Nurinės kamieninės ląstelės

Eksperimentinis įrodymų dėl regeneracijos CNS ląstelių galimybė buvo gautas daug anksčiau atradimą embrioninių kamieninių ląstelių tyrimus, kurie parodė, kad į neocortex, hipokampo ir uoslės lemputės smegenų ląstelių suaugusių žiurkių, įdomus 3H-timidino buvimą, tai yra, gebėjimą sintetinti baltymų ir padalijimą. Atgal į praėjusio amžiaus 60-ųjų buvo manoma, kad šios ląstelės yra pirmtakai neuronų ir tiesiogiai dalyvauja mokymosi ir atminties. Šiek tiek vėliau atskleidė sinapsių de novo susiformuoja neuronų buvimą ir pirmąjį darbą, susijusį su embrioninių kamieninių ląstelių panaudojimo sukelti neyronogeneza in vitro. Ne iš XX a eksperimentų su nukreipta diferenciacijos ESRT į nervinių kamieninių ląstelių pabaigoje, dopaminerginių neuronų ir serotoninerginiai sukėlė klasikinių sąvokasir nervų ląstelių žinduolių gebėjimą regeneruoti peržiūros. Daugybė tyrimų parodė, įtikinamai how realybės rekonstrukcijas neuronų tinklų ir neyronogeneza galimybę visoje postnataliniam žinduolių organizme laikotarpį.

[1], [2], [3], [4], [5], [6]

Neuronų kamieninių ląstelių šaltiniai

Neuroniniai kamieninės ląstelės, išskirtos per operacijas, kurios subventricular regione šoninių skilvelių ir dantyta vingyje hipokampo, kuris yra ląstelių kultūros suformuoti neurospheres (neuronų sritis), ir po paskleisti ir preformirovaniya praeitį - visa iš pagrindinių ląstelinių CNS tipų arba specialioje aplinkoje, naujų mikrosferos. Suspensijoje kultūrų skyla audinio išskirtos iš vaisiaus smegenų sekcijų periventrikulinė taip pat kyla neurospheres.

Žymenys nesubrendusių smegenų ląstelių yra nestin, beta-tubulino III (neuronų gaudantis linija), vimentin, BPST ir NCAM, už imunocitocheminiam identifikavimo monokloninius antikūnus, kurie yra naudojami. Nestinas (tarpinio IV tipo neurofilamentų baltymas) ekspresuoja daugybę potencialių neuroektoderminių ląstelių. Šis baltymas buvo naudojamas identifikavimo ir izoliavimo Multipotent CNS neuroepithelial kamieninių ląstelių su monokloniniais antikūnais, Rat-401, kuris gali nustatyti iki 95% nervinių vamzdis žiurkių embrionų ląstelių vienuoliktą dieną nėštumo. Nestin nėra išreikštas diferencijuoto palikuonių neuroninių kamieninių ląstelių, bet aptinkami pradžioje neuroninių kamieninių ląstelių, po mitozės neuronų ir pradžioje neuroblasts. Naudojant šį žymeklį buvo identifikuoti neuroepitelio progenitorių ląstelės ir įrodyta centrinės nervų sistemos kamieninių ląstelių egzistavimas. Vimentin (III tipo baltymų tarpinis neurofilamentų baltymo) yra išreiškiamas nervų ir glijos kletkami- pirmtakų, taip pat neuronų, fibroblastų ir lygiųjų raumenų ląstelių. Vadinasi, abu imunocitocheminiai žymenys neturi specifiškumo, būtino atskiram neuronų kamieno ir progenitorių ląstelių identifikavimui. Vartojamų beta-III tubulino nustatyti neuronų linija kamienines ląsteles, kadangi I tipo astrocitais yra identifikuoti pagal BPST išraiška, ir oligodendrocytes išreikštas konkrečiai galactocerebroside (C Ga!).

Mitogenas neuroninių kamieninių ląstelių yra FGF2 ir EGF, remti kamienines ląsteles proliferacijos kultūros su neurospheres formavimas. Nugaros kamieninių ląstelių pasiskirstymo greitis gerokai padidėja veikiant FGF2, taip pat naudojant kombinaciją FGF2 + EGF. FGF2 proliferacinį poveikį skatina FGF2-R1 receptoriai. Heparino padidina receptoriaus jungiasi FGF2 giminingumą ir žymiai pagerina savo mitogeninį poveikį neuroepithelial ląstelių. Pradžioje etapais embriogenezės FGF2 receptorių išreikštų žiurkių Smegenų pūslė, vėlesniuose etapuose jų lokalizacijos ribotą skilvelio zonoje. Po ankstyvosios neurogenezės laikotarpio pabaigos FGF2-R1 didžiausia ekspresija po postmitizinių ląstelių yra stebima. Pradinis telencephalon vystymosi laikotarpis pasižymi žemu EGF receptorių ekspresijos lygiu, daugiausia ventralinės srities ląstelėse. Vėlesniuose embriogenezės etapuose EGF-R ekspresija pakyla į nugarą. Nuo graužikų smegenų turi didelio giminingumo EGF receptorių transformuojančio augimo faktoriaus beta (TGF-beta-R), ir, kuri, pageidautina jungiasi. Netiesiogiai, funkcinis vaidmuo EGF-R nurodo duomenis apie žievės disgenezė Priekšnojauta kylančių pabaigoje laikotarpį embriogenezės ir postnataliniam ontogenezy, funkcijos mažina Priekšnojauta, žievės ir ektopijos mirties hipokampo ląstelių iš pelç EGF receptoriaus genas. Be to, TGF-a buvimas maistinėje terpėje yra absoliučiai būtinas neurosfero formavimui. Pašalinus augimo faktorių iš kondicionieriumi ląstelių vidutinio langelio pusei ir savaimingai diferenciaciją, kad sudarytų neuronų, astrocituose ir oligodendroblastov.

Atsižvelgiant į tai, kamieninių ląstelių reaggregation iš disocijuoja neurospheres ir auginimo atliekamas terpėje, kurių sudėtyje yra EGF ir pagrindinę FGF arba FGF2, bet be to serumo. Parodyta, kad EGF sukelia kamieninių ląstelių subependimnoy zonoje šoninių skilvelių proliferaciją, ir pagrindinis FGF skatina proliferaciją kamieninių ląstelių dryžuotojo kūno, Amono rago, neocortex ir regos nervą brandaus smegenis. Iš EGF ir pagrindinio FGF derinys yra labai svarbu aktyviai proliferacijos kamieninių ląstelių, išskirtų iš ependymal trečiojo ir ketvirtojo skilvelių nuo priekinių smegenų pamate, taip pat stuburo kanalu juosmens ir krūtinės ląstos stuburo smegenų.

Po to, kai suspensija disociacijos neuroninių kamieninių ląstelių augintoms induose arba kelių-duobučių plokštelėse be klijų substrato padidinti naujų neurospheres dydį suformuotą, tai paprastai trunka apie 3 savaites. Daugelio neurofarų sklaidos ir dauginimo metodas leidžia gauti pakankamą skaičių linijinių daugiaotenčių kamieninių ląstelių klonų interselinės transplantacijos. Šis principas taip pat grindžiamas žmogaus embrioninių smegenų izoliuotų kamieninių ląstelių banko sukūrimu. Jų ilgas (keletą metų) klonavimas leidžia gauti stabilias nervinių kamieninių ląstelių linijas, iš kurių katecholaminerginiai neuronai susidaro dėl indukuojamos diferencijavimo.

Jei neurospheres yra nepatektų ir auginamos lipnios substratų terpėje trūksta augimo faktorius, proliferuojančias kamienines ląsteles pradėti spontaniškai atskirti, kad sudarytų neuronų pirmtakų ląstelių ir glijos ląstelių su markerių visų nervinių ląstelių tipų išraiškos: MAP2, Tau-1, NSE, neun, beta tubulino III (neuronai), BPST (astrocitais) ir apsk, 04 (oligodendrocytes). Priešingai, kultūrų nervinių kamieninių ląstelių neuronų į daugiau nei 40%, diferencijuotos ląstelės proporcingai (graužikams - nuo 1-5%) ląstelių pelių ir žiurkių, tačiau yra daug mažiau oligodendrocytes, kuris yra labai svarbi ląstelių terapijos požiūriu demielinizacijos ligos. Problema išspręsta Kultūros vidutinio B104 to, kad skatina formavimo mielinprodutsiruyuschih ląsteles.

Kai išauginti nervų kamieninių čiulpų ląstelės žmogaus embrionų terpėje, turinčioje EGF pagrindinę FGF ir LIF eilučių nervinio kamieninių ląstelių padidėjimą 10 milijonų kartų. In vitro atsinaujinusi ląstelės išlaiko gebėjimą migruoti ir diferencijuoti į nervų ir glijų ląsteles po transplantacijos į lytiniu būdu brandžių žiurkių smegenis. Tačiau in vivo daugiaotenčių progenitinių ląstelių dalijimų skaičius yra ribotas. Pakartotinai pažymėjo, kad Hayflick riba "suaugusiųjų" nervų kamieninių ląstelių (apie 50 mitozės) Dar nepasiekiama net eksperimento - prie iš neurospheres formos ląstelių išlaiko savo savybes tik 7 mėnesius ir tik 8 ištraukas. Manoma, kad tai yra dėl to, kad funkcijos metodų jų dispersijos persėjant (tripsinizacijos arba mechaninis poveikis), kuris smarkiai sumažina dauginimosi veiklą ląstelių dėl sumažėjusios vertės tarpląstelinius ryšius metu. Iš tiesų, jei vietoj išsklaidyti metodą padalinti neurosfeserius į 4 dalis, ląstelių gyvybingumas per pratekėjimą yra žymiai padidėjęs. Šis metodas leidžia žmogaus neuronų kamienines ląsteles kultivuoti 300 dienų. Tačiau po šio laikotarpio ląstelės praranda mitozinį aktyvumą ir išgyja degeneraciją arba eina į spontaniškos diferencijavimo stadiją su neuronų ir astrocitų formavimu. Remiantis šiais duomenimis, autorius mano, kad 30 mitozių yra ribojantis kultūrinių nervinių kamieninių ląstelių dalių skaičius.

Kai in vitro kultivuojamos žmogaus nervinės kamieninės ląstelės, daugiausia susidaro GABA -erginiai neuronai. Be specialių sąlygų kūrimo, nervų kamieninių ląstelių sukelti dopaminerginių neuronų (reikalingų ląstelių terapijos Parkinsono ligai gydyti) tik per pirmąsias ištraukas, po kurio visi kultūros neuronai sudaro vien GABAergic ląsteles. Graužikams, dopaminerginių neuronų indukcija in vitro sukelti IL-1 ir IL-11, taip pat fragmentai nervinių ląstelių membranų, LIF ir GDNF. Tačiau žmogui šis metodas buvo nesėkmingas. Tačiau, kai atsiranda intracerebrinis transplantacija GABA-Ergić neuronų in vivo pagal iš mikroaplinkose veiksnių įtakos nervinių ląstelių su skirtingų fenotipų tarpininko.

Paieška neurotrofinių faktorių derinių parodė, kad FGF2 ir IL-1 sukelti dopaminerginių neuroblasts, kurie vis dėlto, kurie negali gaminti dopaminerginių neuronų. Diferenciacija kamieninių ląstelių hipokampo glutamaterginės ekscitaciniai ir inhibitorinių GABAergic neuronų įtakos neurotropinų, bendras EGF ir IGF1 indukuoti glutamaterginis ir GABAergic neuronų susidarymą iš neuroninių kamieninių ląstelių žmogaus embrionų. Nuoseklus papildymas retinoinės rūgšties kultūros ir neurotropino 3 (NT3) žymiai padidina kamieninių ląstelių hipokampo diferenciacija subrendęs smegenis neuronuose įvairaus tarpininkas pobūdžio, o naudojant galvos smegenų kilmės neurotrofinio faktoriaus (BNDF) derinys, NT3 ir, kai GDNF kultūrose hipokampo ir neocortical galima piramidiniai neuronai.

Taigi, daugelio tyrimų rezultatai rodo, kad, pirma, kamieninės ląstelės iš įvairių smegenų struktūrų pagal konkrečias vietos audinių veiksnių įtakos sugeba diferencijuoti in vivo neuronų fenotipų būdingų šių struktūrų. Antrasis tikslas sukeltas diferenciacija nervinių kamieninių ląstelių in vitro klonavimo kamieninės ląstelės suteikia galimybę gauti neuronų ir glijos ląstelių fenotipo su pageidaujamomis savybėmis intracerebrinę transplantacijos įvairių formų smegenų patologijos galimybę.

Nėra jokių abejonių, kad kamieninės ląstelės gautos iš embrionų ar suaugusių centrinę nervų sistemą, gali būti laikomas naujų neuronų šaltiniu ir naudojama klinikoje dėl neurologinių sutrikimų gydymui. Tačiau pagrindinė kliūtis praktinio ląstelių Neurotransplantation plėtra yra tai, kad neuroninių kamieninių ląstelių dauguma neskiria į neuronų po implantavimo į nonneural brandaus CNS srityje. Į aplenkiant šią kliūtį, ji pasiūlė labai originalią nauja technika, kuri leidžia in vitro gauti gryną populiaciją neuronų iš vaisiaus nervinių kamieninių ląstelių po transplantacijos suaugusios žiurkės CNS. Autoriai teigia, kad implantuotu ląstelių diferenciaciją šiuo metodu, susidaro cholinerginiu neuronų fenotipo formavimo, atsižvelgiant į iš mikroaplinkos supančios veiksnių įtaka. Siūloma technologija yra interesų požiūriu į naujų gydymo metodų, remiantis kamieninių ląstelių vystymąsi ir pakeisti sugadintas dėl traumos ar neurodegeneracinių ligų neuronų kaip cholinerginius neuronai vaidinti pagrindinį vaidmenį motorinės funkcijos, atminties funkcija ir mokymosi plėtrai. Visų pirma, cholinerginių neuronų iš žmogaus embrioninės kamieninės ląstelės, gali būti naudojamas su motorinių neuronų prarastų šoninės amiotrofinės sklerozės arba nugaros smegenų traumos pakeitimo. Šiuo metu nėra informacijos apie daugelio cholinerginių neuronų gamybos metodus, gaunamus iš mitogeninių mikrodermių ląstelių populiacijos. Autoriai pasiūlyti gana paprastą, bet veiksmingą būdą skatinti mitogeno anksto suformuotų pirminius embriono neuronų kamieninės ląstelės išsivystymo beveik grynas neuronų, po to kai implantuoti nonneural ir neurogeninio CNS suaugusių žiurkių zonoje. Svarbiausias rezultatas jų darbo yra pakankamai didelio skaičiaus transplantuotų ląstelių cholinerginių neuronų, kai implantuoti vidutinis membranos ir stuburo smegenų konversijos.

