Medicinos ekspertas
Naujos publikacijos
Sauzern-blotting
Paskutinį kartą peržiūrėta: 23.04.2024
Visas „iLive“ turinys yra peržiūrėtas medicinoje arba tikrinamas, kad būtų užtikrintas kuo didesnis faktinis tikslumas.
Mes turime griežtas įsigijimo gaires ir susiejamos tik su geros reputacijos žiniasklaidos svetainėmis, akademinių tyrimų institucijomis ir, jei įmanoma, medicininiu požiūriu peržiūrimais tyrimais. Atkreipkite dėmesį, kad skliausteliuose ([1], [2] ir tt) esantys numeriai yra paspaudžiami nuorodos į šias studijas.
Jei manote, kad bet koks mūsų turinys yra netikslus, pasenęs arba kitaip abejotinas, pasirinkite jį ir paspauskite Ctrl + Enter.
Southern blotting (sukurta E. Southern ir R. Davies 1975 m.) Yra pagrindinis metodas, kuriuo nustatomi tam tikros ligos genai. Dėl to DNR iš paciento ląstelių ekstrahuojamas ir apdorojamas vienu iš restrikcijos endonukleazių (ar kelių). Iš gautų fragmentų elektroforezė yra tokia, kuri leidžia jiems būti dydžio dydžio (mažesni fragmentai judesni greičiau per gelio poras). Tada fragmentai perkeliami (perspausdinami) į nitroceliuliozės filtrą, ant kurio paviršiaus žymėtas zondas yra sluoksnis. Zondas susieja tik su papildoma seka. Tada autoradiografijos metodu nustatoma pageidaujamo genomo DNR fragmento padėtis elektroforegramai.
Hibridizacijos su pažymėtų DNR zondas DNR arba RNR preparatų, lašinamas padaryta ant kietoje matricoje be išankstinio apribojimo ir elektroforezės yra vadinamas Dot ir lizdą hibridizacija, priklausomai nuo iš DNR dėmės konfigūracijos ant filtro (apvalios arba pailgos, atitinkamai).
[