Kraujo tyrimas dėl vėžinių ląstelių buvimo organizme: pavadinimas, kaip jį atlikti

Šiandien medicina vis dažniau susiduria su onkologinėmis ligomis. Nepaisant didelio vėžinių navikų paplitimo, jų susidarymo ir plitimo mechanizmas lieka neištirtas. Onkologinių ligų plitimas vyksta neįtikėtinu greičiu. Dažniausiai šiomis ligomis serga pensinio amžiaus žmonės. Tačiau jei anksčiau ši liga buvo laikoma daugiausia vyresniosios kartos liga, tai šiandien pastebima tendencija, kad ji jaunėja. Jauni žmonės, paaugliai ir net maži vaikai yra jautrūs šiai ligai. Pavojus tas, kad vėžiniai navikai gali pažeisti absoliučiai bet kurį organą. Jie auga, ir tam tikru momentu ląstelė atsiskiria, patenka į kitą audinį ir prisitvirtina. Dėl to susidaro naujas navikas (metastazės). Navikų vystymosi ir metastazių susidarymo galima išvengti, jei navikas laiku aptinkamas ir imamasi reikiamų priemonių. Vėžio ląstelių analizė atlieka pagrindinį vaidmenį ankstyvoje piktybinių navikų diagnostikoje.

Tyrimai leidžia aptikti naviką, jį diagnozuoti ir, svarbiausia, laiku reaguoti. Ankstyvosiose stadijose vystymosi dar galima išvengti. Tačiau dažniausiai navikai aptinkami vėlyvose stadijose, kai pacientui dažnai nebeįmanoma padėti. Diagnozės sunkumas yra tas, kad ankstyvosiose stadijose navikas vystosi beveik besimptomiai ir jį galima nustatyti tik profilaktinio tyrimo metu arba laboratorinių tyrimų metu.

Kokie tyrimai atliekami vėžio ląstelėms nustatyti?

Atliekant vėžio tyrimą, atliekamas bendras objektyvus tyrimas, naudojant įvairius instrumentinius metodus, taip pat naudojami laboratoriniai tyrimai. Pirmiausia pacientui skiriami standartiniai klinikiniai tyrimai. Iš jų galima susidaryti bendrą vaizdą apie organizme vykstančius procesus. Piktybinius navikus netiesiogiai gali rodyti padidėjęs leukocitų skaičius, taip pat padidėjęs ESR. Tačiau šios informacijos nepakanka, nes sergant bet kokia liga, infekciniu ar uždegiminiu procesu šie rodikliai taip pat padidėja. Vėžį taip pat gali rodyti staigus hemoglobino sumažėjimas, ypač jei palyginate rodiklius dinamikoje. Jei nustatomi tokie požymiai, skiriamas specialus tyrimas, skirtas vėžio ląstelėms aptikti.

Atliekamas išsamus kraujo tyrimas, kurio metu nustatomi specifiniai onkologiniai žymenys. Šie žymenys susidaro nedelsiant, dar naviko formavimosi stadijoje. Todėl jie leidžia identifikuoti transformuotas ląsteles ir vėžinius navikus pradinėse jų formavimosi stadijose.

Diagnostinio metodo principas yra tas, kad specialios tyrimų sistemos aptinka kraujyje esančius naviko žymenis, kuriuos gamina vėžiniai navikai. Kuo sunkesnė ligos stadija, tuo didesnė jų koncentracija kraujyje. Sveiko žmogaus organizmas naviko žymenų negamina. Taigi, jų buvimas yra tiesioginis vėžinio naviko patvirtinimas. Remiantis rezultatais galima spręsti apie naviko dydį, tipą ir lokalizaciją.

Procedūros nuorodos vėžinių ląstelių analizei

Vėžinių ląstelių tyrimas atliekamas įtarus vėžį, taip pat profilaktiniais tikslais, siekiant anksti diagnozuoti vėžinius navikus. Tyrimą periodiškai turėtų atlikti ir vyresni nei 50 metų asmenys, taip pat tie, kurie patenka į vėžinių navikų išsivystymo rizikos grupę. Tyrimas atliekamas aptikus naviką, kurio pobūdis neaiškus. Tai leidžia nustatyti, ar navikas yra gerybinis, ar piktybinis. Tyrimas taip pat atliekamas siekiant stebėti vėžiu sergančių pacientų rezultatų dinamiką, patikrinti gydymo veiksmingumą.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Paruošimas

Navikų žymenų tyrimui nereikia specialaus pasiruošimo. Tereikia gauti gydytojo siuntimą. Tuomet 2–3 dienas prieš tyrimą laikykitės lengvos dietos (negerkite alkoholio, aštraus, riebaus, rūkyto maisto, prieskonių). Analizę reikia atlikti tuščiu skrandžiu. Paskutinis valgis turėtų būti 8 valandos prieš tyrimą. Ryte negalima gerti ir rūkyti. Kelias dienas neperkraukite organizmo ir venkite fizinio darbo.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Technika vėžinių ląstelių analizei