Be to, preformation nervinio kamieninių ląstelių smegenų 8 savaičių žmogaus embrionų holiyergicheskie neuronų in vitro žievės ji pasiūlė naudoti įvairių derinius šių trofinių faktorių ir cheminių medžiagų: rekombinantinis pagrindinis FGF, EGF, LIF, amino galine garso peptidas pelės (Šaa-N ), trans-retino rūgšties, NGF, BDNF, NT3, NT4, natūrali pelės lamininas ir heparino. Pradinis linija žmogaus nervinių kamieninių ląstelių (K048) buvo palaikomas in vitro dvejus metus ir atlaikė 85 ištraukos nepakeistus proliferacinių ir diferenciaciją savybes, užkonservuojant normalų diploidinis Kariotipas. Undispersed neurospheres 19-55 antriniai praėjimai (38-52 savaitę-e) pasodinti poli-D-lizino ir laminino, ir po to yra veikiamas su minėtų veiksnių įvairiose koncentraciją, derinių ir sekų. Derinys, sudarytas iš pagrindinio FGF, heparino ir laminino (akronimą FHL), kuri skiriama unikalų poveikį. Po to, kai vieną dieną embriono kultivavimą neuroninių kamieninių ląstelių terpėje su arba be FHL Šaa-N (kombinuotą Šaa-N + FHL į santrumpa SFHL) spartus dauginimo didelių plokščių ląsteles. Visi kiti dieną protokolas (pvz tokių kaip pagrindinio FGF + laminino), priešingai, buvo pradėta ribotam radialinio plitimo verpstės formos ląstelių, ir šios ląstelės nepalikite pagrindinius neurospheres. Po 6 dienų nuo aktyvinimo ir vėlesnio dešimties diferenciacijos terpėje, turinčioje B27, tuo FHL-aktyvuotų srityse krašto polipolyarnye pastebėti dideli neuronų-kaip ląstelės. Kitoje protokolo, dauguma grupės neuronų ląstelių buvo maži ir bipolinis arba vienpolės. Imunocitocheminiam analizė parodė, kad mažas (<20 mikronų) bipolinis arba vienpolio ląstelės buvo arba GABA-Ergić, arba glutamaterginis kadangi dauguma didžiųjų polipolyarnyh ląstelės esančios prie krašto FHL-aktyvuota neurospheres pasirodė cholinerginių, išreikštos žymenų būdingų cholinerginių neuronų (Islet-1 ir ChAT). Kai kurie iš šių neuronų tuo pačiu metu išreiškė synapsin 1. Kaip rezultatas, penkių serija nepriklausomų eksperimentų, autoriai nustatė, kad apskritai gyventojų ląstelių pavienių sričių 45,5% diferencijuojami į neuronų TuJl +, o cholinerginiams (pokalbiai ^) neuronai buvo tik 27,8 % tos pačios populiacijos ląstelių. Po to, kai 10 daugiau dienų nuo diferenciacijos in vitro, be to, cholinerginių neuronų FHL-aktyvuotų neurospheres buvo didelius kiekius mažų neuronų - glutamaterginis (6,3%), GABA-Ergić (11,3%), ir astrocitų (35,2% ) ir nestinpositive ląstelės (18,9%). Kai naudojant kitus derinius augimo faktorių cholinerginių neuronų nėra, ir ribines susidariusios ląstelės neurospheres arba astrocituose, arba nedideli glutamaterginis ir GABA-Ergić neuronų. Stebėjimo atsarginę kopiją ir aktyvūs potencialai, naudojant visas ląstelių patch clamp techniką parodė, kad po septynių dienų FHL įsijungiantis polipolyarnyh didžiąją ląstelių turėjo poilsio potencialas sudaro -29.0 ± 2,0 mV, atsižvelgiant į veiksmų potencialą nėra. Po 2 savaičių poilsio potencialių padidėja iki -63.6 ± 3.0 mV, kuris veikimo potencialo yra stebimas įvadinio nedepoliarizuojantis srovių ir 1M tetrodotoxin užblokuotų metu, nurodant, kad funkcinis aktyvumas nesubrendusių cholinerginių neuronų.

Be to, autoriai nustatė, kad pati arba SFHL- aktyvavimo in vitro FHL- nesukelia brandžių neuronų formavimosi, ir bandė nustatyti, ar gali iš anksto suformuoti per FHL SFHL arba kamieninių ląstelių diferencijuoti į cholinerginių neuronų, kai persodinami į subrendęs žiurkių CNS. Šio aktyvuotų ląstelių neurogeninio regione injekcijos buvo atliktas (Hippocampus) ir nonneural keliose srityse, įskaitant skyrių prefrontalinė žievės vidutinis membranos ir stuburo smegenis suaugusių žiurkių. Implantuotų ląstelių sekimas buvo atliktas naudojant CAO-^ p vektorių. Yra žinoma, kad OCD etiketės tuo pačiu metu abu ultrastruktūra ląsteles ir korinio ryšio procesus (molekuliniu lygiu), be nutekėjimo ir gali būti taikoma tiesiogiai vizualizaciją. Be to, OPP žymėto nervinio kamieninės ląstelės remti neuronų profilį ir iš glijos diferenciaciją identiški profilio netransformuota embrioninės kamieninės ląstelės smegenų.

Vieną ar dvi savaites po implantacijos 5 x 10 ⁴ aktyvuotų ir žymėtųjų neuroninių kamieninių ląstelių buvo rasta stuburo smegenų ar smegenų žiurkių, ROC + ląstelės buvo daugiausia netoli injekcijos vietoje. Migracijos ir integracijos procesai buvo stebimi praėjus mėnesiui po transplantacijos. Migracija klasės pakeista, priklausomai nuo injekcijos vietoje: įvadas porciją prefrontalinę žievės OKS + ląstelių buvo esančio 0.4-2 mm nuo injekcijos vietoje, tuo atveju, implantacijos į vidurinę membranos, hipokampo, arba stuburo smegenų ląstelės perkelta daug didesnis atstumas -. 1-2 cm įskiepyta ląstelės buvo lokalizuotas centrinės nervų sistemos yra labai struktūras, įskaitant priekinės žievės, vidutinis membranos, Amono rago ir stuburo smegenų. OCD žymėti neuroniniai elementai buvo pastebėti jau pirmąją savaitę po transplantacijos, o jų skaičius gerokai padidėjo praėjus 1 mėnesiui po operacijos. Stereologinė analizė parodė didesnį implantuojamų ląstelių išgyvenamumą skirtingose smegenų struktūrose, lyginant su dorsaliu.

Yra žinoma, kad saugomi regiono gyventojų kamienines ląsteles, transformacija į brandų ląstelių reglamentuoja specifinių audinių faktorių daugeliu suaugusių žinduolių audinių. Proliferacija kamieninių ląstelių, diferenciacijos kamieninių ląstelių ir specifinio į smegenų neuronų fenotipų in vivo gerokai didesnę išreikštą vaisiaus smegenų struktūros formavimo, kaip nustatyta pagal didelės koncentracijos morfogenetiniais veiksnių vietos mikroaplinkose buvimą - neurotropinų BDNF, NGF, NT3, NT4 / 5, ir augimo FGF2 veiksniai, TGF-a, IGF1, GNDF, TGF.

Kur yra nervinės kamieninės ląstelės?

Jis nustatė, kad nervų kamieninės ląstelės išreiškia glijos fibrillary rūgštus baltymą, kuris apimtų subrendusių ląstelių neuronų linija yra saugomi tik Astrocitas. Todėl brandžiosios centrinės nervų sistemos branduolių rezervas gali būti astrocitinės ląstelės. Iš tiesų, uoslės lemputės ir dantyta GYRUS neuronų buvo nustatyta, atvežtos iš BPST teigiamas pirmtakas, o tai prieštarauja tradicinėms nuomonėmis apie kamieninių radialinio glia vaidmenį, BPST nėra išreikštas dantyta vingyje suaugus. Gali būti, kad centrinėje nervų sistemoje yra dviejų kamieninių ląstelių populiacijų.

Klausimas dėl kamieninių ląstelių lokalizacijos subventrikulinėje zonoje taip pat lieka neaiškus. Pasak kai kurių autorių, ependymal ląstelės formuoja sferas kultūros klonų, kurie nėra tikrieji neurospheres (subependimy ląstelių klonai), nes tik gebėjimas atskirti į Astrocitas. Kita vertus, po to, kai lempos ar aptiktų ląstelių virusinių gaudantis ženklinimo ependymal ląstelių subependimnogo sluoksnį ir uoslės lemputes. Tokios paženklintos ląstelės in vitro formuoja neurofarves ir diferencijuojasi į neuronus, astrocitus ir oligodendrocitus. Be to, ji yra parodė, kad apie 5% ependyma ląstelės išreikštas žymekliai stiebo - nestin, Notch-1 ir Mussashi-1. Manoma, kad asimetrinės mitozės, susijusio su netolygaus Notch-1 receptoriaus membranos, pagal kurią pastaroji lieka ant membranos pagalbinių ląstelių lokalizuota ependymal zonoje mechanizmas, kadangi pagrindinės ląstelės migruoja į subependimny sluoksnio prarado šį receptorių. Šiuo požiūriu, subependimnuyu zona gali būti laikomas kolektorius kamieninių neuronų medžiagų pirmtakų ir glijos ląstelių, gautų iš kamieninių ependymal sluoksniu. Pasak kitų autorių, į uodegos subventricular zonoje susiformavo tik glijos ląstelių, o ląstelės yra iš neyronogeneza Rostral-šoninis departamento šaltinis. Trečiuoju variantu priekinių ir užpakalinių šoninių skilvelių išmatų zonos dalių yra lygiavertės neurogeninės galios.

Pageidautina atrodo ketvirtasis variantas organizacija galvos smegenų kamieno rezervo CNS, pagal kurią į subventricular zonoje yra trys pagrindinės rūšys neuroninių kamieninių ląstelių - A, B ir C ankstyviausius ląstelių išreikšti neuronų žymeklių (PSA-NCAM, TuJl) ir apsuptas B ląstelių, kurie identifikuojami kaip antigenai kaip astrocitai. C-ląstelės, neturinčios antigeninių neuronų arba glia savybių, turi didelį proliferacinį aktyvumą. Autorius įtikinamai įrodė, kad B ląstelės yra A-ląstelių ir de novo formuojančių uoslinių svogūnėlių neuronų prekursoriai. Per migracijos, A-ląstelės yra apsuptas vijų nervinio kamieninių ląstelių, kuri žymiai skiriasi nuo po mitozinio neuroblasts migracijos išilgai radialinio glijos ląstelių embriono smegenų mechanizmo. Migracija yra nutraukiama uoslės lemputės mitozinio pasidalijimo tiek A- ir B-ląstelių, dariniai, kurie yra įtraukti į sluoksnius granulosa ląstelių glomerulų sluoksnio uoslės smegenų sričių.

Besivystančių smegenų embrionų nediferencijuotas ląsteles ependymal, ir skilvelių apima dauginant kamieninių ląstelių skilvelio germenativnoy-oji subventricular zonoje, kuri pereina pirminę neurologinio ir glioblastomos. Atsižvelgiant į tai, kai kurie autoriai manyti, kad regionas subependimnaya subrendęs smegenų yra sumažintą germenativnuyu embriono neuronų audinį, sudarytą iš astrocituose, neuroblasts ir neatpažintų ląstelių. Tikrosios nervinės kamieninės ląstelės sudaro mažiau nei 1% ląstelių šoninės skilvelės sienos hermetinėje zonoje. Iš dalies dėl šios priežasties, taip pat susiję su duomenimis, kad subependimnoy zona astrocitais yra nervinių kamieninių ląstelių pirmtakai neatmeta, kad astrocitų glijos transdifferentiation ląstelių į neuronų fenotipo savybes įsigijimo galimybę.

Pagrindinė kliūtis galutiniam neuronų kamieninių ląstelių lokalizavimo problemos sprendimui in vivo yra šių ląstelių specifinių žymenų nebuvimas. Tačiau labai įdomu, iš praktiniu požiūriu, pateikti ataskaitas, kad neuroniniai kamieninės ląstelės buvo izoliuota nuo centrinės nervų sistemos padalinių, kuriuose nėra subependimnyh zonas - trečiasis ir ketvirtasis skilvelis iš Priekšnojauta, stuburo kanalo krūtinės ir juosmens dalies nugaros smegenys. Ypač svarbiau yra tai, kad nugaros smegenų traumos sustiprintas proliferaciją ependymal kamieninių ląstelių centrinį kanalą su formavimo kamieninių ląstelių migruoti ir vieni nuo kitų skiriasi į Astrocitas gliomezodermalnogo didžiajame skrandyje. Be to, suaugusių žiurkių patamsėjusi nugaros smegenyse yra ir astro ir oligodendrocytų prekursorių ląstelės.

Taigi, literatūra duomenimis galima teigti, centrinės nervų sistemos suaugusių žinduolių, įskaitant žmones, regiono kamieninių rezervą, regeneracinius ir plastiko, kurių talpa buvimą, deja, gali pateikti tik fiziologinius regeneracijos procesus, formuoti naujus neuroninius tinklus, tačiau nėra patenkinti restoratyvinę poreikius regeneracija. Tai kelia į rasti būdų, kaip padidinti centrinės nervų sistemos išteklių problema kyla egzogeninės taip, kad negali būti išspręsta be aiškų supratimą apie formavimo centrinės nervų sistemos mechanizmų metu embriono laikotarpiu.

Šiandien mes žinome, kad į embriono vystymasis proceso, kamieninės ląstelės nervinių ląstelių vamzdžių yra trijų tipų šaltinis - Neuronai, astrocituose ir oligodendrocytes ty, neuronai ir neuroglija ląstelės yra kilusios iš bendros pirmtakas. Iš ectoderm diferenciacija į grupes nervinio kamieninių ląstelių prasideda pagal proneural genais bHLH produktų grupei įtakos ir yra užblokuotas išraiška transmembraniniai receptoriaus baltymo darinių Notch šeimos genų, kad ribos nustatymą ir ankstyvą diferenciaciją nervinio kamieninių ląstelių. Savo ruožtu, Notch receptorių ligandų veikti transmembraniniai baltymai Delta gretimų ląstelių dėl to, kad ekstraląstelinio domeno, kurie yra tiesioginiai su ląstele kontaktai su indukcinės sąveikos tarp kamieninių ląstelių.

Tolesnis embrioninės neurogenezės programos įgyvendinimas yra ne mažiau sudėtingas ir, atrodytų, turėtų būti specifinis rūšims. Tačiau rezultatai neyroksenotransplantatsionnyh tyrimai rodo, kad kamieninės ląstelės turi atskirą evoliucinį konservatyvumo, todėl neuroninių kamieninių ląstelių gali migruoti ir vystytis, kai jie yra persodinami į žiurkių smegenų.

Tai žinoma, kad žinduoliai CNS turi labai mažą pajėgumų atkuriamuoju regeneracijos, kuri yra būdinga brandžios smegenyse trūksta kokių nors naujų ląstelių ženklus pakeis negyvas ląsteles, kaip neuronų sužalojimo. Tačiau neuroblastų transplantacijos atveju ne tik jie išgyvena, plečiasi ir diferencijuojasi, bet taip pat gali būti integruojami į smegenų struktūras ir funkciškai pakeičiantys prarastus neuronus. Kai transplantuotos pažeistos neuronų progenitorių ląstelės, gydomasis poveikis buvo žymiai silpnesnis. Tokios ląstelės parodė mažą pajėgumą migracijai. Be to, neuronų progenitorių ląstelės neprogresuoja neuronų tinklų architektūros ir funkciškai neįeina į recipiento smegenis. Atsižvelgiant į tai, aktyviai išnagrinėti reparatyvinės-plastikinės regeneracijos klausimai persodinant neformaliuotas daugiafunkcines nervines kamienines ląsteles.

Tyrimas M. Aleksandrova et al (2001) į pirmojo įgyvendinimo varianto, eksperimentai buvo gavėjai brandžių žiurkių patelėms ir donorų buvo 15-dieną embrionų vystymosi. Gavėjai buvo pašalintas dalį pakaušio žievės ir tuo, kad minėtieji transplantuotas mechaniškai sustabdytas spėjamasis embriono žievės audinius, turinčius Multipotent kamieninių ląstelių skilvelio ir subventricular regioną. Į antrojo įgyvendinimo varianto, eksperimentai atliekami transplantacija nervinių kamieninių ląstelių 9 savaičių žmogaus vaisiaus smegenų polovozrelh žiurkių. Iš periventricular vietovės embrionų autorių izoliuota smegenų audinio griežinėliai buvo dedamas į jų kultūros terpėje ir F-12 buvo gautas kartojamas pipete ląstelių suspensijos, ir tada kultivuojamos specialiu vidutinės NPBM, papildytoje augimo faktorių - FGF, EGF ir NGF. Ląstelės buvo auginamos suspensijos kultūroje iki neurospheres, kurie išsklaidytų ir vėl nusėdusių į kultūros formavimas. Po 4 praeigų, kurių bendras 12-16 dienų kultivavimo laikotarpis, ląstelės buvo naudojamos transplantacijai. Gavėjai buvo desyatisutochkye brandus žiurkės ir dviejų mėnesių Wistar žiurkių, kurios į šoninio skilvelio regione buvo suleista 4 mkl sustabdymo žmogaus nervinių kamieninių ląstelių be imunosupresija. Rezultatai rodo, kad ląstelės yra atskirti skilvelio ir subventricular zoną embriono smegenų žievės žymių žiurkių alotransplantanto suaugusiųjų smegenų vystosi, tai yra, veiksniai diferencijuoti gavėjas mikroaplinka smegenų Neužblokavome augimą, diferenciaciją nervinių kamieninių ląstelių embriono. Pradžioje laikotarpį po transplantacijos iš Multipotent ląstelių ir toliau mitozinę suskaidymą ir aktyviai perkelta iš audinių transplantacijos recipiento smegenų srityje. Persodinami embrioninės kamieninės ląstelės, kurios turi didelį potencialą migracijos, buvo rasta beveik visose gavėjo čiulpų persodinimo išilgai geležinkelio kelio žievės sluoksnių ir baltos medžiagos. Migracijos takeliai nervinių ląstelių ilgis visada buvo žymiai mažesnis (iki 680 mikronų) nei glijos ląstelių (iki 3 mm). Struktūriniai vektoriai migruojančių Astrocitas buvo kraujagyslės ir pluoštinės struktūros smegenis, kad taip pat buvo pastebėtas kitų tyrimų.

