Hepatito E virusas

Hepatito E virusas (HEV) yra sferinės formos, 27–34 nm skersmens, nukleokapsidės simetrijos tipas yra ikosaedrinis, nėra išorinės membranos.

Hepatito E virusas buvo nustatytas pacientų, kurie sirgo ne A, ne B virusiniu hepatitu enteriniu infekcijos keliu, išmatose, taip pat eksperimentinių gyvūnų (beždžionių), užkrėstų ta pačia virusą turinčia medžiaga, išmatose, naudojant imuninę elektroninę mikroskopiją (IEM) naudojant šio hepatito pasveikusių pacientų serumą.

Iki šiol nustatyta, kad hepatito E virusas turi šias fizikines ir chemines bei biologines savybes.

• Morfologiškai jį vaizduoja sferinės dalelės be apvalkalo; jų paviršius turi smaigalių ir įdubimų; virusas suyra veikiamas CS CL, užšaldomas/atšildomas ir išlieka -20 °C temperatūroje.
• Virusinių dalelių skersmuo yra nuo 32 iki 34 nm.
• Genomą vaizduoja 7,5 kb ilgio, viengrandė, poliadenilinta RNR.
• Sedimentacijos koeficientas yra 183 S (defektingoms į virusą panašioms dalelėms – 165 S). KTa/Glu gradiente ^{plūdrumo tankis yra 1,29 g/cm3.}
• In vitro kultivavimas buvo nesėkmingas.
• Žindomoms pelėms į smegenis suleidus išmatų ekstrakto suspensijos, kurioje yra HEV dalelių, joms ligos nesukelia.

Naudojant molekulinį klonavimą, iš užkrėstų makakų beždžionių tulžies buvo gauti dideli HEV kiekiai. Buvo įrodyta virusinių dalelių, gautų iš hepatito E pacientų išmatų ekstraktų įvairiuose pasaulio regionuose (Somalyje, Borneo, Pakistane, Centrinėje Azijoje ir kt.), tapatybė. HEV genomo struktūra buvo praktiškai iššifruota. Analizuojant nukleotidų sekas ir genomo organizaciją, nustatyta, kad HEV skiriasi nuo pikornavirusų ir kad jis negali priklausyti kalicivirusams (kalicivirusams), kaip buvo manyta iš pradžių.

Genomą reprezentuoja viengrandė nefragmentuota teigiama 7500 bazių RNR, turinti tris atvirus skaitymo rėmelius, koduojančius virusui būdingus baltymus. Viriono paviršiuje yra įdubimų, primenančių taures (graikiškas taurelė), todėl virusas iš pradžių buvo priskirtas Caliciviridae šeimai (Hepavirus gentis). Išsamesnis HEV genomo tyrimas parodė, kad jo RNR nukleotidų seka yra unikali ir tik šiek tiek panaši į raudonukės virusą.

Šiuo metu HEV priskiriamas Hepereviridae šeimai, Heperevirus genčiai, hepatito E virusui.

HEV antigenas(-ai) – HEV Ag buvo identifikuotas viruso dalelių paviršiuje imuninės elektroninės mikroskopijos būdu, hepatocituose – imunohistocheminiais metodais. Eksperimentiniams gyvūnams (makakoms ir šimpanzėms), sergantiems hepatitu E, HEV Ag buvo aptiktas hepatocitų citoplazmoje imunofluorescencijos metodu, sluoksniuojant kepenų pjūvius su tų pačių gyvūnų serumais, gautais sveikimo laikotarpiu; HEV Ag specifiškumas vėliau buvo patvirtintas absorbcijos tyrimais, naudojant rekombinantinius baltymus, gautus klonuojant HEV genomą.

Imunomorfologiniuose hepatito E infekuotų beždžionių tyrimuose granuliuotos HEV Ag sankaupos buvo lokalizuotos hepatocitų citoplazmoje, o HEV Ag turinčios granulės buvo išsidėsčiusios atsitiktinai, o granulių skaičius skirtingose ląstelėse labai skyrėsi. Nebuvo nustatyta jokia HEV Ag teigiamų hepatocitų preferencinė lokalizacija jokioje konkrečioje kepenų skiltelės zonoje. Hepatitas, kuriame yra HEV Ag, buvo nuolat aptinkamas prieš padidėjus ALT aktyvumui, vėliau išliko per visą hiperenziemijos laikotarpį ir praktiškai išnyko normalizavus ALT aktyvumą.

