Hematopoetinės kamieninės ląstelės

Hematopoetinių kamieninių ląstelių (HSCs) kaip mezenchiminių kamieninių ląstelių yra būdingas multipotency ir sukelti ląstelių linijas, baigtinių elementų, kurie sudaro kraujo kūnelių ir kai kurios specializuotos audinių ląsteles imuninei sistemai.

Iš bendro protėvio visų kraujo ląstelių egzistavimą hipotezė, taip pat terminas "kamieninių ląstelių", priklausanti A. Maximov (1909) Galimas formavimas ląstelių masės iš GSK didžiulis -. Kaulų čiulpų kamieninės ląstelės gamina 10 dienos ląsteles, kurios sudaro kraujo kūnelių paties periferinė. Iš kraujodaros kamieninių ląstelių buvimas buvo įkurta 1961 metais eksperimentų kraujodaros atsigavimo pelių, vartojusių mirtiną dozę radiacijos poveikio, kad naikina kaulų čiulpų kamienines ląsteles. Pos ty transplantacija singeninės kaulų čiulpų ląstelių, todėl mirtinai apšvitinti gyvūnus diskretus židiniai kraujodaros buvo aptikta gavėjų blužnis, kurio šaltinis - Single clonogenic kamieninės ląstelės.

Tada buvo įrodyta, kad hematopoetinės kamieninės ląstelės gali savarankiškai palaikyti, o tai sąlygoja hematopoieso funkciją intogenezėje. Embrionų vystymosi procese HSC pasižymi dideliu migracijos aktyvumu, būtinu jų migracijai į kraujo kūnelių vietas. Ši HSC savybė yra išsaugota ir intogenezėje - dėl jų nuolatinės migracijos atsiranda nuolatinis imunokompetentinių ląstelių atnaujinimas. GSK migracijos, sugebėjimą įsiskverbti per kraujo audinių kliūčių, implantacija audinių augimui ir clonogenic jeigu kaulų čiulpų transplantacijos ląstelių pagrindą į ligų, susijusių su sutrikimų hemopoetinio sistemos skaičiaus.

Kaip ir visi kamieninių ląstelių išteklius, kraujodaros kamieninės ląstelės dalyvauja savo nišą (kaulų čiulpų) labai mažais kiekiais, kuri veda prie tam tikrų sunkumų jų paskyrimo. Immunophenotypic žmogaus HSCs yra apibūdinamas kaip CD34 + NK ląstelių, galinčių migruoja į kraujotaką ir kolonizuoti organus imuninės sistemos arba repopulate kaulų čiulpų stromą. Būtina aiškiai suprasti, kad GSK nėra pats nesubrendę kaulų čiulpų ląstelės, ir yra kilęs iš pirmtakų, kurie apima dormantnye fibroblastus SB34-neigiamas ląsteles. Buvo nustatyta, kad ląstelės su CD34 fenotipo sugeba patekti į kraujotaką, kur pakeisti savo fenotipą į CD34 +, bet grįžtamoji migracija kaulų čiulpuose prie mikroaplinkos įtakos vėl tapo CD34 neigiamas kamieninių ląstelių elementų. Poilsio metu CD34 ląstelės nereaguoja į parakrino reguliuojančius stromos signalus (augimo faktorius, citokinus). Tačiau, tais atvejais, kuriems reikia amplifikacijos intensyvumo hematopoetinės kamieninės ląstelės su Fenotipiniam CD34 reaguoti į diferenciacijos signalai sudaro abu kraujodaros ir mezenchiminių kamieninių ląstelių. Kraujodaros atliekamas tiesioginio kontakto su GSK korinio elementų kaulų čiulpų stromos pateikti sudėtingą tinklą makrofagų, Tinklinės endotelio ląstelių, osteoblastų, stromos fibroblastų ir išorės matriksą. Kaulų čiulpų stromos sistema - ne tik matrica arba "skeletas" už kraujodaros audinio, ji vykdo bauda reguliavimą kraujodaros Dėl paracrine reguliavimo signalų augimo faktorių, citokinų ir chemokinus, o taip pat suteikia lipnios sąveiką, būtinas kraujo ląstelių formavimasis.

