Kariotipų analizė

Vienas iš citogenetinių tyrimų, skirtų studijuoti chromosomas, metodų yra kariotyping. Analizė turi keletą požymių elgesiui, taip pat keliems tipams. 

Kariotipas yra žmogaus chromosomų rinkinys. Jame aprašomos visos genų savybės: dydis, kiekis, forma. Paprastai genome susideda iš 46 chromosomų, iš kurių 44 yra autosomalūs, tai yra, jie yra atsakingi už paveldimus požymius (plaukų ir akių spalvą, ausų formą ir kt.). Paskutinė pora yra lyties chromosomos, kurios lemia kariotipą: moterys 46XX ir vyrai 46XU.

Diagnostikos procesas atskleidžia bet kokius genomo pažeidimus:

• Kiekybinės sudėties pokyčiai.
• Konstrukcijos pažeidimas.
• Kokybės pažeidimas.

Paprastai kariotipą atlieka naujagimis, kad nustatytų genetines anomalijas. Analizuojama taip pat ir poroms, planuojančioms nėštumą. Šiuo atveju tyrimas atskleidžia neatitikimą tarp genų, kuris gali sukelti paveldimų patologijų vaiko gimimą.

Molekulinės kariotypizacijos tipai:

1. Tikslinė

Paskirtas patvirtinti įvairius anomalijos ir sindromus. Tai leidžia nustatyti nėštumo praradimo priežastis: užšaldytus vaisius, persileidimą, nutraukimą pagal medicinos parodymus. Nustato papildomo chromosomų komplekso etiologiją su triploidais. Analizuojama mikroskopinių ląstelių, kuriuose yra 350 tūkstančių žymeklių, koncentruotos kliniškai reikšmingose chromosomų srityse. Šio tyrimo sprendimo galia yra nuo 1 mln.

2. Standartinis

Nustato klinikinės reikšmės genomo pažeidimus. Diagnozuoja mikrodelecijos sindromus ir patologijas, susijusias su autosominės dominuojančios ligos. Nustato chromosomų nepakankamumo priežastis nediferencijuotuose sindromuose pacientams, sergantiems vystymosi sutrikimų, įgimtų anomalijų, uždelsto psichomotorinio vystymosi, autizmo.

Tai leidžia atskleisti chromosomų anomalijas prenataliniame laikotarpyje. Ši technika nustato aneuploidiją, patologinius mikrodelecijos vaisius. Tyrimas atliekamas su mikroelementu, kuriame yra 750 000 didelio tankio žymeklių, kurie apima visas reikšmingas genomo dalis. Standartinės kariotypinės analizės galingumas yra nuo 200 000 bp.

3. Išplėstas

Leidžia nustatyti chromosomų nepakankamumo priežastis vaikų nediferencijuotuose sindromuose. Nurodo patogeniškus pašalinimus, ty chromosomų sričių išnykimą ir dubliavimą - papildomas genų kopijas. Diagnozuoja vietas, kuriose prarandama heterozigotybė, autosominės recesinės patologijos priežastys.

Išplėstinė chromosomų mikrograužų analizė atliekama naudojant didelio tankio mikrograužus, kuriuose yra daugiau kaip 2,6 milijono atskirų didelio tankio žymeklių. Šio tyrimo išsprendimo galia apima visą genomą ir apima nuo 50 000 bp. Dėl to visi genų kodo skyriai yra labai tiksliai ištirti, todėl galima atskleisti mažiausias struktūrines trikdžius.

Paprastai kariotipo analizė atliekama pagal genetikos užduotį. Priklausomai nuo medicininių nuorodų, gali būti priskirtas vienas iš pirmiau nurodytų tipų. Standartinis tyrimas kainuoja mažiau, bet jis retai nustatomas, nes nerodo daugybės chromosomų anomalijų. Tikslinis kariotipavimas yra brangesnė analizė, todėl ji yra nustatyta, esant klinikiniams sindromų požymiams ir kitoms anomalijoms. Išplėstinė diagnozė yra brangiausia ir informatyviausia, nes tai leidžia visiškai ištirti visus 23 chromosomų rinkinius.

