Trombocitų agregacija su ristocetinu (von Willebrando faktorius )

Willebrando faktoriaus aktyvumo pamatinės vertės (norma) yra 58–166 %.

Von Willebrando faktorių sintetina endotelio ląstelės ir megakariocitai. Jis būtinas normaliam trombocitų adhezijai ir gali pailginti VIII faktoriaus pusinės eliminacijos laiką. Plazmos krešėjimo VIII faktorius – antihemofilinis globulinas A – kraujyje cirkuliuoja kaip trijų subvienetų, žymimų VIII-k (krešėjimo vienetas), VIII-Ag (pagrindinis antigeno žymuo) ir VIII-vWF (von Willebrando faktorius, susijęs su VIII-Ag), kompleksas. Manoma, kad von Willebrando faktorius reguliuoja antihemofilinio globulino A (VIII-k) krešėjimo dalies sintezę ir dalyvauja kraujagyslių ir trombocitų hemostazėje.

Von Willebrando liga yra paveldima liga, kuriai būdingas padidėjęs kraujavimo laikas, sumažėjęs ristocetino kofaktoriaus aktyvumas ir sumažėjęs (įvairiu laipsniu) VIII faktoriaus krešėjimo aktyvumas. Klinikiniai ligos požymiai yra panašūs į trombocitopatijos. Tačiau pacientams, kurių VIII faktoriaus aktyvumas yra žymiai sumažėjęs, gali pasireikšti hematomos ir hemartrozė.

Remiantis laboratoriniais tyrimais, kurie leidžia nustatyti von Willebrando faktoriaus struktūrą ir aktyvumą, išskiriamos šios ligos formos.

• I tipui (70 % visų atvejų) būdingas nedidelis ristocetino kofaktoriaus (von Willebrando faktoriaus) ir krešėjimo aktyvumo (VIII-k) sumažėjimas, esant normaliai von Willebrando faktoriaus makromolekulinei struktūrai.
• II tipas: pagrįstas selektyviu von Willebrando faktoriaus didelės molekulinės masės polimerų trūkumu dėl šio baltymo struktūros sutrikimų.
  • IIB tipą sukelia padidėjusi von Willebrando faktoriaus ir trombocitų sąveika, o padidėjęs trombocitų agregatų klirensas sukelia trombocitopeniją.
• III tipui būdingas didelis kiekybinis von Willebrando faktoriaus trūkumas, dėl kurio kliniškai reikšmingai sumažėja VIII faktoriaus (VIII-k) aktyvumas.

Von Willebrando faktoriaus kiekis nustatomas tais atvejais, kai kraujavimo laikas yra padidėjęs, trombocitų skaičius yra referencinių verčių ribose ir nėra akivaizdžių trombocitų disfunkcijos priežasčių. Von Willebrando faktoriui įvertinti nustatomas kiekybinis von Willebrando faktoriaus kiekis (ristocetino kofaktoriaus aktyvumo tyrimas), tiriama ristocetino sukelta trombocitų agliutinacija ir su VIII faktoriumi susijusi von Willebrando faktoriaus antigeninė struktūra (VIII-vWF).

Trombocitų agregacijos nustatymas ristocetinu plazmoje naudojamas kiekybiniam von Willebrand faktoriaus įvertinimui. Nustatytas tiesinis ryšys tarp ristocetino agregacijos laipsnio ir von Willebrand faktoriaus kiekio. Metodas pagrįstas šio antibiotiko (ristocetino) gebėjimu stimuliuoti von Willebrand faktoriaus sąveiką su trombocitų glikoproteinu Ib in vitro. Daugeliu von Willebrand ligos atvejų stebimas sutrikęs ristocetino agregavimas, kai atsakas į ADP, kolageną ir adrenaliną yra normalus. Sutrikusi ristocetino agregacija taip pat nustatoma sergant Bernard-Soulier makrocitine trombodistrofija (ristocetino agregacijos receptorių nebuvimas trombocitų membranoje). Diferenciacijai naudojamas testas, pridedant normalios plazmos: sergant von Willebrand liga, ristocetino agregacija normalizuojasi pridėjus normalios plazmos, o Bernard-Soulier sindromo atveju tai neįvyksta.

Tyrimas taip pat gali būti naudojamas diferencinei hemofilijos A (VIII faktoriaus trūkumo) ir von Willebrando ligos diagnozei. Sergant hemofilija, VIII-k kiekis yra smarkiai sumažėjęs, o VIII-fB kiekis yra normos ribose. Kliniškai šis skirtumas pasireiškia tuo, kad sergant hemofilija, atsiranda hematomos tipo padidėjęs kraujavimas, o sergant von Willebrando liga – petechialinės hematomos tipo.

Ristocetino sukelta trombocitų agliutinacija daugumoje von Willebrando ligos atvejų, išskyrus IIB tipą, yra sumažėjusi.

Su VIII faktoriumi (VIII-vWF) susijusi von Willebrando faktoriaus antigeninė struktūra nustatoma įvairiais imunologiniais metodais, o von Willebrando faktoriaus pasiskirstymas pagal molekulių dydį nustatomas agarozės gelio elektroforezės būdu. Šie tyrimai naudojami von Willebrando ligos tipui nustatyti.

Trombocitų agregacijos tyrimas su įvairiais induktoriais atliekamas ne tik siekiant nustatyti trombocitų agregacijos funkcijų sutrikimus. Šis tyrimas leidžia įvertinti antitrombocitinio gydymo veiksmingumą, parinkti individualias vaistų dozes ir atlikti vaistų stebėjimą.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]