Anksčiau buvo manoma, kad paženklintų astrocitų kaupimasis gavėjo smegenų žievės pažeidimo srityje gali būti susijęs su glia barjero susidarymu tarp transplantacijos ir recipiento audinių. Tačiau kompaktiškuose ląstelinių skiepų struktūros tyrimas parodė, kad jų citohistotektonikai pasižymi atsitiktinumu, be jokių sluoksniuotųjų persodintų ląstelių. Transplantuotų neuronų užsakymo laipsnis yra artimas normalaus smegenų žievės ląstelių lygiui tik tuo atveju, jei tarp donoro ir recipiento audinių nėra glia barjero. Priešingu atveju transplantacijos ląstelių struktūra buvo netipinė, o patys neuronai patyrė hipertrofiją. Transplantacijos metu transplantuojamų ląstelių neuroimunocheminis rašymas aptiko inhibicuojančių GABA -erginių neuronų atskleidimą PARV, CALB ir NPY baltymų ekspresijai. Todėl subrendusiose smegenyse išlieka mikroencijos veiksniai, galintys palaikyti proliferaciją, migraciją ir specifinę neuroninių daugiaotenčių ląstelių diferenciaciją.

Žmogaus kamieninių ląstelių, išskirtų iš smegenų periventrikulinė 9-savaitės amžiaus embrionų, M. Aleksandrova et al (2001) ketvirtos plaukimo nestinpozitivnyh rasti daug Multipotent ląstelių, iš kurių kai kurie buvo atliktos diferenciaciją in vitro ir sukurtų neuronų tipo, kuris atitiko kultūros kitų autorių atliktų tyrimų rezultatai. Po transplantacijos į suaugusių žiurkių smegenų kultivuojamos žmogaus kamienines ląsteles mitotically padalintas ir perkelti į heterologiniam recipiento smegenų audinio. Ląstelių transplantacijoje autoriai pastebėjo dvi ląstelių grupes - mažesnes ir didesnes. Naujausi migravo į parenchimos ir pluošto struktūrų gavėjos tiek atstumo smegenis - iki 300 mikronų. Ilgiausias kelias migracijos (iki 3 mm) buvo būdinga mažų ląstelių, iš kurių kai kurie yra diferencijuotų į Astrocitas, kad buvo nustatytas naudojant monokloninius antikūnus BPST. Abi ląstelių tipų, buvo rastas šoninio skilvelio sienos, nurodant, kad iš transplantuotų ląstelių išeiga į Rostral migracijos srautą. Astrocitų kilęs nervinio kamieninės ląstelės žmonių ir žiurkių daugiausia perkelta per kraujo kapiliarai ir skaidulų struktūros recipiento smegenų, kuris sutapdintas su kitų autorių duomenimis.

Žmogaus kamieninių ląstelių diferencijavimo in vivo tyrimas naudojant monokloninius antikūnus prieš GFAP, CALB ir VIM parodė astrocitų ir neuronų susidarymą. Skirtingai nuo žiurkių skiepų ląstelių, daugelis žmogaus kamieninių ląstelių buvo vimentiną teigiamos. Vadinasi, dalis žmogaus dauginotencinių ląstelių nebuvo diferencijuota. Vėliau tie patys autoriai parodė, kad žmogaus nervų kamieninės ląstelės buvo persodinami netaikant imunosupresija po išgyvena persodinimo žiurkių smegenis per 20 dienų be jokių imuninės agresijos iš glijos ląstelių brandaus smegenis.

Buvo nustatyta, kad net neuroninių kamieninių ląstelių Drosophila prizhivlyayutsya ir atlikti diferenciacija į smegenis yra toks, nutolusiuose nuo vabzdžių taksonų, pavyzdžiui, žiurkės. Iš eksperimento autorių teisingumą nėra abejo,: transgeninis Drosophila linijos, kurių sudėtyje yra genų žmogaus neurotrofiniai faktoriai NGF, GDNF, BDNF, buvo įterptas į vektorių pagal Casper Drosophila: Taip šoko promotorių, taip, kad žinduolio kūno temperatūra automatiškai prašo jų išraiška. Autoriai nustatė, kad Drosophila ląstelės produktas bakterinė galaktozidazės geną histocheminiu X-Gal dažymą. Be to, pasirodė, kad neuronų kamieninės ląstelės yra Drosophila specialiai reaguoti į neurotrofinių faktorių, užkoduotas žmogaus genų: ląstelių transgeninio linijų Drosophila, kurių sudėtyje yra GDNF geną Savo diferencijuoti neuroninių kamieninių ląstelių smarkiai išaugo sintezė tirozinhidroksilaze ksenotransplantacija, geną, NGF ląstelių aktyviai gaminamas acetilcholinesterazės . Panašus genzavisimye reakcija sukeltas ksenografiniuose persodinto alotransplantanto su juo embriono nervinio audinio.

Ar tai reiškia, kad specifinės neuronų kamieninių ląstelių diferencijavimą sukelia vidon specifiniai neurotrofiniai veiksniai? Pagal rezultatus, kad autoriai svetimo gaminančios neurotrofinius veiksnius turi tam tikrą poveikį alotransplantatų, kuri vėliau sukūrė daugiau intensyviai ir yra 2-3 kartus didesnis nei alotransplantatų dydžio, įvestų į smegenis be audiniuose, be likimo. Todėl, svetimo transplantanto elementai, kurių sudėtyje neurotrofinų genus, ypač geno, koduojančio iš glijos gauto neurotrofinio faktoriaus (GDNF) žmogaus daryti dėl alotransplantato vidonespetsifichesky poveikio panašus į atitinkamą neurotrofino veiksmų vystymosi. Yra žinoma, kad, kai GDNF padidėjo dopaminerginių neuronų išgyvenimą embriono žiurkių midbrain ir pagerina dopamino metabolizmą, kuriame dalyvauja šių ląstelių, ir indukuoja diferenciaciją tirozinhidroksilaze teigiamų ląstelių, didinant aksonų ir neuronų, didėjant kūno dydį augimą. Panašus poveikis pastebimas dopaminerginių neuronų kultūroje žiurkės viduryje smegenyse.

Po žmogaus kūno neuronų kamieninių ląstelių ksenotransplantacijos į brandžių žiurkių smegenis pastebima jų aktyvioji migracija. Žinoma, kad nervų kamieninių ląstelių migracijos ir diferencijavimo procesas yra kontroliuojamas specialių genų rinkiniu. Inicijuojančios signalo migracijos kamieninių ląstelių į diferenciacijos viršuje suteikia baltymo produktą pagal Prasłowiańskiego-onkogeno c-ret kartu GDNF. Kitas signalas kilęs iš genų mash-1, kuris kontroliuoja ląstelių vystymosi kelio pasirinkimą. Be to, specifinė ląstelių diferencijavimo reakcija priklauso ir nuo ciliarinio neurotrofinio faktoriaus a-receptoriaus. Tokiu būdu, suteiktas visiškai skirtingi genetinė konstitucijos KSENOGENINIŲ žmogaus nervinių kamieninių ląstelių ir gavėjas žiurkių smegenų ląsteles, ji turėtų būti ne tik pripažinta, vidonespetsifichnost neurotrofinius faktorius, bet taip pat aukščiausią evoliucinį išsaugojimą genų, atsakingų už konkrečios diferenciacijos neuroninių kamieninių ląstelių.

Bus įmanoma ksenotransplantacija embriono neyromateriala į neurochirurginiam praktikoje gydymui, neurodegeneratyvinių patologinių procesų, kuriuose dėl pablogėjusio sintezės mielino oligodendrocito būti vertinamas. Per tą laiką, labiausiai intensyviau Neurotransplantation adresas problemos, susijusios su gauti embrioninių arba subrendusių alogeninės smegenų nervinių kamieninių ląstelių kultūros po jų nukreipta į diferenciacijos neuroblasts arba specializuotų neuronų.

Neuronų kamieninių ląstelių transplantacija

Skatinti proliferaciją ir diferenciaciją nervinių kamieninių ląstelių suaugusiųjų organizmo gali būti persodinami embriono nervų audiniuose. Ji yra Neatmetama galimybė, kad įvestas alotransplantanto su kamieninių ląstelių nervų audinio paties embriono, gali būti taikomi proliferaciją ir diferenciaciją. Yra žinoma, kad po to, kai nugaros smegenų traumos atliktų per pailgėjimas pažeistų aksonų ir aksonų nervų laidininkų regeneravimas ataugų užtikrinimo priemone ataugų motorinių neuronų nepažeistas. Pagrindinės kliūtys nugaros smegenų regeneracijos, yra jungiamojo audinio pažeidimas rando srityje, distrofiniai ir degeneracinių pokyčių centrinių neuronų, NGF deficito, ir Nukentėjusioje zonos mielino skilimo produktų buvimo formavimas. Jis parodė, kad transplantuoti į nukentėjusiosios nugaros smegenų įvairių tipų ląstelių - iš sėdimojo nervo suaugusių gyvūnų, embrionų pakaušio žievės, hipokampo, stuburo smegenų, Švano ląstelių, Astrocitas, mikroglijai, makrofagų, fibroblastų fragmentų - prisideda prie sužeisti aksonų regeneraciją iki ataugų ir leidžia naujai suformuota axons auga per nugaros smegenų pažeidimo plotas. Ji yra eksperimentiškai įrodyta, kad transplantacija vaisiaus nervų audinių į nugaros smegenų traumos Iki neurotrofinių faktorių veiksmų pagreitina ir paveiktų aksonų augimą, apsaugo nuo glijos rando ir plėtros distrofiniai ir degeneracinių procesų centrinių neuronų išsidėstymą, o ląstelės transplantuotas embriono neuronų audinį vyksta stuburo smegenis, integruoti su gretimų audinių ir skatinti aksonų ataugų per paveiktoje zonoje su sinapsių deN formavimo nugaros smegenų neuronų tipo drąsos tipo.

Šis regeneracinės medicinos ir plastiko plotas gavo didžiausią plėtrą Ukrainoje dėl mokslinio komandinis darbas vadovaujama VI Cymbalyuk. Pirmiausia, tai eksperimentinis tyrimas transplantacijos embriono nervų audinyje stuburo smegenų traumos veiksmingumas. Autologiniams periferinė nervų Ryškiausia pokyčių destruktyvių autoriai pastebėjo distalinio sandarinimo sritį, kurioje 30 dieną po operacijos jie buvo kartu su atstatomuosius procesus gamtoje. Kai transplantato morfofunkciniai statusą implantuoto nervo 30 dieną buvo būdingas sunkus degradacijos riebalų degeneracija ir amiloidoze fone židinio uždegimo infiltracijos limfoidnokletochnoy su dominuojančia atrofija Švano ląstelių reiškinius. Transplantacija embriono nervinio audinio didele dalimi prisidėjo prie nugaros smegenų laidumo atkūrimo, ypač gyvūnų, kuri operacija buvo vykdoma per pirmąsias 24 valandas po sužeidimo: prieš būklės pagerinimui uždegiminė-destruktyvių procesų pažymėtos hipertrofiją ir hiperplaziją baltymų sintezę ir energoprodutsiruyuschih ultrastruktūrą elementų stuburo neuronų hipertrofijos ir oligodendrocytes hiperplazija, 50% sumažinti raumens veikimo potencialo ir 90% amplitudė - greitis išlaikyti pagreitį. Vertinant transplantacijos vaisiaus nervinio audinių transplantacijos, priklausomai nuo zonos buvo nustatyta, kad geriausi rezultatai pastebimi, kai vartojamas tiesiai į transplantacijos srityje nugaros smegenų sužalojimo efektyvumą. Visu kirtimo stuburo smegenis vaisiaus nervinio audinio transplantacijos neveiksmingos. Dinaminės tyrimai parodė, kad optimalus laikas transplantacijos embriono nervų audinio yra pirmieji 24 valandas po stuburo smegenų traumos, tuo metu, kai per ryškus antrinių išeminių ir uždegiminių pokyčių, vykstančių 2-9-tą dieną po traumos laikotarpį operacija, ją reikėtų būti pripažinta nepraktiška.

Yra žinoma, kad sunkus galvos smegenų sužalojimas sukelia stiprią ir tvarią aktyvavimo lipidų peroksidacijos pradiniuose ir tarpinių stadijų potrauminio laikotarpiu pažeisto galvos smegenų audinių ir viso organizmo, o taip pat suteikia energijos apykaitą sužalotas smegenis. Tokiomis sąlygomis vaisiaus nervinio audinio persodinimas į traumos prisideda prie lipidų peroksidacijos procesų stabilizavimo ir padidina antioksidacinės sistemos smegenų ir viso organizmo pajėgumą, didina savo Antiradical apsauga 35-60-tą dieną potrauminio laikotarpį. Tuo pat metu po embrioninio nervo audinio transplantacijos normalizuojamas energijos metabolizmas ir oksidacinis fosforilinimas smegenyse. Be to, ji yra parodė, kad remiantis pirmą dieną po eksperimentinio trauminio smegenų pažeidimo žaizdos pusrutulio audinių varžą sumažėja 30-37% priešingos - 20%, nurodant generalizuotos smegenų edemos vystymąsi. Be gyvūnų, kuriems buvo atlikta transplantacija vaisiaus nervų audinių edema involiucija vyksta daug greičiau - jau septintą dieną vidutinė vertė audinių traumuoti pusrutulis varža pasiekė 97,8% kontrolinės lygiu. Ir pilnas restauravimas varža 30 dieną vertybių buvo pažymėta tik persodintų su embriono nervinio audinio gyvūnų.

Iš smegenyse po sunkios galvos smegenų traumos neuronų mirtis yra pagrindinis veiksnys, dėl potrauminio komplikacijų vystymąsi. Ypač jautrūs žalos neuronų integruoti dopaminerginių ir noradrenerginių sistemas, midbrain ir kaulų čiulpus. Sumažinti dopamino lygį striopallidarnoy sudėtingą ir smegenų žievės žymiai padidina judėjimo sutrikimų ir psichinių sutrikimų, epileptiform narių riziką, ir dopamino gamybos sumažėjimas pagumburio gali būti daugelio autonominių ir somatinių sutrikimų pastebėta tolimoje potrauminio laikotarpiu priežastis. Į tyrimus su eksperimentiniais trauminio smegenų sužalojimo rezultatai rodo, kad transplantacija vaisiaus nervinio audinio prisideda prie dopamino atkūrimo nukentėjusio pusrutulio smegenų, dopamino ir norepinefrino - į pagumburio, taip pat didinant lygius norepinefrino ir dopamino midbrain ir kaulų čiulpus. Be to, kaip transplantacijos embriono nervinio audinio gyvūnų modelių smegenų žaizdos pusrutulio normalizuotam procentais fosfolipidų ir padidėjusio riebalų rūgščių kiekio (C16 rezultatas: 0, C17: 0, C17: 1, C18: 0, C18: 1 + C18: 2, C20 : 3 + C20: 4, C20: 5).

Šie duomenys patvirtina regeneracinio-plastiko procesų stimuliavimą transplantuotu embrioniniu nervų audiniu ir rodo transplantato reparatyvinį-trofinį poveikį recipiento smegenyse kaip visumai.