Kur atlikti kariotype analizę?

Chromosomų mikromatrix analizė perduodama, kaip nurodė genetikas. Tyrimo tikslas - ištirti paciento genomą ir atskleisti bet kokius jos struktūros anomalijas.

Chromosomos yra DNR grandinės, jų skaičius ir struktūra turi savo specifiškumą kiekvienai rūšiai. Žmogaus kūne yra 23 poros chromosomų. Viena pora nustato lytį: moterims - 46XX chromosomas, o vyrams - 46XY. Likusieji genai yra autosome, tai yra, ne genai.

Kariotipizavimo ypatumai:

• Analizė atliekama 1 kartą, nes chromosomų rinkinys nesikeičia visą gyvenimą.
• Leidžia nustatyti sutuoktinių reprodukcinių problemų priežastis.
• Diagnozuoja keletą malformacijų vaikams.
• Nustato genetinius anomalijos.

Kariotipas pateikiamas specializuotoje medicinos laboratorijoje arba genetiniame centre. Tyrimą atlieka kvalifikuotas gydytojas. Paprastai bandymai yra parengti per 1-2 savaites. Rezultatai iššifruoja genetikas.

Procedūros nuorodos kariotipų analizė

Kariotipizavimo procedūra yra skirta naujagimiams, norint nustatyti genetinius anomalius ir paveldimus patologijas, taip pat vyrams ir moterims nėštumo planavimo etape. Analizuojant taip pat yra keletas kitų požymių:

• Nežinomos kilmės kilmės nevaisingumas vyrui ir moteriai.
• Vyro nevaisingumas: sunkus ir ne obstrukcinis oligozoospermija, teratozoospermija.
• Savavališkas abortas: persileidimai, sušalusis vaisius, priešlaikiniai gimdymai.
• Pirminė amenorėja.
• Anamnezėje ankstyvos naujagimių mirties atvejai.
• Vaikams, turintiems chromosomų anomalijas.
• Vaikai, turintys kelias įgimtas anomalijas.
• Tėvų amžius yra daugiau nei 35 metai.
• Keli nesėkmingi bandymai apvaisinti IVF.
• Paveldima liga viename iš būsimų tėvų.
• Hormoniniai sutrikimai moterims.
• Nežinomos etiologijos spermatogenezė.
• Glaudžiai susijusi santuoka.
• Nepalanki ekologinė gyvenamoji aplinka.
• Ilgalaikis sąlytis su chemikalais, apšvitinimas.
• Kenksmingi įpročiai: rūkymas, alkoholis, narkotikai, priklausomybė nuo narkotikų.

Vaikų kariotipavimas atliekamas tokiais atvejais:

• Įgimtos defektų.
• Psichikos lėtėjimas.
• Vėluojama psichomotorinė plėtra.
• Mikroanomalia ir uždelstas psichoaktyvumo vystymasis.
• Seksualinės anomalijos.
• Seksualinės plėtros pažeidimas ar atidėjimas.
• Augimo sulėtėjimas.
• Vaiko sveikatos prognozė.

Diagnozė rekomenduojama visiems sutuoktiniams planuojant nėštumą. Be to, analizė gali būti atlikta nėštumo metu, tai yra, prenatalinės chromosomos tyrimai.

Kaip atrodo kariotipas?

Viso chromosomų komplekso požymių visuma yra kariotipas. Siekiant sisteminti chromosomų analizę, naudojama tarptautinė citogenetinė nomenklatūra, pagrįsta skirtingu genomo gleivinimu, kad išsamiai aprašytų visą DNR grandinę.

Tyrimas atskleidžia:

• Trisomy - poroje yra trečioji papildoma chromosoma.
• Monosomija - vienoje poroje trūksta vienos chromosomos.
• Inversija - genomo ruožas.
• Translocation - tai svetainių judėjimas.
• Pašalinimas yra svetainės praradimas.
• Kopijavimas - fragmento dvigubinimas.

