Medicinos ekspertas
Naujos publikacijos
Polimerazės grandininė reakcija (PGR) infekcinių ligų diagnostikoje
Paskutinį kartą peržiūrėta: 05.07.2025
Visas „iLive“ turinys yra peržiūrėtas medicinoje arba tikrinamas, kad būtų užtikrintas kuo didesnis faktinis tikslumas.
Mes turime griežtas įsigijimo gaires ir susiejamos tik su geros reputacijos žiniasklaidos svetainėmis, akademinių tyrimų institucijomis ir, jei įmanoma, medicininiu požiūriu peržiūrimais tyrimais. Atkreipkite dėmesį, kad skliausteliuose ([1], [2] ir tt) esantys numeriai yra paspaudžiami nuorodos į šias studijas.
Jei manote, kad bet koks mūsų turinys yra netikslus, pasenęs arba kitaip abejotinas, pasirinkite jį ir paspauskite Ctrl + Enter.
PGR yra vienas iš DNR diagnostikos metodų, leidžiantis milijonus kartų padidinti aptiktos bakterijų ar virusų genomo (DNR) dalies kopijų skaičių, naudojant fermentą DNR polimerazę. Tiriama tam tikram genomui būdinga nukleorūgšties dalis dauginama (amplifikuojama) daug kartų, o tai leidžia ją identifikuoti. Pirmiausia bakterijų ar virusų DNR molekulė kaitinant padalijama į dvi grandines, tada, esant susintetintiems DNR pradmenims (nukleotidų seka yra specifinė nustatomam genomui), jie jungiasi prie komplementarių DNR dalių, o po kiekvieno pradmens, esant termostabiliai DNR polimerazei, susintetinama antroji nukleorūgšties grandinė. Gaunamos dvi DNR molekulės. Procesas kartojamas daug kartų. Diagnostikai pakanka vienos DNR molekulės, t. y. vienos bakterijos ar viruso dalelės. Įvedus į reakciją papildomą etapą – DNR sintezę RNR molekulėje naudojant fermentą atvirkštinę transkriptazę – tapo įmanoma ištirti RNR virusus, tokius kaip HCV virusas. PGR yra trijų etapų procesas, kuris cikliškai kartojasi: denatūracija, pradmenų atkaitinimas, DNR sintezė (polimerizacija). Susintetintas DNR kiekis identifikuojamas ELISA arba elektroforezės būdu.
PGR gali būti naudojama įvairi biologinė medžiaga – kraujo serumas arba plazma, šlaplės išgrandymas, biopsija, pleuros skystis, smegenų skystis ir kt. PGR pirmiausia naudojama infekcinėms ligoms, tokioms kaip virusinis hepatitas B, virusinis hepatitas C, virusinis hepatitas D, CMV infekcija, lytiškai plintančios infekcijos (gonorėja, chlamidijos, mikoplazma, ureaplazmos infekcijos), tuberkuliozė, ŽIV infekcija ir kt., diagnozuoti.
PGR pranašumas diagnozuojant infekcines ligas, palyginti su kitais tyrimo metodais, yra toks:
- infekcinį agentą galima aptikti bet kurioje kūno biologinėje aplinkoje, įskaitant medžiagą, gautą atliekant biopsiją;
- galima diagnozuoti infekcines ligas ankstyviausiose ligos stadijose;
- galima kiekybiškai įvertinti tyrimo rezultatus (kiek virusų ar bakterijų yra tiriamoje medžiagoje);
- didelis metodo jautrumas; pavyzdžiui, PGR jautrumas nustatant hepatito B viruso DNR kraujyje yra 0,001 pg/ml (maždaug 4 × 10⁻² kopijų /ml), o DNR hibridizacijos metodo, naudojant šakotus zondus, jautrumas yra 2,1 pg/ml (maždaug 7 × 10⁻¹ kopijų /ml).
[