Medicinos ekspertas
Naujos publikacijos
Polimerazės grandininė reakcija (PGR) infekcinių ligų diagnozėje
Paskutinį kartą peržiūrėta: 23.04.2024
Visas „iLive“ turinys yra peržiūrėtas medicinoje arba tikrinamas, kad būtų užtikrintas kuo didesnis faktinis tikslumas.
Mes turime griežtas įsigijimo gaires ir susiejamos tik su geros reputacijos žiniasklaidos svetainėmis, akademinių tyrimų institucijomis ir, jei įmanoma, medicininiu požiūriu peržiūrimais tyrimais. Atkreipkite dėmesį, kad skliausteliuose ([1], [2] ir tt) esantys numeriai yra paspaudžiami nuorodos į šias studijas.
Jei manote, kad bet koks mūsų turinys yra netikslus, pasenęs arba kitaip abejotinas, pasirinkite jį ir paspauskite Ctrl + Enter.
PGR - viena iš DNR diagnostikos, leidžiančių padidinti kopijų aptinkamo dalį genomo DNR () bakterijų arba virusų skaičių metodų yra milijonus kartų, naudojant DNR polimerazės fermentą. Bandymas šio konkretaus genominės nukleino rūgšties segmento pakartotinai, padaugintas (amplifikuoto) kad juos būtų galima identifikuoti. Pirma, DNR molekulė pagal apibrėžties bakterijų arba virusų kaitinant padalintas į dvi grandines, tada Susintetintų DNR pradmenų (sekų susijusios su nustatytoje genomo nukleotidų) buvimą sukabindami juos su papildomomis ruožų DNR, susintetintas antrąją viją nukleino rūgšties po kiekvieno gruntas, esant termostabilios DNR polimerazei . Gauta dviejų DNR molekulių. Procesas kartojamas daug kartų. Diagnozuoti, tik vienas DNR molekulė, t.y. Vienas bakterija arba virusas dalelių. Reagavimą papildomą žingsnį - DNR sintezė RNR molekulės, naudojant fermentą, atvirkštinės transkriptazės - leido išbandyti RNR virusų, tokių kaip HCV viruso. PGR - trijų pakopų procesas, Périodique denatūracijos, grunto atkaitinimas, DNR sintezę (polimerizacija). DNR suma susintetintas buvo žymimas ELISA arba elektroforezės.
PGR gali būti naudojama skirtingose biologinės medžiagos - serumo ar kraujo plazmos, grandymo šlaplės biopsijos, pleuros skysčio, galvos ir stuburo smegenų skysčio, ir tt Kur pirmoji PGR buvo naudojamas infekcinių ligų, tokių kaip virusinės hepatito B, hepatito C virusinė, virusinės hepatito D, CMV infekcijos, infekcinės lytiniu keliu plintančių infekcijos (gonorėja, šiukšlių diynaya, mikoplazmų, Ureaplasma infekcija), tuberkuliozės, ŽIV diagnozės - infekcija ir tt
PGR pranašumas infekcinių ligų diagnozavime, palyginti su kitais tyrimų metodais, yra toks:
- infekcijos sukėlėjas gali būti bet kokioje biologinėje kūno aplinkoje, įskaitant biopsijoje gautą medžiagą;
- Galima diagnozuoti infekcines ligas ankstyviausiose ligos stadijose;
- Galimas kiekybinis tyrimo rezultatų įvertinimas (kiek viruso ar bakterijų yra tirtoje medžiagoje);
- didelis metodo jautrumas; pvz, jautrumas PGR aptikti DNR hepatito B viruso kiekis kraujyje yra 0,001 pg / ml (maždaug 4 × 10 2 kopijų / ml), kadangi DNR hibridizacijos metodu jautrumas naudojant šakotosios zondai - 2,1 pg / ml (maždaug 7 × 10 5 kopijų / ml).