Analizės rezultatai registruojami naudojant šią sistemą:

1. Bendras chromosomų skaičius ir genitalijų rinkinys yra 46, XX; 46, XY.
2. Papildomos ir trūkstamos chromosomos yra nurodytos, pavyzdžiui, 47, XY, + 21; 46, XY-18.
3. Trumpą genomo ranką žymi simbolis p, o ilgas - q.
4. Translokacija yra t, o išbraukimas yra del, pvz., 46, XX, del (6) (p. 12.3)

Parengta kariotype analizė yra tokia:

• 46, XX - norma ar įvertinimas moteriai.
• 46, XY yra žmogaus norma.
• 45, X - Šereshevskio-Turnerio sindromas.
• 47 XXY - Klinefelterio sindromas.
• 47, XXX - trisomija X chromosomos.
• 47, XX (XY), +21 - Down'o sindromas.
• 47, XY (XX), + 18 - Edwards sindromas.
• 47, XX (XY), + 13 - Patau sindromas.

Citogenetiniai tyrimai atskleidžia įvairias anomalijas DNR grandinės struktūroje. Analizė taip pat diagnozuoja daugelio ligų priepuolius: endokrinines patologijas, hipertenziją, sąnarių pažeidimą, miokardo infarktą ir kitus.

[1], [2], [3], [4]

Paruošimas

Kraujo ląstelės yra naudojamos analizuojant kariotipą, todėl labai svarbu tinkamai pasirengti diagnozei.

Pasirengimas chromosomų tyrimams prasideda prieš dvi savaites, kol neatsižvelgiama į jų poveikį kūnui.

• Ūminės ir lėtinės ligos.
• Vaistų priėmimas.
• Alkoholio ir narkotikų vartojimas, rūkymas.

Analizuojant, veninis kraujas naudojamas 4 ml. Kraujo mėginiai imami tuščiu skrandžiu.

[5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]

Technika kariotipų analizė

Žmogaus genomo negalima matyti plika akimi, chromosomos matomos tik mikroskopu tam tikruose ląstelių dalijimosi fazėse. Norint nustatyti kariotipą, naudojami vieno branduolio leukocitai, odos fibroblastai arba kaulų čiulpų ląstelės. Tyrimui ląstelės yra tinkamos mitozės metafazėje. Biologinis skystis dedamas į mėgintuvėlį su ličiu ir heparinu. Kraujas kultivuojamas 72 valandas.

Tada kultūra yra praturtintas specialiomis medžiagomis, kurios sustabdo ląstelių dalijimą būtinu diagnozės fazės etapu. Iš kultūros atliekami narkotikai ant stiklo, kurie yra tiriami. Papildoma informacija apie genomo būklę gaunama jo spalvos. Kiekviena chromosoma turi striaciją, kuri aiškiai matoma po dažymo.

Atliekant klasikinį chromosomų tyrimą, dažymas atliekamas su įvairiais dažais ir jų mišiniais. Dažai skirtingai susideda iš skirtingų genomo dalių, dėl to dažymas nelygus. Dėl to susidaro skersinių ženklų kompleksas, atspindintis chromosomos linijinę heterogeniškumą.

Pagrindiniai dažymo metodai:

• Q - vaizduoja labai detaliai. Šis metodas buvo vadinamas "Caspersson" akrilio-garstyčių dažymu, kuris buvo diagnozuojamas fluorescuojančiu mikroskopu. Jis naudojamas genetinei lyčiai analizuoti, identifikuoti translokacijas tarp X ir Y, Y ir autosomų, taip pat Y-chromosomų mozaicizmo patikrinimui.
• G yra modifikuotas Romanovskio-Giemso metodas. Yra didesnis jautrumas, palyginti su Q. Jis naudojamas kaip standartinis citogenetinės analizės metodas. Nustatomos mažos aberacijos, žymeklio chromosomos.
• R - naudojamas homologiniams G ir Q negatyviniams regionams aptikti. Genomas gydomas acridino oranžinės spalvos.
• C - analizuoja chromosomų centromerinius regionus su konstituentiniu heterohromatinu ir tikra distalia dalimi Y.
• T - naudojamas telomerinių DNR grandinių regionams analizuoti.