Ypatingas dėmesys turėtų būti skiriamas Neurochirurgijos instituto darbuotojų klinikinei patirčiai. A.P. Romodanova AMS Ukrainos dėl embrioninių nervų audinio transplantacijos vaikų cerebriniu paralyžius - itin sudėtinga patologija su sunkiais motorinės funkcijos sutrikimais. Klinikiniai formos cerebriniu paralyžiumi priklausys nuo žalos lygio integruotas struktūras, kurios yra atsakingos už raumenų tonusas ir formavimas motorinių stereotipų reglamentą. Šiuo metu yra daug įrodymų, leidžiančių manyti, kad motorinės funkcijos ir raumenų tonusą pažeidimai yra svarbūs patologiniai pokyčiai sistemoje striopallido-thalamocortical variklio kontrolės. Šios sistemos striospallidinis ryšys vykdo kontroliuojančią funkciją per nigrostrišką dopamino gamybą. Tiesioginis kelias prasideda įgyvendinimo kontrolę thalamocortical neuronų lukštais medijuojamos gammaaminomaslyanoy rūgšties (GABA) ir substancijos P ir prognozuojama tiesiai į variklio srityje vidaus segmento globus pallidus ir juodosios medžiagos. Netiesioginis kelias, kurio poveikis yra realizuotas įtraukiant GABA ir enkefalinas, kilęs iš korpuso neuronų ir paveikia baziniuose ganglijuose šerdį per jungtį, seka, apimančia išorinį segmentą globus pallidus ir subthalamic branduolio. Laidumo sutrikimų sukelti Hipokinezija tiesus kelias, o iš laidumo struktūrų mažėjimas netiesioginis kelias veda į hiperkinezija su atitinkamų pokyčių raumenų tonusą. Iš GABAergic kelius skirtinguose lygmenyse motorinių kontrolės ir integracijos dopaminerginių jungtis prie korpuso lygio sistemos vientisumas yra būtini dėl thalamocortical sąveikos reglamentą. Dažniausiai pasireiškimas variklio patologijos įvairių formų cerebriniu paralyžiumi yra raumenų tonusas pažeidimas ir yra glaudžiai susijęs pokytis refleksas raumenų veikla.

Embrioninio nervo audinio transplantacija vaikų cerebralinis paralyžius reikalauja kruopštaus smegenų struktūros pažeidimo pobūdžio analizės. Remiantis dopamino ir GABA nustatymo į į subarachnoidinį smegenų skysčio autoriai išsamiai integracijos funkcinių sutrikimų, smegenų struktūrų lygį, kad būtų galima Uprzedmiotowić chirurgines intervencijas rezultatus ir informacija kartojama Neurotransplantation. Vaisiaus nervų audinių (abortny medžiaga 9-savaitę embrionų) buvo transplantuotas į žievės precentral vingyje smegenų pusrutulių parenchima, priklausomai nuo atrofinio pokyčių sunkumo. Pooperaciniame laikotarpyje pacientų komplikacijos ar pablogėjimas nebuvo pastebėtas. Teigiami dinamika buvo stebima 63% pacientų su Spastyczny formų, 82% vaikų su Atomic-estetinės formos ir tik 24% pacientų, sergančių sąnarių ligomis. Nustatytas neigiamas poveikis aukšto lygio neurologinio jautrumo veikimui su autoinosterminėmis antikūnų buvimu neurospecifiniams baltymams. Neveiksmingos transplantacija embriono kuris nerviniame audinyje pasirodė amžiaus 8-10 metų amžiaus ir vyresniems, taip pat, kuriems yra sunkus hiperkinezinio sindromo ir episindroma pacientams. Klinikinis veiksmingumas transplantacijos embriono kuris nerviniame audinyje pacientams, sergantiems spazminius formų cerebrinio paralyžiaus pasireiškia statomotornyh išsidėstymą naujų įgūdžių ir savanoriško judėjimo su patologinių judėjimo modelius korekcijos ir į spazmų, nenormalus pozos ir požiūrių laipsnis sumažėjimas. Autoriai mano, kad teigiamas poveikis transplantacijos embriono nervinio audinio yra normalizuoti poveikio funkcinio aktyvumo supraspinal struktūrų, dalyvaujančių į pozos ir savanoriško judėjimo tonas reguliavimo rezultatas. Šiuo atveju, teigiamas klinikinių poveikis transplantacijos embriono kuris nerviniame audinyje yra pridedamas į neurotransmiterių kiekio subarachnoidinį galvos ir stuburo smegenų skysčio sumažėjimo, nurodant, kad susigrąžinimo bendras sąveikos įtakos smegenų struktūras.

Yra vienas sunkesnis formos neurologinės ligos - minimaliai sąmoninga narėje, gydymo problema, kuri, deja, yra toli gražu išspręsta. Reiškia minimaliai sąmoningai būklė polyetiology Poūmė arba chronišką ligą gautą iš sunkiųjų organinių CNS pažeidimų (daugiausia žievė), ir būdinga tai, kad vystymosi ir panapraksii panagnozii esant santykinai saugomų funkcija segmentinių sekcijų kamieninių formacijos ir limbic smegenų Tinklinės kompleksą. Stebėjimo tyrimai (nuo 1 iki 3 metų) parodė, kad minimaliai sąmoningai būklė yra ne galutinė diagnozė nuolatinio žalos nervų sistemos vaikams, ir yra transformuojamas į organine arba demencija, arba chroniško vegetacinės būklės. Neurochirurgijos instituto reabilitacinės neurochirurgijos katedroje. A.P. Buvo atliktas Romodanov mokslai Ukrainos 21 pacientams, sergantiems pasekmės apallic sindromui transplantacijos embriono nervų audiniuose. Pagal bendrąją anesteziją Crown katerių varnalėša skylė buvo taikomas virš iš labiausiai tokiomis ryškiomis atrofijos nustatytų pakeitimų kompiuterio arba magnetinio rezonanso srityje, ir pasklidosios atrofija iš pilkojo arba baltos medžiagos paduodamas į uždaros transplantato ir centrinės precentral vingyje smegenų buvimą. Po atidarymo dura mater vienetų 8-9 savaičių amžiaus embrionas audinio Žymės sensorinė žievė intracortical implantuoti naudojant specialų prietaisą. Mėginių implantuoti audinio skaičius yra nuo 4 iki 10, kuris yra nustatomas kiekio ir dydžio varnalėša skylių vietiniai pakeitimai kaulų čiulpų. Skirtingai nuo kitų rūšių patologija ne apallic sindromas, autoriai siekė įskiepyti kuo daugiau vaisiaus audinių labiausiai prieinamą smegenų srityse. Dura mater buvo susiuvama, buvo padaryta kaukolės defekto plastika. Operacijos metu, visi pacientai parodė žymių pakitimų tiek cortex (atrofija, dėl vijų, spalvos ir pulsacijų kaulų čiulpų trūkumą) ir dangalai (sustorėja dura mater, didelę sustorėjimas voratinklinį membraną turintys savų kraujagysles, fusion lukštai su pagrindine smegenų medžiaga). Šie pokyčiai buvo daugiau ryškus pacientams su istorija buvo požymių, perduoto uždegiminių smegenų pažeidimų. Pacientams, kuriems buvo atlikta CNS hipoksija, dominuoja pasklidųjų Atrophic pokyčius smegenų medžiagos, ypač žievės departamentų, su į subarachnoidinį erdvėje didėja, be didelių pokyčių smegenų dangalų. Pusė pacientų buvo padidėjęs kraujavimo minkštųjų audinių, kaulų, smegenų medžiaga. Po operacijos į laikotarpį nuo šešių mėnesių iki trejų metų, valstybės pagerėjo 16 pacientų, penki ligoniai išliko nepakitęs. Teigiama dinamika buvo stebima tiek iš variklio, tiek iš psichinės sferos pusės. Raumenų tonusas sumažėja iš dešimties pacientų ir paciento fizinio aktyvumo padidėjimas (sumažėjimas parezė, pagerėjo judesių koordinacija), manipuliavimo galimybę viršutinių galūnių žymiai padidėjo penkis vaikus. Keturiems pacientams sumažinti dažnumą ir sunkumą epilepsijos priepuoliai ir vienam vaikui už visą stebėjimo laikotarpį priepuolių po operacijos neegzistavo. Agresyvumas sumažėjo dviem vaikais dviem pacientams, sergantiems sunkiu bulbarinė vertės patobulintą rijimas, du vaikai galėjo kramtyti dėl jų pačių per 2 savaites po operacijos. Jis pažymėjo, kuri priklauso nuo psichikos sutrikimų sunkumo sumažėjimą, devyni vaikai po operacijos tapo ramus, miego ir dėmesio pagerino septynių pacientų. Trys pacientai, kurių pasekmės apallic sindromas ėmė pripažinti savo tėvus, vienas - sekti nurodymus, du - pasakyti žodžiai, trys sumažėjo laipsnį disartrija. Autoriai pažymi, kad reikšmingas pagerėjimas pacientams prasideda po 2 mėnesių po operacijos, pasiekia didžiausią 5-6 mėnesius, tada tobulinimo kursas lėtėja ir metų pabaigoje 50% pacientų stabilizuoti procesą. Teigiamas poveikis neurotransplantation tarnavo kaip pakartotinės operacijų per šešis pacientams, sergantiems pasekmes apallic sindromas pagrindu, bet iš kitos pusrutulio smegenų. Metodai ir antra transplantacija metodika buvo tapatūs pirmos operacijos, tačiau klinikinis poveikis antrojo žingsnio buvo mažesnis, tačiau jis neturi atsirasti po pirmojo ir po antrojo chirurgijos rimtų komplikacijų. Pagal autorių, terapinis veikimo mechanizmas susijęs su neurotransplantation neurotrofinio įtaka persodinto embriono kuris nerviniame audinyje, kuriame yra daug augimo hormonų,, ir kitų biologiškai aktyvių medžiagų, skatinančią pažeistų neuronų ir plastiko reorganizavimo gavėjas smegenų audinio remontas. Neatmetama ir aktyvinti poveikį nervų ląstelių, kurios buvo konservuotos morfologiškai veiklos, bet prarado dėl funkcinio aktyvumo ligos. Jis yra greitas neurotrofiškai poveikis gali būti paaiškinamas tuo, kad akies obuolio funkcijų Kai kuriems vaikams tobulinti ne pirmos ar antros savaitės pabaigoje po operacijos. Manoma, kad be tų trečiojo-ketvirtojo mėnesio tarp skiepų ir priimančiosios smegenyse yra įkurta Morpho-funkcinis bendravimas, per kurį neyrotransplantat pakeičia negyvų smegenų ląstelių funkciją, kuri yra tobulintina tiek variklio ir psichikos funkcijų pacientų substratas.

Poveikis transplantacijos vaisiaus nervų audinių reorganizavimo interneuronal ryšius studijavo eksperimentiškai. Autoriai baltųjų žiurkių pagal naudojant lipofilinis fluorescencinės žymės DIL (1,1-dioctadecyl-3,3,3 \ 3'-tetrametilindokarbotsianina perchlorato) ir Konfokalinė lazerio skanavimo raštų tiriamas atkūrimo intermodule aksonų jungčių į galvos smegenų žievės mechaninių pažeidimų dėl embriono transplantacijos fone zonoje nervų audinys ir be jo. Jis nustatė, kad vaisiaus nervinio audinio Įvadas į pažeisto ploto suteikia aksonų augimą, kuris pravažiavus per transplantato yra prijungtas prie gretimų smegenų audinio, o be vaisiaus nervinio audinio pažeidimas zonoje transplantacijos yra auganti aksonų neįveikiama kliūtis. Šiame darbe, dėl embrioninių transplantacija (15-17 DIENA nėštumo) neocortex. Mūsų rezultatai - dar vienas įrodymas už aktyvaus įtaka embriono nervinio audinio transplantato esant potrauminio pertvarkymas interneuronal santykių gretimų struktūrinių ir funkcinių modulių smegenų žievės. Transplantacija embriono nervinio audinio suteikia dalinį atkūrimą santykių padalintas dalimis nuo smegenų žievės pažeidimų per palankių sąlygų aksonų augimo skiepų neyrotrofichoskih veiksnių zonoje kūrimą. Tokio efekto buvimas įrodo eksperimentiškai ir aptariami literatūroje kaip įrodymas aukštų plastikinių galimybių pažeisto galvos smegenų suaugusiems gyvūnams. Šiuo atžvilgiu, ląstelių transplantacija yra laikomas optimaliu terapinės strategijos atkurti pažeistų žmogaus CNS funkciją.

Mūsų duomenų apie vaisiaus smegenų nervų audinio kaip exogenic transplantacijos terpė aksonų augimo perspektyvas efektyvumo liudija kryptingą kūrimą bendravimo ryšius tarp gretimų sveika dalių smegenis. Faktinis darbas yra mokytis transplantacijos neuroninio audinio poveikį CNS funkcinių parametrų, kurių užduotis buvo ištirti vaisiaus Žymės žydrojo branduolio (LC) dėl morfofunkciniai rodiklių LC neuronų ir judėjimo aktyvumo gavėjų transplantacijos poveikį dinamika. Gautieji buvo moterys "Wistar" žiurkės, donorai - 18 dienų vienos linijos žiurkių embrionai. Embrioninio LC transplantacija vyko į smegenų trečiojo skilvelio ertmę. Histologiškai transplantacija buvo aptinkama 75% recipiento gyvūnų. Prisitaikymo atveju, transplantatas atsiremia skilvelio sienelėje, užpildydamas 1 / 5-2 / 5 jo liumeną ir buvo gyvybingas. Po 1 ir 6 mėnesius po operacijos, transplantuotas nervinio audinio morfologinis požymis yra struktūra, kuri galėtų įvykti, kai įprastinis Ontogenetic plėtra, tai yra, LC struktūra. Mūsų duomenys rodo, kad gyvūnų, kurie buvo persodinti vaisiaus tab LC skiriasi dinamišką veiklą ir padidinti matricos LC ląstelių branduolių chromatino veiklą. Vadinasi, atsiranda savo LC neuronų aktyvumo intensyvumas, tačiau implantų transplantacija taip pat funkcionuoja aktyviai. Yra žinoma, kad vadinamoji vidutinio smegenų lokomotyvo sritis praktiškai sutampa su lokalizacija LC. Autoriai mano, kad pokyčių variklio veiklos gaunančių žiurkių pagrindas yra LC ląstelių aktyvavimo, tiek nuosavybės ir transplantato, su paskirstymą, dideliais kiekiais norepinefrino, įskaitant nugaros smegenų segmentuose. Tokiu būdu, manoma, kad judėjimo aktyvumo padidėjimas transplantacija LC sąlygomis sveikoje gyvūnų smegenų dėl to, kad funkciškai aktyvaus transplantacijos integruota su gavėjo smegenų ir prisidėti prie judėjimo aktyvumo žiurkių aktyvavimo buvimo.

Be to, jis parodė, kad persodinti embrionines neuroepithelial ląstelių žymių neocortex ir nugaros smegenis, išgyventi ir išsivystyti į neuroblasts, jaunas ir brandus neuronus per 1-2 mėnesius po transplantacijos į nukentėjusiosios sėdimojo nervo ir suaugusioms žiurkėms. Į dinamika NADRN teigiami Neuronai žymių tyrimo embrioninės nugaros smegenų ir neocortex žiurkių heterotopinė organų transplantacijos (15 žiurkės embriono per parą) išilginiame per sėdimojo nervų žiurkėmis-gavėjų parodė, prigijimą nuo 70 iki 80% neyrotransplantatov, kad priklausė nuo stebėjimų metu. Neuroblasts Uni-and bipolinis formos su užapvalintais ryškių branduolių ir vienas arba du nucleoli pradeda formuoti į vienu savaitę transplantantų po operacijos, kuri buvo kartu su joje grupių formavimo. Tarp neuroblasts autoriai nepavyko aptikti ląsteles, kurių sudėtyje yra NADPH-diafopazy (NADPH-D). Po 7 dienų NADPH-teigiamas buvo tik mobiliojo ryšio elementai kraujagyslių - endotelio ląstelės iš transplantato ir endotelio ir kraujagyslių lygiųjų raumenų ląstelių sėdimojo nervo gavėjo interjero kapiliarus. Nes kraujagyslių lygiųjų raumenų ląstelių, indukcija NO-sintazės (NOS) įvyksta pagal IL-1 įtakos, autoriai priskiria NADPH-teigiamas lygiųjų raumenų ląstelių išvaizdą kraujagyslių sėdimojo nervo į IL-1 buvimo susintetintas pažeisto nervų kamienus. Yra žinoma, kad tokiomis sąlygomis, neyronogenez transplantacijos vaisiaus smegenų žymių yra sinchronizuotas su neuronų vystymuisi in situ. Rezultatai morfologinių tyrimų rodo, kad iš nervinių elementų diferenciacija persodinti septynias dienas po transplantacijos atitinka ląstelių diferenciacijos panašus į naujagimių žiurkių smegenis. Tokiu būdu, į heterotopinio transplantacijos į periferinę nervų transplantuotas embrionų nervinių ląstelių eksponuoti gebėjimą sintetinti NADPH r. Stuburo čiulpų transplantacijos parodo daugiau neuronų, kurių sudėtyje yra NADPH-D, skiepūgliai nei neocortex, bet azoto oksido sintezę transplantuotų neuronų prasideda vėliau kaip in situ vystymosi. Be stuburinių centrinę nervų sistemą KN-teigiamų ląstelių atsiranda anksčiau kaip prenataliniu laikotarpiu. Manoma, kad jokio prisideda prie sinapsinių jungčių besivystančių smegenų formavimosi, ir NOS-teigiamų nervų aferentų teikiančių neuroblasts NO sintezę smegenėlių buvimas, stimuliuoja migracijos ir diferenciacijos neuronų, tokiu būdu susidarant Cytoarchitectonics nepažeistas smegenis. Svarbus vaidmuo nėra sinapsogeneze įdiegta TECTUM - nos-teigiamų neuronų buvo tik tiems, kurie turėjo sinapsių ryšius su tinklainės ląsteles.