Taigi nuolat atnaujinamas kraujodaros sistemos pagrindas slypi pliuripotencinių (nuo kraujodaros požiūriu) kraujodaros kamieninių ląstelių, galinčių ilgalaikio savęs atnaujinimo. Į padarius pirminius HSCs proceso atlikti diferenciaciją ir clonogenic ląsteles, besiskiriančių cytomorphological ir immunophenotypic charakteristikas. Iš eilės primityvių ir įžeidžiančių progenitorių ląstelių formavimasis užbaigia morfologiškai atpažįstamų protėvių ląstelių susidarymą įvairiose kraujo kūnelių linijose. Vėlesnėje etapai komplekso daugiapakopės proceso rezultatas yra kraujodaros ląstelių ir išeigos subrendęs, kad periferinio kraujo suformuotų elementų brandinimo - eritrocitų, leukocitų, limfocitų ir trombocitų.

[1], [2], [3],

Hematopoetinių kamieninių ląstelių šaltiniai

Kraujodaros kamieninių ląstelių yra laikomi labiausiai studijavo kamieninių šaltinį, kuris yra iš esmės dėl jų naudojimo kaulų čiulpų transplantacijos klinikoje. Iš pirmo žvilgsnio daug žinoma apie šias ląsteles. Tam tikru mastu tai yra tiesa, nes tarpiniai ir brandžios palikuonys GSK - labiausiai prieinamą mobilieji elementai, kurių kiekvienas (eritrocitų, leukocitų, limfocitų, monocitų / makrofagų ir trombocitai) yra kruopščiai studijavo visuose lygmenyse - nuo šviesiai iki elektroninės mikroskopijos, iš biocheminių ir imunofenotypinių savybių prieš identifikavimą pagal PCR analizę. Tačiau monitoringas atliekamas morfologinės, ULTRASTRUKTŪRINIAI, biocheminių, immunophenotypic ir biofizinių rodiklių genomo GSK neduoda atsakymų į daugelį probleminių klausimų, kurio sprendimas yra būtinas ląstelių transplantacijos plėtrai. Jis vis dar nenustatė stabilizavimo mechanizmus GSK ramybės būseną, jie suaktyvėja, įveskite simetriškas ar asimetriškas skyriaus etapą, o svarbiausia - įsipareigojimo gauti išsilavinimą funkciškai skirtingų kraujo ląstelių, eritrocitų, leukocitų, limfocitų ir trombocitų.

Į kaulų čiulpų ląstelėse su CD34 fenotipas, kurios yra iš abiejų mezenchiminių ir kraujodaros kamieninių ląstelių protėviai buvimas iškėlė anksčiausio netoli CD34 neigiamas ląstelių kamieninių ląstelių diferenciacijos ir kraujodaros stromos linija egzistencijos klausimą. Pagal ilgalaikės kultūros metodą buvo gautas vadinamasis ilgalaikis kultūros inicijavimo ląstelė (LTC-IC). Tokių kamieninių ląstelių kolonijas sudarančių veiklą kaulų čiulpų stromos paremtos augimo veiksnių gyvenimo yra daugiau nei 5 savaites, o gyvybingumo atsidavusių kolonijas sudarančių vienetų (KSV) į tik 3 savaites kultūrą. Šiuo metu manoma, kad LTC IC - funkcionalus analoginis GCW kaip repopulyatsionnom aukšto potencialo apie 20% LTC-IC būdingas fenotipas CD34 + CD38- ir eksponuoti didelį gebėjimą savarankiškai atnaujinti. Rasti žmogaus kaulų čiulpų su 1:50 000. Tačiau tokiu dažnumu, ląstelės, ji turėtų būti pripažinta limfoidoinitsiiruyuschie nemieloidinėms ląstelėms arčiausiai SSK kurios gautos sąlygomis ilgą laiką (15 savaičių) kultūrą. Tokios ląstelės yra priskiriamas ct, tarp žmogaus kaulų čiulpų ląstelių randama 10 kartų mažiau nei LTC-IC, ir yra suformuotas kaip mieloidinių ląstelių linijų ir limfoidinio hemopoetinio stiebo.