Spalvotos ir fiksuotos ląstelės fotografuojamos mikroskopu. Iš gautų fotografijų rinkinio sudaro suskaitmeninis autosomų porų rinkinys, ty sisteminis kariotipas. DNR grandynų atvaizdas yra orientuotas vertikaliai, numeravimas priklauso nuo dydžio, o poros lytinių chromosomų, apimančių rinkinį.

Kraujo preparatai analizuojami 20-100 metafazių plokštelių mikroskopu, siekiant nustatyti kiekybines ir struktūrines aberacijas.

• Kiekybinės aberacijos yra genų skaičiaus pokyčiai. Panaši stebima ir su Dauno sindromu, kai yra papildomų 21 chromosomų.
• Struktūrinės aberacijos yra pačios chromosomų pasikeitimas. Tai gali būti genomo kritimas, vienos dalies perkėlimas į kitą, 180 laipsnių ir daugiau rotacija.

Kariotyping technika yra sudėtingas procesas. Tyrimą vykdo aukštos kvalifikacijos specialistai. Norėdami diagnozuoti vieno žmogaus genomą, gali užtrukti visą darbo dieną.

Sutuoktinių kariotijos analizė

Kai susituokę, dauguma porų susiduria su koncepcija. Parodyta, kad citogenetinė analizė sprendžia reprodukcines problemas. Sutuoktinių kariotipavimas leidžia atskleisti genomo struktūroje esančias anomalijas, trukdančias turėti vaikus ar sutrikdyti nėštumo procesą. Keisti kariotipą neįmanoma, tačiau diagnozės dėka galite nustatyti tikrąsias nevaisingumo ir abortų priežastis, rasti būdų, kaip jas išspręsti.

Chromosomų mikromatrix analizė atliekama norint nustatyti struktūros struktūros ir DNR kanalų, galinčių sukelti paveldimus būsimus vaikus ar sutuoktinių nevaisingumą, skaičių nukrypimų. Yra būsimų tėvų analizės tarptautiniai standartai:

• Šeimoje vyraujančios chromosominės patologijos.
• Nėštumo nutraukimas anamnezėje.
• Nėštumo amžius yra vyresnis nei 35 metų.
• Ilgalaikis mutageninis poveikis organizmui.

Iki šiol naudojami tokie kariotyping metodai:

1. Chromosomų analizė kraujo kūneliuose.

Tai leidžia nustatyti nevaisingumo atvejus, kai tikimybė turėti vaiką yra žymiai sumažėjusi arba visiškai nėra vieno iš sutuoktinių. Tyrimas taip pat nustato genomo nestabilumo riziką. Norint gydyti sutrikimus, pacientams gali būti paskirti antioksidantai ir imunomoduliatoriai, kurie sumažina kontracepcijos sutrikimą.

Venų kraujas imamas tyrimo metu. Iš biologinio skysčio išskiriami limfocitai, kurie yra stimuliuojami mėgintuvėlyje, apdoroti specialia medžiaga, dažytos ir ištirtos. Pavyzdžiui, Klinefelterio sindromu, kuris pasireiškia kaip vyrų nevaisingumas, kariotipoje yra papildoma 47 XX chromosoma. Taip pat galima nustatyti genomo struktūrinius pokyčius: inversiją, ištrynimą, perkėlimą.

2. Prenatalinis tyrimas.

Nustato vaisiaus chromosomų patologijas ankstyvosiose nėštumo stadijose. Toks tyrimas yra būtinas genetinių ligų ar anomalijų diagnozei, dėl kurios vaisiaus mirtis gimdoje.