HEV genomo sekos buvo nustatytos žmonių, sergančių hepatitu E, ir eksperimentinių gyvūnų (beždžionių) išmatose, tulžyje ir kraujo serume; humoralinis imuninis atsakas buvo tirtas nuo ūminės ligos stadijos iki pasveikimo.

Didžiausia HEV dalelių koncentracija užkrėstų makakų tulžyje buvo aptikta prieš pasiekiant ALT aktyvumo piką infekcijos stadijoje, kai buvo užfiksuotas HEV Ag buvimo kepenyse pikas.

HEV RNR buvo rasta užsikrėtusių žmonių ir primatų išmatose, tulžyje ir serume.

Specifinių antikūnų (anti-HEV) buvimas žmonių, sergančių hepatitu E, ir eksperimentinių gyvūnų kraujo serume buvo nustatytas naudojant imuninę elektroninę mikroskopiją ir fluorescencinių antikūnų metodą, naudojant HEV dalelių preparatus arba kepenų pjūvius, kuriuose kaip substratas buvo HEV Ag.

Tolesni HEV izoliatų ir sveikstančiųjų serumų, gautų iš pacientų skirtinguose geografiniuose regionuose, kuriuose pasitaikė hepatito E protrūkiai ar pavieniai atvejai, taip pat HEV dalelių ir serumų, gautų iš šiais izoliatais užkrėstų primatų, skerspjūvio tyrimai galiausiai įtikino tyrėjus, kad yra vienas virusas (arba serologiškai susijusių virusų klasė), atsakingas už hepatitą E visame pasaulyje.

Parodyta HEV genotipinė įvairovė. Nustatyti aštuoni viruso genotipai, kurių pagrindiniai prototipai buvo šie izoliatai: 1 genotipas – HEV izoliatas iš Birmos, 2 – iš Meksikos, 3 – iš JAV, 4 – iš Taivano ir Kinijos, 5 – iš Italijos, 6 – iš Graikijos, 7 – iš Graikijos (antrasis izoliatas), 8 – iš Argentinos.

Įrodyta, kad makakų ir šimpanzių ūminės hepatito E stadijos metu kraujo serume cirkuliuoja anti-HEV IgM ir IgG klasės antikūnai, o sveikimo laikotarpio serume – tik anti-HEV klasės antikūnai.

Daugelio tyrimų metu anti-HEV IgM buvo aptiktas 73 % pacientų, sergančių hepatitu E, per pirmąsias 26 dienas nuo geltos pradžios; sveikimo laikotarpiu anti-HEV IgG buvo aptiktas 90 % pacientų.

Infekcijos šaltinis yra tik žmonės, sukėlėjas išsiskiria su išmatomis. Užsikrėtimo mechanizmas yra fekalinis-oralinis. Pagrindinis užsikrėtimo kelias yra per išmatomis užterštą vandenį. Užkrečiamoji dozė yra žymiai didesnė nei hepatito A viruso. Jautrumas HEV virusui yra universalus. Epidemijos gali paveikti dešimtis tūkstančių žmonių, jei pažeidžiamas gėrimo režimas, ypač sezoninių darbų metu vasarą ir rudenį.

Kliniškai hepatitas E yra lengvesnės formos nei hepatitas A, ir perėjimo į lėtinę formą nepastebėta. 85–90 % pacientų hepatitas E yra lengvas arba vidutinio sunkumo, dažnai besimptomis. Tačiau nėščioms moterims hepatitas E yra sunkus, mirtingumas siekia iki 20 %.

Diagnostikai naudojama imuninė elektroninė mikroskopija; pasiūlyta testo sistema antikūnams prieš HEV antigenus aptikti. Imunitetas po infekcijos yra stiprus, trunkantis visą gyvenimą ir atsiranda dėl virusą neutralizuojančių antikūnų bei imuninės atminties ląstelių. Specifinei profilaktikai pasiūlyta viso viriono vakcina, kuriamos gyvos ir rekombinantinės vakcinos.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]