Nors hematopoetinių kamieninių ląstelių ženklinimas kartu su monokloniniais antikūnais, po identifikavimo immunophenotypic yra pagrindinis, identifikavimo būdas, ir selektyvus rūšiavimas kraujodaros kamieninių ląstelių su potencialaus kliniškai naudojant skirtoje GSK taip ribotą. Blokuoja CD34 receptorių antikūnų arba kitų žymenų antigenų, rūšiavimo imunoteigiamų neišvengiamai metu keičia ląstelių išskirtų su juo savybes. Labiau tinka imuninės neigiamos HSC sekcijos magnetinėse kolonėlėse. Tačiau šiuo atveju paprastai rūšiuoti naudojami monokloniniai antikūnai, tvirtinami ant metalinio nešiklio. Be to, svarbu, kad abiejų HSC izoliavimo metodai būtų pagrįsti fenotipiniais, o ne funkciniais požymiais. Todėl daugelis mokslininkų linkę pasinaudoti clonogenic parametrų GSK, kuri leidžia dydį ir sudėtį kolonijų nustatyti brandos ir krypties diferenciacijos kamieninių ląstelių lygio analizę. Yra žinoma, kad ląstelių skaičius ir jų tipų skaičius kolonijoje mažėja. Kraujodaros kamieninių ląstelių ir jos dukra ląstelių anksti, vadinamas "granulocitų-eritrocitų monocitų-megakariotsitokolonieobrazuyuschaya vienetas" (SFU-GEMM), kurti kultūrą multilinear dideles kolonijas, kurių sudėtyje yra, atitinkamai, granulocitų, eritrocitų, monocitų ir megakariocitai. Yra žemiau linijos granulocitų-Lineage įsipareigojimas monotsitokolonieobrazuyuschaya vieneto (SFU-GM) generuoja kolonijų granulocitų ir makrofagų ir granuliocitų kolonijas sudarančių vienetų skaičius (SFU-G) - tik mažų kolonijų brandžių granulocitų. Anksti eritrocitų pirmtakas - burstoobrazuyuschaya vienetas raudonųjų kraujo ląstelių (SFU-E) - yra didelio bei daugiau brandaus raudonųjų kraujo ląstelių kolonijas sudarančių vienetą (SFU-E) šaltinis - mažų raudonų kraujo ląstelių kolonijų. Bendroje populiacijoje, su ląstelių augimo pusiau kieta medžiaga terpės gali nustatyti ląstelių, kurios sudaro šešių tipų mieloidinių kolonijų: SFU-GEMM, GM-SFU, SFU-G, M-SFU, VFU-E ir E-SFU).

Tačiau, be hematopoetinių darinių, bet kokioje šalutinėje HSC atskyrimo medžiagoje yra daug nė vieno kartu vartojamo ląstelių. Todėl būtina atlikti išankstinį transplantacijos, visų pirma donoro imuninės sistemos ląstelių, valymą. Paprastai naudojami šio immunoselection remiantis konkrečių antigenų ekspresijos pagal limfocitų, kuri leidžia jiems būti izoliuotas, o pašalinti naudojant monokloninius antikūnus. Be to, technika immunorozetochnaya, T-limfocitų išeikvoti kaulų čiulpų transplantacijos, kuri yra pagrįsta dėl kompleksų CD4 + limfocitų ir specifinių monokloninių antikūnų susidarymo efektyviai pašalinti naudojant aferezės. Ši technika suteikia išgrynintą ląstelių medžiagą, kurioje yra 40-60% hematopoetinių kamieninių ląstelių.

Kamienines ląsteles skaičių didėja dėl brandžių kraujo ląstelių pašalinimas iš leukaferezės produkto yra pasiekti priešpriešinės srovės centrifuguojant, po to filtruojant (atsižvelgiant į chelatoriaus buvimą - trinatrio citrato) per kolonėlę, kurių sudėtyje yra nailono pluošto, padengtus "žmogaus imunoglobulinu. Nuoseklusis naudoti šiuos du metodus suteikia pilną valymą skiepų nuo trombocitų iki 89% - iš eritrocitų ir 91% - nuo leukocitų. Dėl didelių HSC nuostolių sumažėjimo, CD34 + ląstelių kiekis bendroje ląstelių masėje gali būti padidintas iki 50%.