Tyrimams atlikti gali būti naudojami tokie metodai:

• Neinvazinis - saugus motinai ir vaisiui. Diagnozė atliekama naudojant vaiko ultragarsą ir išsamią moters kraujo biocheminę analizę.
• Invaziniai - choriono biopsija, kanokentesas, placentocentesis, amniocentezė. Atliekant analizę, kaupiamos placentos arba choriono, amniono skysčių arba kraujo ląstelės iš virkštelės. Nepaisant didelio diagnostikos tikslumą, invazinės technikos rizika yra padidėjusi komplikacijų, todėl atliekami tik pagal griežtas medicinines indikacijas už aptikta per ultragarso vaisiaus patologija, naujos motinos vyresni nei 35 metų, tėvų su chromosomų anomalijos, pokyčių biocheminių kraujo žymenų.

Citogenetiniams tyrimams gali būti naudojamas ne tik kraujas, bet ir ejakuliatas. Šis metodas vadinamas Tuneliu ir leidžia nustatyti vieną iš dažniausiai pasitaikančių vyrų nevaisingumo priežasčių normaliu kariotipu - spermos DNR suskaidymu.

Jei viename iš sutuoktinių yra genų mutacijos ar chromosomų aberacijos, gydytojas nurodo galimus pavojus ir vaiko, kuriam būdingi nukrypimai, tikimybę. Kadangi genų patologijos yra neišmatuojamos, tolesnis pora sprendžiamas atskirai: naudokite donorinę medžiagą (spermą, kiaušinį), gimdymo riziką ar be vaikų.

Jei nėštumo procesuose, tiek moterims, tiek embrionams nustatomi genomo nukrypimai, gydytojai rekomenduoja nutraukti tokį nėštumą. Taip yra dėl padidėjusios kūdikio gimimo rizikos, kuriam būdingi rimti ir kai kuriais atvejais neatitinkantys gyvenimo sąlygų. Atliekant analizę ir iššifruojant jų rezultatus, atlieka genetikas.

[12], [13], [14], [15], [16]

Kraujo tyrimas kariotipui

Dažniausiai kariotyping atliekamas analizuojant veninį kraują, kultivuojant jo ląsteles. Tačiau citogenetinių tyrimų atlikimui gali būti naudojama ir kita biologinė medžiaga:

• Ląstelės iš amniono skysčio.
• Placenta.
• Embrionų ląstelės.
• Neteisinga medžiaga.
• Kaulų čiulpai.

Kokia medžiaga bus diagnozuojama, priklauso nuo analizės priežasties ir užduotys. Apytikslis kraujo tyrimo algoritmas:

• Maždaug 72 valandų skystis talpinamas į maistinę terpę 37 ° C temperatūroje.
• Kadangi chromosomos yra matomos ląstelių dalijimosi metafazės stadijoje, į biologinę terpę pridedamas reagentas, kuris sustabdo skilimo procesą reikiamoje fazėje.
• Ląstelių kultūra dažoma, fiksuojama ir analizuojama mikroskopu.

Analizė kraujo kariotipų suteikia labai tiksliai nustatyti bet kokią anomalijų atsižvelgiant į DNR sričių struktūrą: intrachromosomal ir interchromosomal pertvarkymai, pakeisti genominių fragmentų užsakymą abu. Pagrindinis diagnostikos tikslas - nustatyti genetines ligas.

[17], [18], [19], [20],

Kariotipo genetinė analizė

Citogenetinė diagnozė, kuria siekiama išmatuoti chromosomų dydį, skaičių ir formą, yra genetinis kariotipavimas. Analizėje yra tokios nuorodos, kaip atlikti:

• Gimdymo defektų nustatymas.
• Vaiko paveldimas patologijas pavojus.
• Įtarimas dėl nevaisingumo.
• Spermatogramos pažeidimas.
• Nenorėjimas nėštumo.
• Parengti tam tikrų neoplastinių navikų tipų gydymo planą.

Kariotipo genetinė analizė taip pat įtraukta į privalomąjį sutuoktinių, planuojančių turėti vaikus, sąrašą.