Yra žinoma, kad azoto oksidas yra vienas iš smegenų veiklos reguliatorių, kur jis susidaro iš arginino, veikiant NO sintazę, turinčią skrandžio veiklą. CNS N0 sintetina kraujagyslių, mikroglia, astrocitų ir įvairių smegenų dalių neuronų endotelio ląstelėse. Po trauminio smegenų pažeidimo, taip pat hipoksijos ir išemijos, padidėja neuronų, kurių sudėtyje yra NO, skaičius, kuris yra vienas iš smegenų kraujotakos reguliatorių. Atsižvelgiant į sugebėjimą sukelti n0 sinapsogenez, tyrimas mokslo NO-, kurių sudėtyje yra ląstelės tokiomis sąlygomis, neurotransplantation fono trauminių sužalojimų nervų audinio recipiento yra ypač svarbūs.

Taip pat svarbu mokytis įtaką Neurotransplantation sąlyginis refleksas, stereotipinio elgesio. Eksperimentuose studijuoti įtaką tolima ir smegenis (tarp ypatingos svarbos informacinės infrastruktūros ir ciii) skiepai embrioninių melsva dėmės (17-19-tą dieną nėštumo) ir atminties turinį katecholaminų procesų žiurkių sunaikinimas frontotemporalinės neocortex parodė, kad elektrolitas žala frontotemporalinė cortex suteikia stereotipas su sąlyga emocinis reflekso išvengimo atsakas (atminties), sumažina fiziologinis aktyvumas, sumažina noradrenalino kiekį žievės zonoje koaguliacija, bet didėja todėl jos lygis pagumburio, kai į adrenalino koncentracijos sumažėjimas, tačiau kraujyje ir antinksčiai jų kiekis didėja.

Kaip intracerebrinė transplantacijos embriono audinių melsva dėmės rezultatas 81,4% gyvūnų atsigavo stereotipas sąlyginis emocinis refleksas vengimo refleksą, sutrikusi Electrolytic žalos Fronto-laiko sričių smegenų žievės normalizuotas adrenalino į midbrain tinklinis darinys, pogumburio ir neocortex ir hipokampo net kelia jo lygis, kartu su kraujo koncentracijos adrenalino sumažėjimas.

Tolima transplantacija embriono audinių melsva dėmės skatina ne tik sumažėjusi stereotipinio sąlyginio emocinis refleksas vengimo refleksą atkūrimą su žiurkėmis pakitimų elektrolitinio frontotemporalinės žievės, bet taip pat padidina norepinefrino ir epinefrino turinį, daugiausia pagumburio, kraujo, širdies ir antinksčių. Manoma, kad tai yra dėl skiepų kraujotakos, skverbtis neurotransmiterių į kraują, savo praėjimą per hematoencefalinį barjerą ir aktyvacijos mechanizmų adrenalino reabsorbcijos ir noradrenalino patekimą į 1, 2 3. Tipų, autoriai mano, kad ilgus noradrenalino lygių stabilizavimo į prigijimas ir funkcijos transplantato gali būti laikomas jos laipsniškai išlaisvinti neuronų minimaliomis dozėmis melsvos dėmės reiškinys.

Teigiami klinikiniai poveikiai transplantacijos embriono nervinio audinio gali būti dėl to, gebėjimas ir pastarosios įtaką formuojant naujus laivus procesus tiesioginio dalyvavimo augimo faktoriais ir citokinais reglamentą. Aktyvuota darinius angiogeninių augimo faktoriai, - kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus (VEGF), FGF, PDGF, ir TGF, kuris yra sintetinamas išemijos tarnauja išeities taškas angiogenezės metu. Jis įrodė, kad kraujagyslių augimo potencialą išeikvojimas atsiranda senėjimo proceso organizme, kuris vaidina kaip antai koronarinės širdies ligos ir aterosklerozės apatinių galūnių svarbų vaidmenį ligų patogenezėje. Kvėpavimo išemija vystosi ir su kitomis ligomis. Įvedimas angiogeninių faktorių išemijos zonoje (terapinis angiogenezės) stimuliuoja kraujagyslių augimą išeminių audinių ir pagerina mikrocirkuliaciją dėl to, kad šalutinės apytakos vystymąsi, o tai savo ruožtu, padidina funkcinį aktyvumą paveiktoje organo.

Labiausiai žadanti klinikiniam vartojimui yra VEGF ir FGF. Pirmųjų atsitiktinių imčių tyrimų rezultatai pasirodė esąs rami, ypač jei buvo tinkamai pasirenkamos optimalios dozės ir angiogeninių veiksnių vartojimo būdai. Šiuo atžvilgiu buvo atliktas eksperimentinis iš žmogaus embriono smegenų audinio izoliuoto ekstrakto angiogeninio aktyvumo įvertinimas. Darbe buvo naudojamos abortų medžiagos, gautos dvidešimtąja nėštumo savaitę ir apdorotos pagal I. Maciogo ir kitų autorių (1979 m.) Metodą ANRF IC modifikavimui. Šis vaistas yra "Endotelinių ląstelių augimo papildo" ("Sigma") analogas ir yra natūralus žmogaus angiogeninių veiksnių mišinys, kuris apima VEGF ir FGF. Eksperimentai buvo atliekami su žiurkėmis, kuriose buvo užpakalinės galūnės ir miokardo audinių išemijos modeliai. Remiantis šarminės fosfatazės aktyvumo gydytų su ekstrakto embriono kuris nerviniame audinyje eksperimentinių gyvūnų tyrimų, parodė į kapiliarų ploto vienetui miokardo skaičius padidinimo - tiek išilgine ir skersine į širdies griežinėliais. Angiogeninė aktyvumas vaisto pasireiškia tiesiogiai įvedimo į išeminės zonoje ir sisteminės (į raumenis) administravimo atveju, kuri baigėsi tuo, kad į vidutinio ploto poinfarktinio randų sumažėjimas.

Bet kuriuo įgyvendinimo variante embriono kuris nerviniame audinyje transplantacija yra labai svarbu pasirinkti teisingą nėštumo laikotarpį persodinto embriono medžiagą. Lyginamoji analizė ląstelių preparatų iš embriono pilvo vidurinių smegenų 8-, 14- ir 16-17 dienų amžiaus embrionų žiurkių trims mėnesiams po intrastriarnoy neurotransplantation lytiškai subrendusių žiurkių parkinsonizmo į automatizuoto bandymų apomorfinindutsirovannoy variklio asimetrijos atskleidė gerokai didesnis efektyvumo ląstelių preparatai CNS 8 dienų embrionais ir mažiausias - 16-17 dienų embriono nervinio audinio. Gauti duomenys buvo susijęs su rezultatais histomorphological analizės, visų pirma, su transplantantų, glijos reakcijos sunkumo ir skaičius dopaminerginių neuronų jų matmenų.

Skirtumai gydomasis poveikis vaisiaus nervų audinių ląstelių, gali būti susijęs su įsipareigojimu ir nebrandumo pačių ląstelių laipsnį, ir jų reakcija į įvairius augimo faktorių, kurie skirtų atsižvelgiant į sukeltos dopaminerginių neuronų pažeidimo srityje. Visų pirma, EGF ir FGF2 poveikis neuroninių kamieninių ląstelių vystymąsi in vivo Smegenų pūslė vyksta ant skirtingų embriogenezės. Neuroepithelial ląstelės 8,5-vienadieniai pelės embrionus, kultivuojamos in vitro daugintis terpėje serumo neturinčioje į FGF2 buvimą, bet ne EGF, kurie reaguoja tik kamieninių ląstelių populiaciją, išskirtos iš embrionų smegenų ne vėlesnėse vystymosi stadijose. Tuo pačiu metu, neuroniniai kamieninės ląstelės dauginasi atsakant į kiekvieną iš šių mitogenus ir augimo additively padidinti atveju pridedant FGF2 ir EGF kultūrose mažas ląstelių tankio sodinti. Manoma, kad EGF reaktyvusis nervų kamieninių ląstelių germinaciniame zonos 14,5 dienų senumo pelės embrionų yra linijiniai palikuonys FAF-reaktyvus neuroninių kamieninių ląstelių, kurios pirmą kartą atsiranda po 8,5 dienų nėštumo. Galimas fenotipas nervinių kamieninių ir kamieninių ląstelių priklauso nuo kompleksinio poveikio jų mikroaplinka. Kai immunophenotyping iš nervinių ląstelių ir hipokampo periventrikulinė sričių 8-12- ir 17-20 savaičių amžiaus žmogaus embrionų srauto cytofluorometry atskleidė didelį kintamumą, susijusį tiek su gestacinio amžiaus ir atskirų konstitucinės funkcijos donoro Biomaterial. Kai kultivavimą, nervinio pirmtakų ląstelių serumo neturinčioje terpėje su pasirinktinio EGF, FGF2 ir NGF neurospheres suformuota tokiu greičiu iš esmės nepriklausomai nuo nėštumo. Ląstelės skirtingų smegenų sričių 5-13 savaičių žmogaus embriono per trumpą auginimo su FGF2 į monomolekulinių sluoksnių kultūrų dėl lamininu substrato į pėdsakų augimo faktorių palaikančių 6 savaites proliferaciją su didelis procentas nestinpozitivnyh ląsteles prieš savaiminio formavimosi ląstelių fone su žymenų visų trijų linijų buvimo nervų diferenciacija. Ląstelės metu embriono nėštumo didesnis kaip 13 savaičių, išskirtų iš žmogaus vidurinių smegenų daugintis pagal EGF įtaką, o taip pat sudaryti neurospheres. Dėl EGF ir FGF2 derinio buvo pasiektas sinergetinis poveikis. Intensyviausios proliferacija nervinių kamieninių ląstelių yra stebimas su neurospheres išvaizdą, kai kultivuojamos audinių smegenų žievės iš 6-8 savaičių amžiaus žmogaus embrionų buvimą EGF2, IGF1 ir 5% arklio serumo ant substrato su fibronektino.

Reikėtų pažymėti, kad klausimai, susiję su nėštumo ir embriono CNS audiniuose departamento geriau naudoti už Neurotransplantation tikslu lieka atviras. Atsakymai yra galima rasti besivystančių smegenų neurogenesis, kuris tęsiasi visą priešgimdyminio laikotarpį - per laiko tarpą, kai iš nervinio vamzdelio epitelio sudaro daugiasluoksnį struktūrą. Manoma, kad kamieninių ląstelių ir naujų neuronų radialinio glijos ląstelių šaltinis yra sudarytas iš pailgos ląstelių su ilgais procesų, radialiai nukreipta lyginant su smegenų pūslelių sienos, ir susilietus su vidinio paviršiaus skilvelių ir išorinės sienos smegenų Pia paviršiaus. Anksčiau radialiniai Glia aprūpinta tik neuronų trakto funkciją, pagal kurią iš neuroblasts iš pilvo paviršiaus ploto skirsniuose migracija, ir suteikia jai pagrindų vaidmenį teisinga laminarinio organizavimo žievės formavimas. Šiandien nustatyta, kad radialinės glijos raida išsiskiria į astrocitus. Daug jis mažinamas žinduolių po gimimo, bet tie gyvūnų rūšių, kuriame radialinis Glia išlieka per suaugus neyronogenez aktyvių srautų ir pogimdyminiu laikotarpiu.

Ląstelių kultūros iš radialinių glijos embrioninių neocortical suformuota graužikų neuronų ir glijos ląstelių, ir esant nėštumo embriono vystymuisi nuo 14 iki 16 dienų (didžiausio intensyvumo neyronogeneza laikotarpiu smegenų žievės Pelių ir žiurkių,), suformuotą iš esmės neuronai. 18-osios embriogenezės dienos diferencijavimas pasikeitė link astrocitų susidarymo, o žymiai sumažėjo naujai suformuotų neuronų skaičius. Ženklinimas in situ ir radialinių glijos ląstelių, naudojant GFP leidžiama aptikti burbuliukų tuščiavidurės smegenų 15-16 dienų amžiaus žiurkių embrionų asimetrinį skaidymo paženklintus ląstelių su dukterinių ląstelių, turinčių imunologinių ir elektrofiziologines charakteristikas neuroblasts išvaizdą. Pažymėtina, kad, remiantis dinaminių stebėjimų rezultatais, atsirandantys neuroblastai naudoja radialinės glijos motininę kamerą migracijai į pialinį paviršių.

Endogeninis radialinės gliažo žymeklis yra tarpinių neustino gijų baltymas. Fluorescencinė ląstelių rūšiavimo tėkmės pažymėtą retrovirusų susijęs su GFP ir išreiškė prie nestin kontrolę, parodė, kad kamieninių ląstelių dantyta GYRUS regione hipokampo ir Baltoji limfa asmeniui (medžiaga buvo gauta operacijos epilepsija) išreikšti nestin. Todėl jie priklauso radialinio glia, kuri žmogui kaip ir kitiems žinduoliams, konservuoti tik dantyta vingyje.

Tačiau ląstelių transplantacijos efektyvumas priklauso ne tik aukštos gyvybingumą donorų ląsteles ir savo potencialą ir diferencijavimo funkciją pakeiskite sugedusius ląsteles, bet pirmiausia nukreiptą migraciją. Iš migracijos sugebėjimo priklauso nuo transplantacinių ląstelių visiškos funkcinės integracijos - be sutrikimų smegenų recipiento cytoarchitektonikoje. Nuo radialinės glijos ląstelių į pogimdyvinio periodo beveik visiškai veikiami sumažinimo, turėtų išsiaiškinti, kaip suaugę gavėjai donorų ląstelės gali judėti nuo transplantacijos srityje nuo smegenų pažeidimo centre. Yra dvi versijos migracijos ląstelių centrinėje nervų sistemoje, nepriklausomai nuo radialinio glia: iš tangentinio migracijos arba judėjimo neuroblasts į galvos smegenų žievės vystymosi statmenai radialinio glijos tinklo reiškinys, taip pat iš "eilutę" arba "grandinę" migracija. Visų pirma, migracija neuroninių kamieninių ląstelių Rostral subventricular zonoje įvyksta uoslės lemputės kaip glaudžiai gretimuose ląstelių apsuptas glijos ląstelių sekos. Manoma, kad šios ląstelės panaudoti partnerių ląsteles kaip migracijos substrato, pavyzdžiui, kaip pagrindinės reguliatorius su ląstele sąveikos yra PSA-NCAM (nervinio adhezijos molekulės polisialirovannaya ląstelės). Todėl neuronų migracija nebūtinai reikalauja dalyvauti radialinės glia arba anksčiau egzistuojančios aksoninės obligacijos. Vneradialnaya forma ląstelių judėjimo "STRING" iš Rostral migracijos srautas yra išlaikyti visą gyvenimą, kuris rodo realią galimybę tikslingai pristatymo transplantuotų neuroninių kamieninių ląstelių į brandaus nervų sistemą.