Išskirtų hematopoetinių kamieninių ląstelių funkcinėms charakteristikoms naudojamas jų gebėjimas kurti brandžių kraujo elementų kolonijas kultūroje. Formuluotų kolonijų analizė leidžia identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti progenitorių ląsteles, jų prievartos laipsnį ir nustatyti jų diferencijavimo kryptį. Clonogenic aktyvumas nustatomas į pusiau kieto laikmenų, metilceliuliozė, agaras, kraujo plazmoje arba fibrino geliai, ląstelių migracija veiklos sumažinti, užkirsti kelią jų prisirišimą prie stiklo arba plastiko paviršiaus. Esant optimalioms kultūros sąlygoms, vienos ląstelės klonai vystosi per 7-18 dienų. Jei klone yra mažiau nei 50 ląstelių, jis yra identifikuojamas kaip vienas klasteris, jei ląstelių skaičius viršija 50 - kaip kolonija. Atsižvelgiama į ląstelių, galinčių sudaryti koloniją (kolonijas sudarančių vienetų - CFU arba kolonijas sudarančių ląstelių - COC), skaičių. Reikia pažymėti, kad parametrai ir KSV COC neatitinka į SSK skaičiaus ląstelių suspensijos, nors ir yra susijęs su, kad dar kartą pabrėžia, kad reikia identifikuoti funkcinis (kolonijas sudarančių) aktyvumą HSCs in vitro.

Tarp kaulų čiulpų ląstelių hematopoetinės kamieninės ląstelės turi didžiausią proliferacinį potencialą, dėl kurio kultūra formuoja didžiausias kolonijas. Pagal tokių kolonijų skaičių siūloma netiesiogiai nustatyti kamieninių ląstelių skaičių. Po to, kai kolonijų susidarymo in vitro didesnis kaip 0,5 mm skersmens ir su ląstelių skaičius 1000, autoriai išbandyti šių ląstelių stabilumą subletališkumo dozes 5-fluorouracilo ir ištirti jų gebėjimą repopulate kaulų čiulpus Zabójczo apšvitintiems gyvūnus. Pagal šiuos parametrus izoliuotos ląstelės labai nesiskyrė nuo HSC ir gavo sutrumpinimo simbolį HPP-CFC - kolonijas formuojančias ląsteles su dideliu proliferaciniu potencialu.

Toliau tęsiama galimybė atlikti kokybiškesnę hematopoetinių kamieninių ląstelių atranką. Tačiau, kraujodaros kamieninės ląstelės yra morfologiškai panašus į limfocitų ir palyginti vienodas kolekcija ląstelių beveik apvalios branduolių, chromatino ir kietųjų slabobazofilnoy nedideliu kiekiu citoplazmoje. Tikslą skaičių taip pat sunku nustatyti. Manoma, kad GSK žmogaus kaulų čiulpuose įvyksta su dažniu 1 iš 106 branduolių turinčių ląstelių.

Gematopoetinių kamieninių ląstelių identifikavimas

Siekiant pagerinti kraujodaros kamieninių ląstelių identifikavimo atliekamas vienu metu arba nuosekliai (ant daugiakanalio sorbitano tere) tyrimų membrannosvyazannyh spektro antigenų, kurioje GSK fenotipas CD34 + CD38 turėtų būti derinami su diferenciacijos markerių linijinės stokos, ypač antigenais, imunokompetentinių ląstelių, tokių kaip CD4, ir paviršinio imunoglobulinų glikhorinas.

Beveik visos hematopoetinių kamieninių ląstelių fenotipavimo schemos apima CD34 antigeno nustatymą. Tai glikoproteinas, kurio molekulinė masė yra apie 110 kDa, vykdantys keletas glikozilinimo vietos, išreiškiant plazmos ląstelių membranos po aktyvinimo geno lokalizuota chromosomoje 1. CD34 molekulės funkcija yra susijusi su ankstyvųjų hematopoetinių prekursorių ląstelių sąveika su L-selektinų tarpine sąveika su kaulų čiulpų stromos baze. Tačiau reikėtų nepamiršti, kad CD34 antigeno buvimą ląstelės paviršiaus leidžia tik atlikti preliminarų vertinimą GSK turinio ląstelių suspensijos, nes ji yra išreikšta, ir kiti kraujodaros kamieninių ląstelių ir kaulų čiulpų stromos ląstelės ir endotelio ląstelių.