Dažniausiai tyrimas atskleidžia tokias patologijas:

1. Aneuplodia yra chromosomų skaičiaus pokytis tiek didėjimo, tiek mažėjimo kryptimi. Balanso pažeidimas sukelia persileidimus, kūdikių su sunkiomis įgimtomis patologijomis gimimą. Anuoploidijos mozaikos forma sukelia Dauno sindromą, Edwardso sindromą ir kitas labai nesuderinamas ligas.
2. Atkurti kariotipą - jei pokyčiai yra subalansuoti, tada chromosomų rinkinys nesulaužtas, o tiesiog skirtingai įsakomas. Su nesubalansuotais pokyčiais gresia genų mutacijos, kurios ypač pavojingos būsimoms kartoms.
3. Translokacija yra neįprasta DNR grandžių struktūra, tai yra vieno genomo fragmento pakeitimas kita. Daugeliu atvejų ji yra paveldima.
4. Lytinės diferenciacijos pažeidimas yra labai retas chromosomų sutrikimas, kuris ne visada pasireiškia išoriniais simptomais. Nesaugumas su fenotipiniu lytiniu santykiu gali būti viena iš nevaisingumo priežasčių.

Kariotipo analizė atliekama genetinėse laboratorijose, kvalifikuotiems genetikos daktarams.

Kariotipų analizė su aberacijomis

Aberacijos yra chromosomų struktūros sutrikimai, kuriuos sukelia jų pertrūkiai ir persidengimas, prarandant arba dubliuojant genetinę medžiagą. Karyotyping with aberrations - tai tyrimas, kurio metu siekiama nustatyti visus genomo struktūros pokyčius.

Aberacijų tipai:

• Kiekybinis - chromosomų skaičiaus pažeidimas.
• Struktūriniai - genomo struktūros pažeidimas.
• Reguliarus - nustatomi daugumoje ar visose kūno ląstelėse.
• Nereguliarus - atsiranda dėl įvairių neigiamų veiksnių (virusų, spinduliuotės, cheminio poveikio) poveikio organizmui.

Analizė nustato kariotipą, jo ypatybes, įvairių neigiamų veiksnių poveikio požymius. Chromosominis tyrimas su aberacijomis atliekamas tokiais atvejais:

• Santuokos nevaisingumas.
• Spontaniniai persileidimai.
• Negyvosios gimimo atvejai anamnezėje.
• Ankstyvas kūdikių mirtingumas.
• Užšaldyta nėštumas.
• Įgimtos defektų.
• Seksualinės diferenciacijos pažeidimas.
• Įtarimai dėl chromosomų patologijos.
• Uždelstas psichinis, fizinis vystymasis.
• Egzaminas prieš IVF, ICSI ir kitas reprodukcines procedūras.

Skirtingai nuo klasikinio kariotypingo, ši analizė užima daugiau laiko ir kainuoja daugiau.

Kariotype analizė vaikui

Remiantis medicinine statistika, kūdikių mirtingumo priežastimis labai svarbus įgimtas patologijas. Laiku aptikus genetinius sutrikimus ir paveldimas ligas, vaikas tiriamas dėl kariotipo.

• Dažniausiai vaikams diagnozuojama trisomija - Downo sindromas. Ši patologija pasitaiko 1 iš 750 kūdikių ir pasireiškia įvairiais nukrypimais tiek fizinio, tiek intelekto vystyme.
• Antroje vietoje yra Klinefelterio sindromo paplitimas. Tai pasireiškia kaip seksualinio vystymosi uždelsimas paauglystėje ir pasireiškia 1 iš 600 naujagimių.
• Kita genetinė patologija, diagnozuota 1 iš 2500 moterų vaikų, yra Šereshevskio-Turnerio sindromas. Vaikystėje šią ligą patiria jaučiamas padidėjęs odos pigmentacija, pėdų, rankų ir galvos patinimas. Per brendimo laikotarpį trūksta menstruacijų, plauko linija po pažastų ir galvos, taip pat pieno liaukos nėra išsivysčiusios,

Kariotipavimas reikalingas ne tik mažiems vaikams su matomais nukrypimais, nes tai leidžia įtarti genetines problemas ir pradėti jų koregavimą. Analizė perduodama medicinos-genetiniame centre. Priklausomai nuo vaiko amžiaus, kraują galima paimti iš kulno arba iš venų. Jei reikia, genetikas gali reikalauti analizuoti kariotipą ir tėvus.