Yra hipotezė apie kamieninių ląstelių linijų buvimo smegenų ontogenezy, pagal kurį į ankstyvosiose stadijose smegenų vystymosi kamieninės ląstelės yra ląstelės neuroepithelium, kuri proceso brandinimo transdifferentiate radialinio glia. Suaugus, kamieninių ląstelių vaidmuo atlikti ląstelę požymių Astrocitas. Nepaisant prieštaringų klausimų (nesutarimai dėl kamieninių ląstelių hipokampe, taip pat giliuose smegenų dalis, kurios neturi sluoksniuotos struktūros pluta ir gumburo piliakalnių kuriant, kur radialinis Glia nebūna), aiškų ir paprastą sąvoką iš kamieninių ląstelių fenotipo eilės per Ontogeny išvaizda labai patraukli.

Poveikio veiksniai iš nustatymo ir vėlesnio diferenciacijos neuroninių ląstelių mikroaplinkos differon aiškiai rodo transplantacijos brandžių nugaros smegenų kamieninių ląstelių įvairiose žiurkių, subrendęs nervų sistemą. Transplantacija kamieninių ląstelių dantyta vingyje, arba migracijos į uoslės lemputė neuronų pastebėta aktyvų judėjimą iš transplantuotų ląstelėmis daug neuronų. Transplantacija kamieninių ląstelių stuburo smegenų ir hipokampo srityje lėmė astrocituose ir oligodendrocytes formavimo, kadangi transplantacijos dantyta vingyje susiformavo ne tik glijos ląstelių, bet taip pat neuronų.

Lytiniu požiūriu subrendusių žiurkių lizdų skilimo dalelių skaičius gali siekti kelis tūkstančius per dieną - mažiau nei 1% viso grūdų ląstelių skaičiaus. Neuronai sudaro 50-90% ląstelių, astrocitų ir kitų gliaudinių elementų - apie 15%. Likusios ląstelės neturi antigeninių neuronų ir gliažo požymių, tačiau juose yra endotelio ląstelių antigenų, kurie rodo, kad dantų dilgėlėje yra glaudus ryšys tarp neuronogenezės ir angiogenezės. Galimybės diferencijuoti endotelio ląsteles į neuronų progenitorių ląsteles linkę remtis endoteliocitų in vitro gebėjimu sintetinti BDNF.

Įspūdingas greitis savarankiškai surinkimas neuroninių tinklų: į diferenciacijos kamieninių ląstelių proceso migruoti granulių ląstelių dantyta GYRUS ir forma daigų augančių link zonos SAZ hipokampo sinapsių ir, sudarančiomis su glutamaterginis piramidės neuronų ir slopinančio intercalary. Naujai sukurtos grūdų ląstelės integruota į esamas neuronų grandinėse 2 savaites, o pirmieji sinapsės jau atsiranda 4-6 dienoms po naujų ląstelių atsiradimą. Pagal dažnai administravimo brandaus gyvūnų bromdeoksiuridino arba 3H-timidino (į vieną pusę nustatyti suaugusiųjų kamienines ląsteles) aptiko daug paženklintus neuronų ir astrocituose į hipokampo, tai rodo, formavimo naujų neuronų ne tik dantyta vingyje, bet taip pat kitų dalių hipokampo galimybę. Susidomėjimas skaidymo, diferenciacijos ir mirties ląstelių dantyta vingyje smegenų brandaus hipokampo procesų dėl to, kad besiformuojančios čia neuronai yra lokalizuota vienoje iš pagrindinių vietų hipokampo, atsakingų už mokymosi ir atminties procesuose.

Tokiu būdu, šiandien nustatė, kad iš ląstelių subependimnoy zona iš šono skilvelio subrendusių graužikų atsirasti neuroniniu-pirmtako ląstelių migruojančius išilgai Rostral migracijos srauto, suformuota išilgai orientuotą astroglijinių ląsteles uoslės lemputės, kur jie yra įtraukti į grūdų ląstelių sluoksnio ir diferenciaciją į neuronų, kad struktūra. Kamienines ląsteles nervinio randamų Rostral migracijos srautas suaugusių beždžionių, tai rodo, formavimo naujų neuronų uoslės lemputės primatų galimybę migracija. Neuroninių kamieninių ląstelių, išskirtų iš suaugusiųjų uoslės lemputės ir išverstos vienoje linijoje, klonuotas į ląsteles, kurios diferencijuoti Neuronai, astrocituose ir oligodendrocytes. Kamieninės ląstelės randamos brandaus smegenų hipokampo žiurkių, pelių, beždžionių ir žmonių. Neuroninių kamieninių ląstelių subgranular zona dantyta fasciją yra pirmtako ląstelių, išsiskiriančių į medialinio ir šoninių galūnių hipokampo, kur jie atskirti į subrendusių grūdų-ląstelių ir glijos elementų šaltinis. Aksonų susiformavo de novo dantyta GYRUS neuronų atsekti lauko SAZ, nurodant, kad naujai suformuota neuronai dalyvauja hipokampo funkcijų įgyvendinimą. Į asociatyvinių srityse, kaip suaugusiųjų beždžionių smegenų rasta pirmtakų ląstelių neuronų, išsiskiriančių iš subventricular zonoje neocortex. Naujas sluoksnis VI smegenų žievės piramidės neuronų nauja pelių atskleidė per 2-28 savaites po to, kai pažaidos ir mirties neuronų vietinių šis sluoksnis dėl migracijos dormantnyh ankstesnių kamieninių ląstelių subventricular zonoje. Galiausiai, po gimdymo neyronogeneza į žmogaus smegenis realybė rodo dvilypį padidėjimą žievės neuronų skaičius, toliau per pirmuosius 6 metus po gimimo.

Praktinė ląstelių transplantacija nėra svarbi klausimas dėl neuronų kamieninių ir progenitorinių ląstelių reprodukcijos procesų ir diferenciacijos reguliavimo. Didžiausia vertė tarp veiksnių, į kuriuos nusmukdo nervinio kamieninių ląstelių proliferaciją turi gliukokortikoido, kuri smarkiai sumažina padalinių skaičių, o antinksčių pašalinimas, priešingai, žymiai padidina mitozės skaičių (Gould, 1996). Ji yra Pažymėtina, kad dantyta vingyje graužikams Morphogenesis yra labiausiai intensyvus per pirmąsias dvi savaites nuo postnataliniam vystymuisi junginio reakcijoje į stresą dėl nuosmukis gamybos ir sekrecijos steroidinių hormonų antinksčių žievės fone nesant. Kortikosteroidai slopina ląstelių grūdų migraciją - nauji neuronai neintegruoja į granuliuotą dantų žievės sluoksnį, tačiau lieka pilvo. Daroma prielaida, kad vienu metu pažeidžiami sinapsinio susiliejimo procesai. Apsauga ląstelių iš tokių "steroidų agresijos" atliktų minimalų išraiškos mineralinių ir gliukokortikoidų receptorių plinta ląstelių pupelės ne tik plėtros dantyta vingyje metu, bet ir subrendusių gyvūnų. Vis dėlto, visų smegenyse hipokampo neuronų neuronų būdinga tai, kad didelio kiekio gliukokortikoidų receptoriaus, kuris sukelia stresą dėl hipokampo. Psichoemocinis stresas ir stresinės situacijos slopina neuronogenezę, o lėtinis įtempimas dramatiškai sumažina gyvūnų gebėjimą mokytis naujų įgūdžių ir mokytis. Labiau aiškus neigiamas lėtinio poveikio poveikis neuronogenezei yra gana suprantamas, atsižvelgiant į daugiausia neveikiančią nervų kamieninių ląstelių būseną. Kai imobilizacijos nėščių žiurkių (graužikų - supramaximal streso faktorius) yra nustatytas kaip nėščiųjų stresas taip pat sukelia į ląstelių dantyta vingyje skaičiaus sumažėjimą ir iš esmės slopina neyronogenez. Yra žinoma, kad gliukokortikoidai dalyvauja depresijos narių patogenezės, kuris yra morfologinę lygiavertį stabdymo neyronogeneza, patologiniai neuronų restruktūrizaciją ir interneuronal jungtys, taip pat mirties nervinių ląstelių. Kita vertus, antidepresantų chemoterapijos agentai aktyvuoti neuronų de novo, kuri patvirtina, tarp formavimo naujų neuronų hipokampo procesų ir depresijos vystymosi nuorodą išsidėstymą. Reikšmingas poveikis neyronogenez kurie estrogenų, kurio poveikis yra priešinga gliukokortikoidų veiksmų ir yra paremti proliferaciją ir išgyvenimą neuroninių kamieninių ląstelių. Reikėtų pažymėti, kad estrogenai žymiai padidina gyvūnų gebėjimą mokytis. Kai kurie estrogenų poveikio autoriai asocijuojasi su ląstelių grūdų cikliniais pokyčiais ir viršija jų skaičių moterims.

Yra žinoma, kad kontroliuojamas neyronogenez EGF FGF ir BDNF, tačiau, išorės signalus į kamieninių ląstelių pagal mitogenus ir augimo faktorių mechanizmai buvo nepakankamai tiriamas. Ji yra nustatyta, kad palaiko PDGF in vitro neuronų linija kamieninės ląstelės, ir krumplynas neurotrofinio faktoriaus (CNTF), kaip trijodtironino stimuliuoja susidarymą daugiausia glijos ląstelių - astrocituose ir oligodendrocytes. Hipofizės adenylyl ciklazę-aktyvuojančio baltymo (PACAP) ir vazoaktyvus žarnyno peptidas (VIP) aktyvinti proliferaciją neuroninių kamieninių ląstelių, bet slopina diferenciacija apdoroja dukterinėms ląstelėms. Opioidai, ypač ilgalaikio poveikio atveju, žymiai slopina neuronogenezę. Tačiau, kamieninių ląstelių ir neuronų kamieninių ląstelių-pirmtakais dantyta vingyje yra neįmanoma atskleisti opioidų receptorius (kurie yra aptinkami, skiriantis neuronų embriono laikotarpis), kuri neleidžia įvertinti tiesioginis poveikis, opioidų.

Praktinio regeneracinio ir plastiko medicinos poreikiai privertė mokslininkus atkreipti ypatingą dėmesį į kamieninių ląstelių pliuralizmo ir daugiaplokiškumo tyrimą. Ilgalaikis šių savybių realizavimas suaugusio organizmo regioninės kamieninės ląstelės gali užtikrinti būtiną transplantacijos medžiagą. Svarbiausia buvo parodyta, kad epigenetinius stimuliacija neuroninių kamieninių ląstelių teikia proliferuojančias ląsteles, jau iš anksto suformuoti neuroninio fenotipų, kuris riboja jų skaičių. Į totipotencinėmis embrioninių kamieninių ląstelių proliferacijos savybes, kol pakankamas ląstelių skaičius yra anksčiau neuronų diferenciaciją atveju, ląstelės buvo dauginami ir lengvai konvertuojami į neuronų fenotipo. Už neuroninių kamieninių ląstelių PGCs izoliuota nuo vidinės ląstelių masės blastocistų išaugintų su ir privalo dalyvauti LIF, kuris išsaugo savo totipotency ir gebėjimą padalinti neribotą laiką. Po to, retinoinė rūgštis sukelia ESC nervų diferencijavimą. Tokiu būdu transplantacija gauti neuroninių kamieninių ląstelių į pažeisto chinolino ir 6-hydroxydopamine dryžuotojo kūno kartu su jų diferenciaciją į dopaminerginių neuronų ir serotoninerginiais. Po to, kai įvedimo į iš embriono žiurkės neuroninių kamieninių ląstelių, gautų iš PGCs smegenų skilvelių migruoti į įvairių sričių gavėjo smegenų žievės, įskaitant, dryžuotojo kūno, pertvaros, thalamus, pagumburio, ir smegenėlėse. Ląstelės, likusios skilvelių ertmėje, formuoja epitelio struktūras, panašias į nervinį vamzdelį, taip pat atskiros neuorinių audinių salelių. Gavėjo embriono smegenų parenchime transplantuotos ląstelės gamina tris pagrindinius nervų sistemos ląstelių tipus. Kai kuriuose iš jų yra pailgi apikosių dendritai, piramidinių ląstelių kūnai ir baziniai akonai, iškyšuliuojantys į korpuso niežulį. Astrocitais donoro kilmės ištiesti savo procesus, kad netoliese kapiliarus ir oligodendrocytes yra glaudžiai liečiasi su mielino rankovėmis, dalyvauja mielino susidarymo. Tokiu būdu, nervų pirmtakų ląstelės, gautos iš PGCs in vitro, galintį nukreipti tinkamą migracijos ir diferenciacijos signalams regioninės mikroaplinkose suteikia daug sritis besivystančių smegenų neuronų ir glia.

Kai kurie autoriai apsvarsto suaugusiųjų organizmo regioninių kamieninių ląstelių de-ir transdifencializacijos galimybę. Netiesioginis patvirtinimas ląstelių kultūros su savo potencijomis plėtros dedifferentiation yra duomenys apie prigijimą neuroninių kamieninių ląstelių pelės kaulų čiulpų su vėlesniais vystymosi šių ląstelių linijų, suteikiant funkciškai aktyvių ląstelių periferiniame kraujyje. Be to, transplantacija genetiškai pažymėtų (LacZ) neurosphere ląstelių, gautų iš brandaus arba embriono smegenų, į panaudotam pelių su mielosupresijos smegenų, pradėta į kamieninių ląstelių susidarymą ne tik neuronų darinių, bet taip pat sukelia kraujo ląstelių kartos, nurodant, kad daugiapotencinės nervų kamieninės ląstelės, realizuotos už smegenų. Tokiu būdu, neuroninių kamieninių ląstelių gali diferencijuoti į kraujo ląstelių pagal signalų įtakos iš kaulų čiulpų mikrolygmens laikinojo transformacijos hematopoetinių kamieninių ląstelių. Kita vertus, dėl kaulų čiulpų kraujodaros kamieninių ląstelių transplantacijos smegenyse nustatyti jų diferenciacija pagal iš smegenų audinio į glijos ir nervinių ląstelių mikroaplinkos įtaka. Todėl potencialūs skirtumas rovochny nervų ir kraujodaros kamieninės ląstelės ne tik audinių specifiką. Kitaip tariant, išskyrus smegenų ir kaulų čiulpų audinių charakteristika vietos mikroaplinka veiksniai gali keisti šių ląstelių diferenciacijos orientaciją. Parodyta, kad neuronų kamieninės ląstelės, įšvirkšti į venų sistemos apšvitintų pelių, sukurtos blužnies ir kaulų čiulpuose iš mieloidinių, limfiniame ir nesubrendusių kraujodaros ląstelių populiaciją. In vitro kaulų čiulpų morfogenetiniais baltymų (BMPs) dėl išlikimo ir diferenciacijos neuroninių kamieninių ląstelių poveikis yra nustatomas, kaip ir pradiniuose etapuose embriogenezės į nervinės arba glijos kryptimis plėtros. Nervinės kamieninių ląstelių 16-vienadieniai žiurkių embrionų BMPs kultūrų sukelti astroglia ir neuronų, kadangi kultūrose kamieninių ląstelių, gautų iš Perinatologinės smegenų astrocituose suformuotų tik. Be to, BMP slopinti kartos oligodendrocytes in vitro, kurie rodomi tik tada, kai pridedant nogino antagonistą BMPs.

Procesai būdingą vidonespetsifichnost transdifferentiation: hematopoetinių kamieninių ląstelių yra žmogaus kaulų čiulpų transplantacijos į suaugusių žiurkių dryžuotojo kūno, migruoti į baltos medžiagos išorinio kapsulės, ipsi- ir priešingos neocortex, kur jie sudaro astrotsitopodobnye korinio elementų (Azizi et al, 1998). Be alotransplantacija kaulų čiulpų kamieninių ląstelių į šoninio skilvelio naujagimių pelėms migracijos kraujodaros kamieninių ląstelių galima atsekti Priekšnojauta ir smegenėlių struktūras. Dryžuotojo kūno ir molekulinė sluoksnis hipokampo perkelta ląstelių transformuojami astrocituose, ir uoslės lemputės, o vidinis sluoksnis iš smegenėlių granulių ląstelių ir smegenų kamieninių tinklinis darinys, kad sudarytų neuronų ląstelių su teigiamą reakciją į neurofilaments. Po to, kai injekcija kraujodaros ląstelių suaugusių pelių GFP žymėto mikro- ir astrocituose į veną aptinkami neocortex, thalamus, smegenų kamieno ir smegenėlių.