Klasifikuojant hematopoetines progenitorines ląsteles, CD34 ekspresija nuolat mažėja. Eritrocitai, granulocitai ir monocitų komplikuotos progenitorinės ląstelės silpnai ekspresuoja CD34 antigeną arba visai nėra jų paviršiuje (fenotype CD34). Diferencijuotų kaulų čiulpų ir brandžių kraujo kūnelių ląstelių membranoje CD34 antigenas nenustatytas.

Reikia pažymėti, kad per nuo kraujodaros kamieninių ląstelių diferenciacijos dinamika ne tik sumažina ekspresijos lygį CD34, bet lygiagrečiai palaipsniui didinamas išraiška CD38 antigeno - sudėtinė membranos glikoproteino su molekuline mase 46 kDa, turinčio NAD-glikogidrolaznoy ir ADP-ribozilas ciklazės aktyvumą, tai rodo, savo dalyvavimą transportuojant ir sintezuojant ADP-ribose. Taigi, tai yra įmanoma, dukart patikrinti įsipareigojimu kraujodaros kamieninių ląstelių laipsnį. Ląstelių populiacijos su fenotipo CD34 + CD38 +, iš 90-99% CD34-teigiamas kaulų čiulpų ląstelių apima kamieninės ląstelės, turinčios nedidelę proliferacinio ir diferenciacijos, kadangi su fenotipo CD34 + CD38 ląstelės gali reikalauti vaidmenį GSK.

Iš tiesų, kaulų čiulpų ląstelių populiacija, aprašyta formule CD34 + CD38-, yra santykinai daug primityvių kamieninių ląstelių, galinčių atskirti į mieloidinių ir limfoidinio linijų. Atsižvelgiant į ilgalaikio auginimo kontekste su CD34 + CD38- ląstelių fenotipo pavyks gauti visas brandus kraujo ląstelių: neutrofilai, eozinofilų, bazofilų, monocitų, megakariocitai, eritrocitų ir limfocitus.

Palyginti neseniai konstatavo, kad CD34 teigiamų ląstelių išreikšti daugiau du žymeklį - AC133 ir CD90 (Thy-1), kuris taip pat naudojamas siekiant nustatyti kraujodaros kamieninių ląstelių. Thy-1 antigenas yra bendrai išreiškiamas receptoriaus CD117 (c-Kit) dėl CD34 + ląstelių kaulų čiulpuose, smegenų ir periferinio kraujo. Tai fosfatidilinozitolsvyazyvayuschy paviršiaus glikoproteino, kurio molekulinė masė 25-35 kDa, kad yra įtrauktas į ląstelių adhezijos procesams. Kai kurie autoriai mano, kad Tavo-1 antigenas yra žymeklis labiausiai nesubrendusių CD34 teigiamų ląstelių. Pakartoti ląsteles su CD34 + Thy-1 + sukelti ilgalaikių išaugintų linijų, kad sudarytų dukterinėms ląstelėms fenotipo. Manoma, kad antigenas Thy-1 blokuoja reguliavimo signalus, kurie sukelia ląstelių dalijimąsi. Nepaisant to, kad CD34 + TU1 + ląstelių yra pajėgi savarankiškai atnaujinti ir ilgalaikių išaugintų linijų kūrimą, jų fenotipas gali būti susiję tik su SSK, tavo-1 + turinys viso svorio CD34 teigiamų ląstelių elementų yra apie 50%, kiek viršija hematopoetinių ląstelių skaičius.

Labiau perspektyvus identifikuoti hematopoetines kamienines ląsteles yra AC133, hematopoetinių progenitorinių ląstelių antigeno žymeklis, kurio išraiška pirmą kartą buvo aptiktos embrioninėse kepenų ląstelėse. AC133 yra transmembraninis glikoproteinas, kuris pasirodo ant ląstelės membranos paviršiaus ankstyviausiose GSK brandinimo stadijose - tai įmanoma, kad dar anksčiau nei antigenas CD34. A. Petrenko ir V. Grishchenko (2003) tyrimuose nustatyta, kad AC133 ekspresuoja iki 30% embrioninių kepenų CD34 teigiamų ląstelių.