Naujagimio kariotipo analizė

Naujagimių atranka yra pirmoji naujagimių atlikta analizė. Tyrimas atliekamas gimdymo namuose 3-4 dienos gyvenimui, ankstyvam kūdikiui 7 dieną. Ankstyvasis kariotipavimas leidžia atskleisti genetinius anomalius ir sutrikimus DNR struktūroje prieš matant patologinius simptomus.

Norėdami anksti diagnozuoti, naudokite kraują iš kojos kulno. Citogenetiniai tyrimai yra skirti nustatyti tokias bendras vaikų patologijas kaip:

• Fenilketonurija yra paveldima liga, kuriai būdingas sumažėjęs aktyvumas arba fermento nebuvimas, suskaidantis aminorūgšties fenilalaniną. Vykstant progresuojant, smegenų sutrikimas ir protinis atsilikimas.
• Cistinė fibrozė - paveikia liaukas, kurios gamina paslaptis, virškinimo sultis, prakaito, seilių, gleivių. Sukelia sutrikusią virškinamojo trakto plaučių ir organų veiklą. Liga yra paveldima.
• Įgimta hipotirozė yra skydliaukės pažeidimas, kurio nepakanka hormonų. Tai veda prie fizinės ir psichinės plėtros vėlavimo.
• Adrenogenitalinis sindromas yra patologinė būklė, kai antinksčių žievė sukelia nepakankamą hormonų kiekį. Dėl to sutrikdyta lytinių organų raida.
• Galaktezimija yra patologija, kurios metu trikdoma galaktozės transformacija į gliukozę. Gydymą sudaro pieno produktų atmetimas. Neteisingai diagnozavus, jis gali sukelti aklumą ir mirtį.

Jei, atsižvelgiant į naujagimio kariotipo analizės rezultatus, nustatomi bet kokie nukrypimai ar anomalijos, tada diagnozei patikslinti atliekamas papildomų tyrimų rinkinys. Toks ankstyvas diagnozavimas padės laiku nustatyti bet kokias vaiko kūno problemas ir pradėti gydymą.

[21], [22], [23], [24], [25]

Kiek analizuojamas kariotipas?

Chromozės tyrimų trukmė trunka nuo 10 iki 21 dienos. Kai rezultatai parengti, priklauso nuo analizės tipo, ty nuo aberacijų ar klasikinio kariotypingo.

Parengta kariotipų analizė apima tokią informaciją:

• Chromosomų skaičius.
• Ar yra bet koks chromosomų struktūros pokytis.
• Ar yra kokių nors genomo tvarkos pažeidimų.

Rezultatų išaiškinimas ir jų interpretavimas priklauso genetikui. Jei nustatomi bet kokie nukrypimai, gydytojas teikia medicinines konsultacijas dėl tolesnės diagnozės ar gydymo nurodymų.

Normalus našumas

Normalios karyotypes žmonėms yra 46, XX arba 46, XY. Paprastai jų pasikeitimas įvyksta ankstyvuoju kūno vystymosi etapu:

• Dažniausiai sutrikimas įvyksta per gametogenezę (prieš embrioninį vystymąsi), kai tėvų lytinės ląstelės gamina zigoto kyotypą. Tolesnis tokio zigoto vystymas lemia tai, kad visi embriono ląstelės turi nenormalų genomą.
• Pažeidimas gali atsirasti ankstyvuoju zigoto padalijimo etapu. Tokiu atveju embrioną sudaro kelios ląstelių klonai su skirtingais kariotipais. Tai yra, vystosi mozaikizmas - viso organizmo ir jo organų kariotipų įvairovė

Genomo pokyčiai pasireiškia dėl įvairių patologijų ir trūkumų. Apsvarstykite bendras kariotipo anomalijas:

• 47, XXY; 48, XXXY - Klinefelterio sindromas, polisomija vyrams X-chromosomos.
• 45X0; 45X0 / 46XX; 45, X / 46, XY; 46, X iso (Xq) - Šereshevskio-Turnerio sindromas, X chromosomos monozomija, mozaicizmas.
• 47, XXX; 48, XXXX; 49, XXXXX - polisomija X chromosomos, trisomija.
• 47, XX, + 18; 47, ХY, + 18 - Edwards sindromas, trisomija 18 chromosomos.
• 46, XX, 5p- - katžolių kalbos sindromas, trumpos rankos pašalinimas 5 poros genomo.
• 47, XX, + 21; 47, XY, + 21 - Down'o liga, trisomija 21 chromosomos.
• 47, XX, + 13; 47, ХY, + 13 - Patau sindromas, trisomija apie chromosomą 13.

Citogenetiniai tyrimai yra skirti nustatyti DNR grandinių būseną, identifikuoti defektus ir anomalijas. Bet koks nuokrypis nuo įprastų rodiklių yra sudėtingo kūno tyrimo proga.

[26], [27], [28], [29], [30], [31], [32], [33], [34]

Analizės prietaisas

Norėdami iššifruoti kariotipą, naudojamas sekvenavimo metodas. Ši technika buvo sukurta 1970 m. Ir yra pagrįsta DNR aminorūgščių seka. Seksantinės mašinos naudoja interaktyvias cikliškas fermentines reakcijas, tolesnį apdorojimą ir gautų rezultatų palyginimą.

Pagrindinės sekvencinių funkcijos:

• Pirminis išsamus nežinomų genomų, egzamų, transkripcijų tyrimas.
• Kariotipavimas.
• Paleogenetika.
• Metagenomika ir mikrobų įvairovė.
• Atskyrimas ir kartografavimas.
• DNR metilinimo analizė.
• Stenogramų analizė.

Pirmajame etape aparatas sukuria DNR grandinių atsitiktinių sekų biblioteką. Po to sukuria amplikoną PCR, kurie naudojami kaip pavyzdžiai. Paskutiniame etape nustatoma visų fragmentų pirminė struktūra.

Naujausios kartos sekvenciniai įrenginiai yra visiškai automatizuoti ir plačiai naudojami genominei analizei, todėl žmogiškojo veiksnio dėka sukuriami klaidingi rezultatai.

Kariotipo analizės rezultatų interpretavimas

Citogenetinių tyrimų rezultatų aiškinimą atlieka genetikas. Paprastai analizė parengta per 1-2 savaites ir gali atrodyti taip:

• 46XX (XY) yra suskirstyti į 22 poras ir 1 porą lyties. Genomas turi įprastą dydį ir struktūrą. Anomalijos nerasta.
• Pažeistas genomas, aptiktos daugiau nei 46 chromosomos. Vienos ar kelių chromosomų formos ir dydžiai yra nenormalūs. Genomo poros yra sugadintos / neteisingai sugrupuotos.

Atsižvelgiant į patologinius nukrypimus kariotipoje, jie išskiria tokius dažnius sutrikimus:

• Trisomija yra papildoma somatinė chromosoma. Dauno sindromas, Edwards sindromas.
• Monosomija yra vienos chromosomos praradimas.
• Pašalinimas yra genomo svetainės nebuvimas. -46, xx, 5p-cat's scream sindromas.
• Translokacija yra vienos genomo dalies perkėlimas į kitą.
• Kopija yra fragmento kopija.
• Inversija - chromosomos fragmento sukimas.

Remdamasis kariotipų analizės rezultatais, gydytojas daro išvadą apie genotipo būklę ir genetinės rizikos laipsnį. Esant mažiausiam DNR grandinės struktūros pokyčiui, priskiriamas papildomų tyrimų rinkinys. Nustatytos aberacijos gali nebūti pasireiškę, tačiau padidėja vaikų, sergančių genetiniais sutrikimais, gimimo rizika.