Be to, mezenchiminių kamieninių ląstelių kaulų čiulpuose, kad kilti visų jungiamojo audinio ląstelių tipų, esant tam tikroms sąlygoms, taip pat gali atlikti neuronų transdifferentiation (priminti, kad embriono mezenchima šaltinis yra nervinio maksimumo ląstelės). Buvo parodyta, kad trakto stromos žmogaus kaulų čiulpų ir pelės ląstelių, in vitro iš EGF arba BDNF buvimą, Express'ui neuroninių kamieninių ląstelių žymeklį nestin, ir įvairių derinių augimo faktorių papildymas veda prie ląstelių susidarymą su markerių iš glijos (BPST) ir neurono (pagrindinė baltymų NeuN). Žymėtas singeninės mezenchiminių kamieninės ląstelės buvo persodinami į šoninio skilvelio į naujagimių pelių smegenis, migruoti ir yra įsikūręs Priekšnojauta ir smegenėlių nesulaužant cyto architektūra gavėjos smegenis. Kaulų čiulpų mezenchiminių kamieninių ląstelių diferenciaciją į subrendusių astrocituose dryžuotame kūne ir molekulinės sluoksnio hipokampo, taip pat užpildyti uoslės lemputės, smegenėlių ir granulių sluoksnius tinklinis darinys, kuris yra transformuojami į neuronų. Mezenchiminių kamieninių ląstelių iš žmogaus kaulų čiulpų galima atskirti in vitro į macroglia ir po transplantacijos integruoti į žiurkių smegenų struktūros. Tiesioginis transplantacijos kaulų čiulpų mezenchiminių kamieninių ląstelių suaugusios žiurkės hipokampo taip pat lydi jų migracijos į smegenis parenchimos ir neuroglial diferenciacijos.

Manoma, kad transplantacija kaulų čiulpų kamienines ląsteles galima padidinti ląstelių terapijos CNS ligos charakterizuojamos pernelyg didele patologinio mirties neuronų gebėjimą. Reikėtų pažymėti, kad ne visi mokslininkai pripažįsta tarpusavio transformacijos neuroninių ir kraujodaros kamieninių ląstelių faktą, ypač in vivo sąlygomis, kurios vėl dėl patikimų žymekliai stokos įvertinti jų transdifferentiation ir tolesnę plėtrą.

Transplantacija kamieninių ląstelių atveria naujus horizontus korinio genų terapijos paveldimų neurologinių sutrikimų. Genetinė modifikacija neuroninių kamieninių ląstelių apima įterpimo reguliavimo genetines konstrukcijas, kurių produktai sąveikauja su ląstelės ciklo baltymų automatinio valdymo režimu. Šių genų embrionini kamieninių ląstelių, naudojamų dauginimui neuroninių kamieninių ląstelių perdavime. Genetiškai modifikuotų ląstelių klonų dauguma elgiasi kaip stabilių ląstelių linijų, nerodo jokių transformacijos požymių in vivo arba in vitro, bet turi išreikštą gebėjimą susisiekti slopinimą proliferacijos. Kai padauginama transplantacija ląstelių transfekuotose praeityje įdėta į gavėjo audinio, nesulaužant cytoarchitectonics ir neatliekant piktybinę transformaciją. Donorų neuroniniai kamieninės ląstelės nesideformuoja integracijos zoną ir vienodai konkuruoti dėl vietos su priimančiosios kamieninių ląstelių. Tačiau 2-3-oji diena intensyvumo dalijant transfectants ląstelių žymiai sumažintas, kuris atitinka kontaktinio slopinimo proliferacija in vitro. Į embrionų gavėjo nervinių kamieninių transfectants nėra centrinės nervų sistemos anomalijos, visi, kurie liečiasi su transplantato smegenų sritys, normaliai vystytis. Po transplantacijos, nervinės kamieninių ląstelių klonai greitai migruoja iš administravimo srityje ir dažnai peržengia atitinkamų germinaciniuose zonų su raktu takų tinkamai integruojant su kitais smegenų sričių. Nusėdimo genetiškai modifikuotų klonai ir transfekuotų ląstelių linijoms nervinių kamieninių ląstelių į šeimininko organizmą smegenų yra būdinga ne tik embriono laikotarpiu: šios ląstelės yra implantuotas į kelias zonas CNS vaisius, naujagimio, suaugusiųjų ir net senėjimo organizmas gavėją ir eksponuoti tuo pačiu metu, kai pakankamai integracijai talpa ir diferencijavimas. Visų pirma, po transplantacijos į smegenų skilvelių transfekuotų ląstelių ertmės migruoti nepažeidžiant kraujo-smegenų barjerą, ir yra neatskiriama komponentai iš akytos funkcinę smegenų audinio. Donoro neuronai sudaro tinkamas sinapses ir išskiria specifinius jonų kanalus. Išlaikant pro hematoencefalinį barjerą astroglia išvestinių neuroninių kamieninių ląstelių transfectants vientisumą, tęsiasi procesus smegenų kraujagyslių, ir oligodendrocytes donoro kilmė Express mielino pagrindinio baltymo ir myelinating neuronų procesai.

Be to, neuroninės kamieninės ląstelės yra transfekuotos naudoti kaip ląstelių vektoriai. Tokie vektorinės-genetinis konstruktai teikti stabili in vivo išraiškos užsienio genų, dalyvaujančių nervų sistemos vystymuisi ar naudojamų korekcijos genetinio defekto, nes šių genų produktai gali kompensuoti įvairių biocheminių CNS anomalijos. Labai migruojančių aktyvumas transfekuotose kamieninių ląstelių ir tinkamai implantuoti į gemalinių zonų skirtingų regionų besivystančiose smegenyse leidžia mums tikėtis visiškai išieškojimo paveldima trūkumas ląstelių fermentų. Modeliuojant sindromas, ataksija-teleangiektazijos (linija mutantas pelėms pg ir PCD) Purkinje ląstelėms smegenėlių išnyksta eksperimentiniai gyvūnai per pirmąsias savaites postnataliniam vystymuisi. Parodyta, kad nugaros kamieninių ląstelių įvedimas į tokių gyvūnų smegenis lydimas jų diferenciacijos į Purkinje ląsteles ir granuliuotus neuronus. Pcd mutantais judesių koordinavimas yra iš dalies pataisytas ir drebėjimo intensyvumas mažėja. Panašūs rezultatai buvo gauti klonuotų žmogaus nervinių kamieninių ląstelių transplantacijai primatams, kuriuose onkanazė sukėlė Purkinje ląstelių degeneraciją. Po transplantacijos donorų neuroninių kamieninių ląstelių buvo aptikta granulinių ir molekulinės sluoksnių sluoksnio ir Purkinje ląstelių smegenėlių parenchima. Todėl neuronų progenitinių ląstelių genetinė modifikacija gali užtikrinti stabilią, išreikštą fenotipo modifikaciją, kuri yra atspari išorinėms įtakoms. Tai ypač svarbu patologiniams procesams, susijusiems su donorų ląstelių išgyvenimo ir diferencijavimo trukdžių (pvz., Su imunine agresija) trukdančių faktorių recipiento vystymu.

Mokopolisacharydoza VII tipo žmonėms būdingas laipsniškas neurodegeneraciją, ir uždelstas intelektinę raidą, kad eksperimentai su pelėmis modeliuojama delecijos mutacijos iš genų beta-gliukuronidazė. Po transplantacijos į smegenų skilvelių naujagimių peles gavėjo transfekuota neuroninių kamieninių ląstelių sekretuoti beta-gliukuronidazės, donorės ląstelės buvo rastas pirmojoje terminalo zonoje ir tada plisti per smegenų parenchimos stabiliai korrigiruya lizosomų vientisumą į mutantas pelėms smegenis. Į Tay-Sachs liga modelį, transdukuoti retrovirusų nervinių kamieninių ląstelių gimdoje administravimo pelių vaisiaus ir naujagimio pelių transplantacijos suteikia veiksmingą išraiška beta-subvieneto beta-hexosaminidase į gavėjų mutacija, kuris veda į nenormalus kaupimo beta 2-gangliozidu.

Dar vienas regeneracinės medicinos plotas yra skatinti proliferacinis ir diferenciacija potencialaus paties paciento neuronų kamienines ląsteles. Ypač, nervinių kamieninių ląstelių išskiriami NT-3 esant nugaros smegenų ir galvos smegenų išemija žiurkės išreikšti NGF ir BDNF į pertvaros ir bazinių ganglijų, tirozino hidroksilazės hemisection - į dryžuotojo kūno, ir reelin - smegenėlėse ir mielino pagrindinio baltymo - smegenų .

Tačiau stimuliacijos neyronogeneza klausimai mokama ne pakankamai dėmesio. Keli darbai rodo, kad funkcinis apkrovimas nervinių centrų, atsakingų už skiriamųjų kvapų, atsispindi naujų neuronų susidarymą. Transgeninių pelių trūkumu neuronų adhezijos molekulių neyronogeneza intensyvumas mažinimo ir sumažinti migruojančių neuronų uoslės lemputės buvo susijęs su sutrikusia gebėjimą diskriminuoti kvapus skaičius, nors kvapas riba ir trumpalaikis uoslės atmintis nėra pažeidžiamas. Reglamente vaidina svarbų vaidmenį neyronogeneza funkcinę būklę iš dantyta vingyje ląstelių: silpnėjančio poveikį poveikio glutamato-grūdų po to, kai iš entorhinal žievės ląstelių naikinimo prisideda prie platinimo ir diferenciacijos neuronų ir pluoštų perforant kelias stimuliacija (pirminė įcentrinis indėlis į hipokampo) sukelia slopinimo neyronogeneza. Antagonistai NMDA receptorių aktyvuota apdoroja navikas neuronai, kadangi agonistų, atvirkščiai, sumažina intensyvumą neyronogeneza, kad poveikis panašus į gliukokortikoidų veiksmų. Literatūroje yra prieštaringi tyrimų rezultatai: informacija apie eksperimentiškai įrodyta slopinamasis poveikis sužadinimo neuromediatorių glutamato į neyronogenez neatitinka duomenų apie veislinių kamieninių ląstelių stimuliacija ir naujų neuronų išvaizda didėja traukulių veiklą gyvūnų hipokampo su eksperimentiniais ir kainic pilokarpino modelių epilepsija. Tuo pačiu metu, tradicinis modelis epilepsija sukelia pakartotinis subrangos slenksčio stimuliacija tam tikrų smegenų sričių (degdama) ir pasižymi mažiau sunkus praradimas neuronų neyronogeneza intensyvumas didėja tik vėlyvą etapą degdama, kai stebimas hipokampo pažeidimo ir mirties neuronų. Ji Parodyta, kad epilepsija priepuolių aktyvumą, kuris skatina neyronogenez su nenormaliu lokalizacijos naujų granulių neuronų, iš kurių daugelis rodomi ne tik dantyta vingyje, bet taip pat ir Baltoji limfa. Šie neuronai yra svarbus ataugų samanotas pluoštų plėtros programą, axons, nes jie yra nėra nuo įprastų kolateralinės INVERSE formavimo sinapsių su keliais gretimų grūdai-ląstelių.

Regioninių nervų kamieninių ląstelių panaudojimas atveria naujas perspektyvas naudoti ląstelių transplantaciją gydant medžiagų apykaitos ir genetines neurodegeneracines ligas, demielinizuojančias ligas ir po traumines CNS funkcijų sutrikimus. Prieš atlikdamas pakaitos ląstelių transplantaciją, vienas iš būdų parenka ir išplečia būtiną neuronų progenitorių ląstelių ex vivo tipą, siekiant juos vėliau įvežti tiesiai į pažeistą smegenų plotą. Terapinis poveikis šiuo atveju yra dėl pažeistų ląstelių pakeitimo arba vietinių augimo faktorių ir citokinų išsiskyrimo. Šis regeneracinės-plastikinės terapijos metodas reikalauja pakankamai didelės ląstelių su iš anksto nustatytų funkcinių charakteristikų persodinimo.

Prireikus turėtų būti pripažinta ir tolesni tyrimai apie molekulinių savybių ir Regeneratyvinių ir plastikinių potencialų kamieninių ląstelių subrendusio smegenų, gerai kaip sugebėjimą transdifferentiation regionų kamieninių ląstelių skirtingų audinių kilmės. Šiandien tikrinami antigenai kraujodaros kaulų čiulpų kamieninės ląstelės su nustatymo žymėto kartu ląstelių, galinčių transdifferentiate į nervinių kamieninių ląstelių pirmtakų (CD 133+, 5E12 +, CD34-, CD45-, CD24). Ląstelės, kurios in vitro formuoja neurofesus ir formuoja neuronus, transplantuojant į naujagimių imunodeficientų pelių smegenis. Palūkanos už ląstelės ksenotransplantologii atstovauti tyrimų rezultatus dėl kryžminio transplantacijos kamieninių ląstelių asmenų evoliuciškai nutolę taksonų galimybę. Belieka be tinkamo aiškinimo nuo neuroninių kamieninių ląstelių implantavimo į smegenų auglių srityje rezultatai: transplantuoto ląstelės aktyviai migruoja per visą tūrį, naviko, neišplečiant jos ir ląstelių įvedimas sveika smegenų dalį stebimas jų aktyvų migraciją į naviką. Klausimas dėl tokios migracijos biologinės reikšmės išlieka atviras.

Reikia pažymėti, kad sėkmingas transplantacija nervinių kamieninių ląstelių, taip pat kitų neuroninių kamieninių ląstelių, gautų iš hESCs, yra įmanoma tik pagal naudojimo yra labai neuroninių kamieninių ląstelių sąlygomis, kaip nediferencijuotos embriono kamieninių ląstelių transplantacijos suaugusiųjų imunitetą gavėjas neišvengiamai, transformuotas į teratoma ir teratokarcinoma. Net minimalus blogai diferencijuotų ląstelių donoro ląstelių suspensija žymiai padidėja ir tumorogeniškumo transplantato neleistinai padidinti navikų susidarymo ar neneyralnoy audinio riziką. Paruošimas homogeninės populiacijų nervinio kamieninių ląstelių yra įmanoma, kai naudojamas kaip alternatyvus šaltinis donoro audinių ląstelių kylančių tam tikrų etapų paprastai teka embriogenezę. Kitas būdas yra kruopščiai pašalinti nepageidaujamus ląstelių populiacijas Lineage konkretaus pasirinkimo. Pavojus taip pat numato tam tikslui neurotransplantation hESCs po Nepakankamo in vitro su augimo faktorių panaudojimą. Šiuo atveju, nesugebėjimas negalima atmesti neuronų diferenciacijos programą pradines struktūras būdingą nervinio vamzdelio.

Šiandien yra aišku, kad nervinio kamieninės ląstelės eksponuoti tropizmas CNS patologinių pokyčių ir turi tariama regeneracinė-plastiko poveikį. Į šaltinį ląstelių mirties nervų audinio mikroaplinka imituoja orientacijos diferenciaciją paskiepytų ląstelių, tokiu būdu regeneravimą konkrečių neuroninių elementų per CNS srityje deficitą. Tam tikrais neurodegeneracinių procesai vyksta neurogeninio signalus į pakartojimą neyronogeneza ir brandžių neuroninių kamieninių ląstelių į smegenis gali reaguoti į, duodantis nurodymus informacijos. Grafinė iliustracija apie nervų kamieninių ląstelių terapines galimybes pateikiama daugybės eksperimentinių tyrimų duomenų. Intracisternal administravimo klonai neuroninių kamieninių ląstelių gyvūnams su žiedais, vidurinės smegenų arterijos (išeminio insulto modelis) padeda sumažinti plotą, ir apimtį destruktyvių pokyčių smegenų srityje, ypač transplantacijos neuroninių kamieninių ląstelių su FGF2 atveju. Pastebėta imunocitochemijos su migracija donorų ląstelių išeminės zonoje su paskesnis su nepažeista recipiento ląstelės smegenų. Transplantacijos nesubrendusios neuroepithelial ląstelių linijos MHP36 pelės į žiurkių smegenų eksperimentinę insulto pagerinti sensorinė funkciją ir šių ląstelių įvedimą į smegenis skilvelių pagerina pažinimo funkcijos. Kaip transplantacijos rezultatas, žiurkės forminiais hematopoetinių nervinio-žmogaus kaulų čiulpų ląstelės yra pašalinamos disfunkcija galvos smegenų žievės susirgimų, sukeltų išemijos traumos. Šiuo atveju ksenogenezės nervų progenitorių ląstelės migruoja iš injekcijos vietos į smegenų audinio destrukcinius pokyčius. Intrakranijinė transplantacija kaulų čiulpų ląstelių homologinės traumos smegenų žievės žiurkėms rezultatai dalinio susigrąžinimo motorinės funkcijos. Prizhivlyayutsya donorės ląstelės proliferaciją atlikti neuronų diferenciaciją į neuronų ir astrocituose, ir migruoti į priekį pažeidimo. Kai vartojamas suaugusių žiurkių su eksperimentinės insulto stuburą klonuoti žmogaus nervų kamieninių ląstelių pakeisti sugadintus CNS ląstelių ir iš dalies atkurti sutrikusios smegenų funkciją.

