiamos poodiniu būdu, jūrų kiaulytės – intraperitoniniu būdu; gyvūnai nugaišta 3–6 dieną, kartais po šalnų. Užkrėsti gyvūnai laikomi specialiomis sąlygomis (kaip diagnozuojant marą) ir stebimi 6–14 dienų. Eksperimentiniai gyvūnai nemiršta 7–15 dienų, jie paskerdžiami 15–20 dieną, o lavonai autopsija. Sergant tuliaremija, nustatomi patologiniai ir anatominiai pokyčiai produktyvaus proceso su nekroze forma. Grynoji kultūra išskiriama iš vidaus organų ant trynio terpės, gliukozės-cisteino kraujo židinio ir kt. Identifikavimas grindžiamas patogeno morfologija ir tinktūrinėmis savybėmis, augimo nebuvimu MPA ir agliutinacija su homologišku serumu. Patogeniškumas baltosioms pelėms ir jūrų kiaulytėms. Gryną kultūrą galima išskirti užkrėsti 12 dienų viščiukų embrionus ir trynio maišelį. Norint išskirti gryną patogeno kultūrą iš vandens, jis centrifuguojamas arba filtruojamas per bakterinius filtrus, o nuosėdos naudojamos laboratoriniams gyvūnams užkrėsti. Tiriant maisto produktus, jie plaunami MP B, centrifuguojami, o nuosėdos naudojamos laboratoriniams gyvūnams užkrėsti.

Kartu su bakteriologiniu tyrimu iš tiriamos medžiagos paruošiami tepinėliai-atspaudai, kurie dažomi pagal Romanovsky-Giemsa metodą. Organų tepinėliuose galima aptikti mažas kokoso ir lazdelės formos bakterijas, kurios išsidėsčiusios ląstelės viduje ir susitelkusios į sankaupas, sudarydamos subtilią kapsulę.

Diagnostikai naudojama išsami agliutinacijos reakcija, RPGA ir RIF.

Ankstyvai tuliaremijos diagnostikai (nuo 5 dienos po ligos pradžios) naudojami alerginiai testai. Naudojami dviejų tipų tularinas ir atitinkamai du jų vartojimo būdai: odinis ir intraderminis. Kadangi abiejų tipų tularine alergeno koncentracija skiriasi, odos tularino naudojimas intraderminiam testui yra nepriimtinas ir atvirkščiai. Alerginės reakcijos rezultatai vertinami dinamiškai po 24, 36, 48 valandų. Teigiamu rezultatu laikomas ne mažesnis kaip 5 mm skersmens infiltratas. Vakcinuotiems asmenims arba tiems, kurie sirgo tuliaremija, alerginiai testai išlieka teigiami daugelį metų (anamnezinė reakcija).

Specifinė tuliaremijos prevencija

Specifinei profilaktikai naudojama vakcina nuo tuliaremijos, kurią 1930 m. iš Me 15 padermės gavo Rusijos karo gydytojai B. J. Elbertas ir N. A. Gaiskis. Vakcina suteikia stiprų imunitetą 5–6 metams užsikrėtus europiniu ir holarktiniu porūšiais ir yra veiksminga prieš amerikietišką patogeno atmainą. Vakcinacija atliekama pagal epidemiologines indikacijas, taip pat rizikos grupėms priklausantiems žmonėms. Leidžiama vienu metu skiepytis nuo tuliaremijos ir bruceliozės; tuliaremijos ir maro, taip pat nuo tuliaremijos ir kai kurių kitų infekcijų.

Nespecifinė tuliaremijos prevencija yra tokia pati kaip ir kitų zoonozių atveju ir pirmiausia skirta graužikų kontrolei.