Tokiu būdu, idealus fenotipo profilis kraujodaros kamieninių ląstelių šiandien sąvokas, ląstelių kontūro suma, į grandinėmis, kurios turi būti CD34 antigenus konfigūracijos, AC133 ir Thy-1, bet yra ne vieta molekulinės projekcijos CD38, HLA-DR ir žymekliai linijinis diferenciacija VPS , CD3, CD4, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20 ir.

GSK fenotipo variacijos portretas gali būti CD34 + CD45RalowCD71low derinys, nes aprašytų šios formulės ląstelių savybės nesiskiria nuo funkcinių parametrų ląstelių fenotipo su CD34 + CD38. Be to, žmogaus SAK galima atpažinti pagal fenotipų ženklai CD34 + Thy-L + CD38Iow / "c-KIT / žemo - tik 30 iš šių ląstelių visiškai atkurti kraujodaros ir mirtinai apšvitinto pelėmis.

Iš analizės bendrųjų fenotipo savybes kaulų čiulpų ląstelių tikrųjų prasidėjo 40 metų intensyvių tyrimų GSK vienu metu galinti tiek savarankiškai atnaujinti ir diferenciacijos į kitų ląstelinių elementų, leidžiantis pateisinti kaulų čiulpų transplantacijos naudoti gydyti įvairias patologijas į hemopoetinio sistema. Neseniai atrasti nauji kamieninių ląstelių tipai dar nėra plačiai naudojami klinikinėje praktikoje. Tačiau kamieninių ląstelių iš virkštelės (virkštelės) kraujo ir vaisiaus kepenyse gali gerokai išplėsti ląstelių transplantacija ne tik Hematologijos, bet ir kitose medicinos srityse, taip skiriasi nuo HSC kaulų čiulpų kaip kiekybinių veiklos ir kokybės charakteristikomis.

Tūris kraujodaros kamieninių ląstelių transplantacijos masę, reikalingą, paprastai yra gaunami iš kaulų čiulpų, periferinio kraujo ir smegenų, taip pat embriono kepenyse. Be to, hematopoetinių kamieninių ląstelių galima gauti in vitro dauginimo ESC ir jų vėlesnį diferenciacija į hematopoetinę tikslinių ląstelių elementus. A. Petrenko, V. Grishchenko (2003) teisingai pažymi, reikšmingų skirtumų imuninę savybes ir gebėjimą atkurti kraujodaros GSK skirtingą kilmę, atsižvelgiant į nevienodą santykį, esančios jų šaltinių pliuripotencinių pradžioje ir vėliau atsidavusių protėvių. Be to, hematopoetinių kamieninių ląstelių, gautų iš įvairių šaltinių kamieno, besiskiriantis tuo, kiekybiškai ir kokybiškai labai skirtingi asociacijos ne-hematopoetinių ląstelių.

Tradicinis hemopoetinių kamieninių ląstelių šaltinis yra kaulų čiulpai. Kaulų čiulpų ląstelių suspensija gaunama iš pilvo kaulo ar krūtinkaulio, išplaunant vietine anestezija. Tokiu būdu gautas suspensija yra nevienalytis ir apima HSC, stromos ląstelių elementų mišinį, pažeistų mieloidinių ir limfinių linijų progenitorių ląsteles, taip pat brandžius kraujo elementus. Ląstelių skaičius su CD34 + ir CD34 + CD38 fenotipais tarp kaulų čiulpų mononuklearinių ląstelių yra nuo 0,5 iki 3,6 ir atitinkamai nuo 0 iki 0,5%. Periferinis kraujas po G-CSF sukeltos HSC mobilizacijos turi 0,4-1,6% CD34 + ir 0-0,4% CD34 + CD38.

Aukštesnis procentas ląstelių, turinčių CD34 + CD38 ir CD34 + imunoprofilį smegenų kraujo - ir 0-0.6 OD-2,6%, ir maksimalaus skaičiaus yra nustatyta tarp kraujodaros vaisiaus kepenų ląstelių - ir 2,3 0,2-12,5 -35,8%, atitinkamai.