Yra daug metodų. Viskas priklauso nuo tyrimo tipo. Jei atliekamas kraujo tyrimas naviko žymenims nustatyti, jis atliekamas naudojant fermentinius imunofermentinius metodus. Šis metodas pagrįstas agliutinacijos reakcija, kurios metu naviko žymuo veikia kaip organizmui svetimkūnis (antigenas). Imuninė sistema nedelsdama į jį reaguoja, gamindama antikūną. Antikūnų veikimas yra nukreiptas į svetimkūnio sunaikinimą ir vėlesnį jo pašalinimą. Antikūnas suranda antigeną, kuris yra vėžio naviko žymuo, jį atakuoja ir skatina sunaikinimą. Šios kovos metu antigenas ir antikūnas susilieja, įvyksta agliutinacijos reakcija. Šie kompleksai aptinkami analizės metu, kai į kraują įvedami antikūnai.

Tam paimamas reikiamas paciento kraujo kiekis. Siekiant išvengti krešėjimo, įlašinama keli lašai heparino. Tada kraujas pristatomas į laboratoriją. Ten kraujas padalijamas į frakcijas. Kraujo serumas išskiriamas atskirai, nes serume randami naviko žymekliai. Tam naudojamas centrifugavimas. Naudojant specialų prietaisą – centrifugą, kraujas mėgintuvėlyje sukamas dideliu greičiu. Dėl to visi susidarę kraujo elementai nusėda dugne, mėgintuvėlyje lieka tik serumas. Su juo atliekamos tolesnės manipuliacijos.

Paimamas specialus analizės rinkinys (ELISA), į ląstelės dugną įpilama tam tikras kiekis kraujo serumo. Įpilamas specialus antikūnas prieš vėžinį naviką. Jie laukia kelias valandas. Jei įvyksta kompleksacijos reakcija, kurios metu antikūnai ir antigenai susilieja, kraujyje yra antigeno, kuris veikia kaip onkomarkeris, rodantis vėžinio naviko buvimą. Antigeno ir antikūno kompleksų susidarymą galima matyti plika akimi, nes mėgintuvėlyje atsiranda drumstumas ir dribsnių pavidalo nuosėdos. Pagal drumstumo laipsnį galima spręsti apie onkomarkerių skaičių. Tačiau rezultatų tikslumui atliekami specialūs matavimai. Naudojamas tarptautinis drumstumo standartas arba spektrofotometras, kuris, remdamasis pro tirpalą praeinančios šviesos lūžio kampu, nustato jo koncentraciją ir duoda paruoštą rezultatą.

Yra ir kitas metodas – imunomagnetinė kraujo frakcijų diferenciacija. Tam naudojamas specialus prietaisas, leidžiantis aptikti vėžio ląsteles, nustatant naviko žymenis, kurie prisitvirtina prie pakitusios ląstelės ir tampa matomi magnetiniame lauke. Šio metodo tikslumas yra gana didelis – net iš milijono sveikų ląstelių galima aptikti vieną vėžio ląstelę.

Taip pat, atlikus tokias analizes, galima nustatyti tikslų vėžio ląstelių skaičių, jų plitimo greitį ir numatyti augimo dinamiką. Šių analizių privalumas yra tas, kad jos leidžia stebėti gydymo eigą, nustatyti terapijos veiksmingumą, taip pat labai tiksliai parinkti vaistus ir jų optimalią dozę. Dozavimo tikslumas gydymo metu vaidina pagrindinį vaidmenį, nes tai leidžia veiksmingai kovoti su komplikacijomis, sumažinti vėžio ląstelių skaičių ir užkirsti kelią metastazių vystymuisi. Be to, tokia teisinga dozė sumažina toksinį vaistų poveikį organizmui.

Taip pat yra biopsijos tyrimo metodas, kurio metu paimamas audinio gabalėlis tyrimui. Tada atliekamas citologinis ir histologinis tyrimas. Citologinė analizė apima mikropreparato paruošimą iš gauto audinio mėginio tolesniam jo savybių tyrimui mikroskopu. Tiriamos pagrindinės morfologinės ir anatominės savybės. Sveiko audinio mėginio mikropreparatas smarkiai skiriasi nuo vėžinio naviko. Yra tam tikrų skirtumų struktūroje, išvaizdoje ir vykstančiuose tarpląsteliniuose procesuose. Ypatingi intarpai taip pat gali rodyti vėžinį naviką.

Histologinio tyrimo metu audinys pasėjamas ant specialios audinių kultūros auginimui skirtos maistinės terpės. Sėjama specialiomis sąlygomis 7 dienas, po to stebimas naviko augimo pobūdis, greitis ir kryptis. Tai turi svarbią diagnostinę reikšmę.