Neuroniniai kamieninės ląstelės, išskirtos iš embriono naudingai Smegenų pūslė, kuri išsivysto gerokai vėliau nei daugiau caudally esančių porcijomis nervų kamieno. Izoliavimo neuroninių kamieninių ląstelių iš stuburo smegenų 43-137 dienų žmogaus vaisiaus, kaip į EGF ir FGF2 Šios ląstelės buvimo galimybė suformuoti neurospheres ir pradžioje praėjimai eksponuoti multipotentiality diferencijuoti į neuronų ir astrocituose. Tačiau ilgalaikis auginimas neuroninių kamieninių ląstelių (daugiau kaip 1 metus) atima multipotency - tokias ląsteles galima diferencijuoti tik į Astrocitas, tai yra, jie unipotent. Regionų neuroninių kamieninių ląstelių gali būti gaunamas iš dalies bulbektomii ir po to, kai sklidimo kultūrą LIF buvimo perkelti į to paties paciento su neurodegeneracinių pokyčių kitose CNS. Klinikoje ląstelių pakaitinė terapija, naudojant neuroninių kamieninių ląstelių pirmą kartą buvo atlikta dėl galvos smegenų insultu, pacientų gydymui, lydimas pakitimų baziniuose ganglijuose smegenų. Dėl donorų ląstelių transplantacijos daugelio pacientų klinikinė būklė pagerėjo.

Kai kurie autoriai mano, kad neuroninių kamieninių prizhivlyatsya ląstelių sugebėjimas migruoti ir integruotis į įvairių sričių nervų audinyje yra pažeistas centrinę nervų sistemą atveria neribotas galimybes ląstelių terapijos yra ne tik vietos, bet ir platus (insultas arba asfiksija), multiochagovyh (išsėtinė sklerozė), ir net pasaulio ( labiausiai paveldima medžiagų apykaitos sutrikimai arba neurodegeneracinių demencijos), patologinių procesų, kuriuose. Iš tiesų, kai persodinti klonuotą nervinių kamieninių pelę ir žmogaus ląstelių gavėjas gyvūnų (pelių ir primatų, atitinkamai) iš dopaminerginių neuronų degeneraciją mezostrialnoy sistemos, sukeltos įvedimo metil-fenil-tetrapiridina (modelio Parkinsono ligos) 8 mėnesių iki transplantacijos, donorų nervinių kamieninių ląstelių yra integruojami į recipiento CNS. Po mėnesio, transplantuoto ląstelės yra dvišaliu palei midbrain. Dalį su tuo susijusių neuronų kilmės išreiškia tirozingidrolazu donoras imuninio atsako į transplantacijos nesant. Žiurkių gydomi 6-hydroxydopamine (kitu eksperimentinio modelio Parkinsono ligos), pritaikymas prie transplantuoto ląstelių mikroaplinkos į priimančią smegenų buvo nustatyta, kultivuojant sąlygų neuroninių kamieninių ląstelių transplantacijos prieš. Neuroniniai kamieninės ląstelės sparčiai dauginasi in vitro pagal EGF įtaką, sudarė dėl dopaminerginių neuronų deficito į stuburą pažeistas efektyviau nei ląstelių iš 28 dienų amžiaus kultūrų. Autoriai manyti, kad tai yra dėl nuostolių gebėjimą suvokti atitinkamo diferenciacijos signalus ląstelės dalijimosi metu vitro-nervų pirmtakų ląstelių.

Kai kurių tyrimų bandė pagerinti pažeistų dryžuotojo kūno reinnervation procesų poveikį persodinti į šį embrioninių stuburą ląstelėse kaip neurotrofiniame veiksnių šaltinis vienu metu transplantacijos dopaminerginių neuronų pilvo vidurinių smegenų srityje. Kaip paaiškėjo, neurotransplantacijos veiksmingumas daugiausia priklauso nuo embrioninių nervų audinio įterpimo metodo. Kaip mokslinių tyrimų transplantacijos preparatų vaisiaus nervinio audinio į skilvelio sistemos smegenų rezultatas (kad būtų išvengta žalos dryžuotu parenchimos) gauti informacijos apie jų teigiamą poveikį parkinsonizmo variklio defektas.

Tačiau, kituose tyrimuose, eksperimentinių stebėjimai parodė, kad transplantacija į smegenis skilvelio preparatai embriono Brzuszny vidurinių smegenų neuroninio audinius, turinčius dopaminerginių neuronų kaip persodinti GABAergic neuroninių elementus embriono žiurkės dryžuotojo gemiparkinsonizmom nėra prisidėti prie sutrikimais funkcijų dopaminerginės sistemos atkūrimo. Priešingai, imunocitochemiją patvirtino mažo išlikimo dopaminerginių neuronų pilvo vidurinių smegenų, persodinami į žiurkių stuburą įrodymus. Terapinis poveikis intraskilvelinė transplantacija embriono Brzuszny vidurinių smegenų neuroninio audinio realizuotas tik tada, kai tuo pačiu metu implantacijai į denervuojamo dryžuotojo formulavimo dryžuotojo kūno embrioninių ląstelių. Autoriai siūlo, kad šio poveikio mechanizmas yra susijęs su teigiamu mitybos poveikį GABAergic ląstelių embriono stuburą konkrečių dopaminerginei intraskilvelinio transplantacijos pilvo vidurinių smegenų. Išreikštas glijos reakcija transplantacijos buvo pridėtas šiek tiek regresijos rodiklių apomorfinas testą. Pastarasis, savo ruožtu, koreliuoja su turiniu serumą BPST, kuri tiesiogiai taškų iki kraujo-smegenų barjero pralaidumą pažeidimo. Remiantis šiais duomenimis, autoriai išvada, kad BPST serumas gali būti panaudotas kaip tinkamas priemonė funkcinės būklės transplantacijos, ir padidėjo pralaidumą kraujo-smegenų barjerą už neurospecific BPST-tipo antigeno yra patogenetinė grandis transplantato nepakankamumas dėl autoimuninių žalos nervų audinio recipiento .

Žvelgiant iš kitų tyrėjų, prigijimą ir integracijos neuroninių kamieninių ląstelių taško po transplantacijos stabili ir gyvenimas, kaip donorės ląstelės randamos gavėjo bent dvejus metus po transplantacijos, ir be gerokai sumažinti jų skaičių. Mėginimai paaiškinti tuo, kad nediferencijuotos valstybės nervų kamieninės ląstelės neturi išreikšti I ir II MHC klasės, kuris būtų pakankamas sukelti imuninį atmetimo reakciją, gali būti laikomas galiojančiu tik dėl prastai diferencijuotų neuroninių kamieninių ląstelių. Tačiau ne visos receptoriaus smegenyse esančios neuroninės kamieninės ląstelės išlieka nepakitusios būklės. Dauguma jų yra diferencijuotos, per kurias MHC molekulės išreiškiamos pilnai.

Visų pirma, efektyvumo tinkamas naudoti pagal eksperimentinių parkinsonizmas narkotikų intrastriarnoy transplantacijos embriono pilvo vidurinių smegenų nepakankamas gydymo, kurių sudėtyje yra dopaminerginiam neuronus, susijęs su prastos išlikimo persodintų dofaminer- tistinius neuronų (tik 5-20%), kurią sukelia reaktyviosios gliosis papildomos vietinės traumos smegenų parenchimos ne transplantacija. Yra žinoma, kad vietos žalos smegenų parenchimos ir susijusios gliosis sutrikti kraujo-smegenų barjerą vientisumą su prieiga prie periferinio kraujo antigeno nervų audinyje, ypač neurono ir Okara antigenu. In šių antigenų kraujo buvimas gali sukelti konkrečius citotoksinių antikūnų į juos ir sukurti autoimuninė agresiją.

Cymbalyuk V. Et al (2001) praneša, kad jis vis dar galiojanti išlieka tradicinis požiūris, pagal kurį CNS yra imunologinis privilegijuota sritis, izoliuota nuo imuninės sistemos kraujo-smegenų barjerą. Savo literatūros apžvalga, autoriai kreiptis į darbų, rodančių, kad šis požiūris nėra visiškai suderinamas su imuninės procesų esmės žinduolių smegenų skaičius. Ji yra nustatyta, kad žymėtoji medžiaga įvesta į smegenų parenchimos gali pasiekti giliai gimdos kaklelio limfiniai mazgai, ir po to, kai intracerebrinę injekcijos antigeno organizme sudaro specifinius antikūnus. Kaklo limfmazgių ląstelės atitinka tokius antigenus, pradedant nuo 5 dienos po injekcijos. Konkrečių antikūnų formavimas taip pat atsiskleidė odos transplantacijai į smegenų parenchimą. Peržiūros autoriai pateikia keletą galimų būdų transportuoti antigeną iš smegenų į limfinę sistemą. Vienas iš jų yra antigenų perėjimas iš perivaskulinių erdvių į subarachnoidinę erdvę. Manoma, kad perivaskuling erdvės, lokalizuota palei pagrindinių laivų smegenis, yra limfinės sistemos smegenyse ekvivalentas. Antrasis būdas yra palei baltus pluoštus - per latasty kaulą į limfmazgius, nosies gleivinės. Be to, ilgis yra didelis limfinių kraujagyslių tinklas. Limfocitų kraujo ląstelių barjeras taip pat yra labai santykinis. Įrodyta, kad aktyvuotų limfocitai yra pajėgi gaminti fermentus, kurie turi įtakos struktūros "imuninės filtro" smegenų pralaidumą. Pasibaigus kapiliarinių venulų lygiui, įjungiami T-pagalbininkai įsiskverbia per nepažeistą kraujo ir smegenų barjerą. Disertacija apie antigeno ląstelių nebuvimą smegenyse neprilygsta kritikai. Šiuo metu įtikinamai įrodė pateikdamas antigenų CNS bent trijų rūšių ląstelių galimybę. Pirma, tai yra dendritinės ląstelės kaulų čiulpų kilmės, kurie lokalizuojasi smegenis kartu didelių kraujagyslių baltos medžiagos. Antra, antigenai yra galintis pateikti endotelio ląstelių kraujagyslių smegenų, ir kartu su MHC antigenų, kuris palaiko klonuotą augimą, būdingą šių antigenų T ląstelių. Trečia, mikro- ir astroglia ląstelės veikia kaip antigeną pateikiančios medžiagos. Dalyvaujant imuninis atsakas CNS, astrocitais įsigyti savybes immunnoeffektornoy ląstelių ir išreikšti antigenų, citokinai ir imunomoduliatoriai, skaičių. Kai inkubuojamas su y-interferono (Y-INF) in vitro astroglijinių ląstelės ekspresuoja I klasės MHC antigenų ir II, ir stimuliuojama astrocitais yra pajėgi antigeno atstovavimo ir palaikymo klonuotą limfocitų proliferaciją.

Smegenų audinys traumos, pooperacinis uždegimas, edema ir fibrino indėliai, kurie pateikiami su vaisiaus nervinio audinio transplantacija, sudaryti sąlygas padidinti kraujo-smegenų barjerą sutrikusios savęs tolerancijos, jautrumo ir aktyvavimo SDZ + CD4 + limfocitų pralaidumą. Automa- ir pateikimas aloantigenus atliktas astrocituose ir microglial ląsteles, prisitaikančias prie y-INF išreikšti MHC molekulės ICAM-1, LFA-I, LFA-3, kostimuliaciniai molekules B7-1 (CD80) ir B7-2, (CD86), taip pat kaip sekrecijos IL-la, IL-IP ir y-INF.

Todėl aplinkybė, kad ilgesnės išlikimo embriono nervinio audinio, esančio intracerebrinę transplantacijos, o ne jos periferinio administravimo sunkiai gali būti paaiškinta tuo, kad pradedant transplantacijos imunitetą trūkumo. Ypač dėl to, monocitai, aktyvuotos limfocitai (citotoksiniai CD3 + CD8 + T ląstelių ir pagalbininkas) ir kuriame citokinai jie gamina, taip pat antikūnai prieš antigenų periferinė transplantacijos vaisiaus nervų audinio vaidina svarbų vaidmenį jo atmetimo. Kai sudarant sąlygas daugiau ilgalaikio atsparumo neyrotransplantatov T ląstelių imuninės procesus svarbą turi mažą ekspresijos lygį MHC molekulių embriono nervų audiniuose. Štai kodėl eksperimento imuninės uždegimas po transplantacijos embriono nervinio audinio smegenyse vystosi lėčiau nei po odos persodinimas. Tačiau po 6 mėnesių, yra visiškai sunaikinami atskirų transplantantų nervinio audinio. Transplantacijos daugiausia išsidėstęs T limfocitų apribota antigenais MHC II klasės srityje (Nikolajus ir kt., 1988). Ji buvo įkurta eksperimentiškai, kad neurotransplantation ksenologicheskoy išnaudosime T-pagalbininkas (L3T4 +), bet ne citotoksinių T limfocitų (Lyt-2), prailgina žiurkė nervų audinių išlikimą gaunančių pelių smegenyse. Neyrotransplantata atmetimas lydi infiltracija makrofagų ir T-limfocitų priimančiosios. Todėl, makrofagų ir aktyvuotų microglial ląstelės in situ priimančiosios veikia kaip imunostimuliuojančia antigeną pateikiančios ląstelės, ir donorų antigenų padidėja MHC I klasės išraiškos padidina citotoksinis žudikas veikla recipiento T limfocitų.

Tai nėra prasmės analizuoti daug bandymų paaiškinti spekuliacinę neyrotransplantata atmetimo reakciją organizmo recipiento imuninės sistemos ant endotelio ląstelių arba glijos donorų elementų kaip švarių linijų ir neuroninių kamieninių ląstelių pasitikrinti imuninę ataką. Pažymėtina, pranešimą, kad ilgesnį transplantato išlikimo mechanizmai atstumu centrinės nervų sistemos vaidina svarbų vaidmenį išraiška čiulpų ląstelių Fas-ligando apoptozę receptoriaus (Fas-molekulės) apie T limfocitų infiltruojami smegenis ir sukelti apoptozę, kuri yra būdinga apsauginis mechanizmas overbarrier autoimmunogennyh audiniuose.

Kaip taikliai pažymėti, Cymbalyuk V. Et al (2001) transplantacija embriono kuris nerviniame audinyje yra būdingas vystymosi uždegimo APGADINAMI jautrūs smegenų antigenų ir aktyvuotų ląstelių, antikūnų, ir taip pat dėl to, kad vietos gamybos citokinų. Svarbų vaidmenį vaidina jau turi sensitizacijos organizmo smegenų antigenų, kuri atsiranda per CNS ligų vystymuisi ir gali būti nukreipta į transplantacijos antigenus. , Kad yra, kodėl faktinis ilgesnis išgyvenamumas Audinių suderinamumas neyrotransplantatov pasiekti tik slopinimo imuninės sistemos per administravimo ciklosporino A arba monokloninių antikūnų prieš CD4 + limfocitų recipiento.

Taigi daugelis neurotransplantacijos problemų lieka neišspręstos, įskaitant tuos, kurie susiję su audinių imunologiniu suderinamumu, kuriuos galima išspręsti tik atlikus tikslius pagrindinius ir klinikinius tyrimus.