Tačiau, transplantato medžiagos kokybė priklauso ne tik nuo sumos jame esančią CD34 + ląstelių, bet taip pat jų funkcinio aktyvumo, kuri gali būti nustatyta pagal kolonijas sudarančių vienetų formavimo lygiu in vivo (čiulpų populiacijos atkūrimas į Zabójczo apšvitintų gyvūnų) ir in vitro - augimo kolonijų dėl pusiau kieta medžiaga laikmenų . Buvo nustatyta, kad kolonijas sudarančių ir proliferacinis aktyvumas hemopoetinio kamieninių ląstelių su fenotipo CD34 + CD38 HLA-DR, išskirtos iš vaisiaus kepenų, vaisiaus kaulų čiulpų ir smegenų kraujo, ir gerokai viršija proliferacinį pajėgumą kraujodaros kolonijas sudarančių ląstelių kaulų čiulpuose ir periferiniame kraujyje suaugusiųjų. Kiekybinė ir kokybinė analizė GSK skirtingos kilmės atskleidė didelius skirtumus jų santykinio kiekio ląstelių suspensijos, ir funkcionalumo. Didžiausias skaičius CD34 + ląstelių (24,6%) negu skiepų medžiagomis, gautomis iš vaisiaus kaulų čiulpuose. Suaugusio žmogaus kaulų čiulpai turi 2,1% CD34 teigiamų ląstelių elementų. Tarp Monobranduolio ląstelių žmogaus suaugusiųjų periferiniame kraujyje tik 0,5% turėti fenotipas CD34 +, kadangi laidas kraujo jų suma pasiekia 2%. Tokiu būdu kolonijas sudarančių gebėjimas CD34 + ląstelių vaisiaus kaulų čiulpų 2,7 karto viršija klonų augimo kraujodaros kaulų čiulpų suaugusių žmogaus ląstelių ir bambagyslės kraujo ląstelių formą žymiai didesnis kolonijas nei kraujodaros elementų, išskirtų iš periferinio kraujo suaugusiųjų Talpa: 65,5 iki 40 ir , 8 kolonijos / 105 ląstelių.

Skirtumai proliferacinės veiklos ir kolonijas sudarančių gebėjimo hematopoetinę kamieninių ląstelių yra susijęs ne tik su įvairaus brandos, bet taip pat su jų natūralaus mikroaplinka. Ji yra žinoma, kad proliferaciją ir diferenciaciją kamieninių ląstelių intensyvumas greičiu, nustatytu integruotu reguliavimo įtakos kelių komponento sistemoje augimo faktoriais ir citokinais, kad yra pagamintos abiejų kamieninių ląstelių ir korinio ryšio elementų matricos-stromos mikroaplinka. Naudojant išgrynintą ląstelių populiacijas ir serumo neturinčioje laikmeną naudodami siekiant ląstelių kultūroje, suteikiantį besiskiriantis tuo, kad augimo faktorius stimuliuoti ir slopinamąjį poveikį kamieninių ląstelių įvairiuose lygiuose, kamieninių ląstelių ir ląstelių iš padarytus tam tikroje linijinio kryptimi. Šių tyrimų rezultatai rodo, kad HSCs, gautos iš šaltinių su įvairių lygių ontogenetycznego vystymosi, skiriasi tiek fenotipiškai ir funkciškai. GSK atveju, esant ankstesniems ontogenezės stadijoms, būdingas didelis savirealizacijos ir didelės proliferacinės veiklos potencialas. Šios ląstelės yra daugiau telomero ilgis ir atlikti Lineage įsipareigojimą su kraujodaros ląstelių linijų formavimas. Imuninės sistemos reakcija į HSC embrioninę kilmę yra atidėta, nes tokios ląstelės švelniai išreiškia HLA molekules. Yra aišku, gradacija santykinio kiekio HSCs ir jų gebėjimas savarankiškai atnaujinti ir eilučių skaičių jie sudaro tipų įsipareigojimas: CD34 + ląstelių vaisiaus kepenyse> CD34 + ląstelių virkštelės kraujo> CD34 + ląstelių kaulų čiulpuose. Ji yra svarbu, kad tokie skirtumai nėra unikalus gimdyminėms ir neo postanatalnomu ankstyvojo laikotarpio žmogaus vystymosi, bet taip pat visoje ontogenezy - proliferacinių ir kolonijas sudarančių aktyvumas HSCs kilęs iš kaulų čiulpuose ir periferiniame kraujyje suaugusiųjų, atvirkščiai proporcingas donoro amžiaus.