Kraujo tyrimas dėl vėžio navikų

Greičiausias būdas nustatyti onkologinę ligą yra atlikti kraujo tyrimą. Toks tyrimas atliekamas per 1-2 dienas, o prireikus skubius rezultatus galima gauti per 3-4 valandas. Tai yra greitasis metodas, kuriam vis dar reikia papildomų patikslinančių tyrimų. Tačiau to visiškai pakanka, kad būtų gauta preliminari diagnozė ir tiksliai nustatytas navikas. Analizė leidžia nustatyti net tikslią naviko vietą ir onkologinio proceso stadiją.

Paciento kraujas naudojamas kaip tiriamoji medžiaga. Analizė atliekama ryte, tuščiu skrandžiu. Ji daugiausia naudojama diagnozei patvirtinti arba paneigti ir leidžia atskirti gerybinį naviką nuo piktybinio. Ji taip pat naudojama dinaminiam rodiklių stebėjimui, siekiant nustatyti gydymo veiksmingumą, stebėti naviko būklę ir užkirsti kelią recidyvams.

Metodo principas – nustatyti pagrindinius antigenus, kuriuos gamina vėžio ląstelės naviko vystymosi metu. Jei jie aptinkami, galima užtikrintai teigti, kad žmogus serga vėžiu. Tačiau jei tokių naviko žymenų neaptinkama, neigiamas rezultatas neduodamas. Tokiu atveju skiriami papildomi tyrimai.

Naviko lokalizaciją galima nustatyti pagal naviko žymeklio tipą. Jei paciento kraujyje aptinkamas CA19-9 antigenas, tai gali rodyti kasos vėžį. CEA žymuo rodo naviko lokalizaciją žarnyne, kepenyse, inkstuose, plaučiuose ir kituose vidaus organuose. Jei aptinkamas CA-125, tai rodo onkologinį procesą kiaušidėse arba jų galūnėse. PSA ir CA-15-3 žymenys atitinkamai rodo prostatos ir krūties vėžį. CA72-3 rodo skrandžio ir plaučių vėžį, B-2-MG – leukemiją, leukemiją, mielomą. AKF pasireiškia esant kepenų vėžiui ir metastazėms. Kraujo tyrimas nėra vienintelis veiksnys, patvirtinantis metodą. Jis turėtų būti naudojamas kartu su daugeliu kitų veiksnių.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ]

Gimdos kaklelio vėžio ląstelių tyrimas

Gimdos kaklelio vėžio ląsteles galima nustatyti atliekant kraujo tyrimą, kuriuo siekiama nustatyti onkožymenį. Paprastai tokiais atvejais nustatomas CEA arba karcinoembrioninis antigenas. Tyrimui taip pat imamas tepinėlis iš makšties ir gimdos kaklelio. Pirmiausia atliekamas preliminarus citologinis tyrimas. Citologinės analizės metu galima aptikti transformuotas ląsteles ir specifinius intarpus, rodančius onkologinius procesus.

Po to, jei reikia, atliekama biopsija, kurios metu paimamas audinio gabalėlis tyrimui. Jis pasėjamas ant maistinių medžiagų, inkubuojamas, po to tiriamos pagrindinės morfologinės ir biocheminės savybės. Remiantis gautais duomenimis, daroma išvada apie naviko pobūdį, jo išsivystymo laipsnį ir vėžio ląstelių koncentraciją.

[ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Karcinoembrioninio antigeno testas

Tai antigenas, naudojamas skrandžio, žarnyno, tiesiosios žarnos, moters reprodukcinių organų ir pieno liaukų vėžiui diagnozuoti ir gydyti. Suaugusiesiems jis nedideliais kiekiais gaminamas bronchuose ir plaučiuose, taip pat randamas daugelyje biologinių skysčių ir sekretų. Jo kiekis, kuris onkologijoje smarkiai padidėja, yra indikatorius. Reikėtų atsižvelgti į tai, kad jo kiekis taip pat gali būti padidėjęs žmonėms, sergantiems autoimuninėmis ligomis, tuberkulioze, gerybiniais navikais ir net rūkantiems. Todėl didelės šių žymenų koncentracijos (20 ng/ml ir daugiau) nustatymas yra tik netiesioginis vėžio patvirtinimas ir būtina atlikti keletą papildomų tyrimų. Šį rodiklį taip pat reikėtų dinamiškai stebėti, kad būtų galima padaryti išsamias išvadas. Tyrimo medžiaga yra veninis kraujas. Antigenas aptinkamas kraujo serume.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ]

Vėžinių ląstelių mutacijų analizė

Epidermio augimo faktoriaus receptorius yra transmembraninis receptorius, kuris sąveikauja su epidermio augimo faktorių ekstraląsteliniais ligandais. Jis dalyvauja daugelio organų vėžinių navikų formavimesi, ypač tai yra patikimas plaučių vėžio požymis. Reikalas tas, kad paprastai pagrindiniai genai yra skirti užtikrinti kūno ląstelių augimo ir dauginimosi kontrolę. Ląstelės auga, dauginasi iki tam tikros ribos, po kurios genas duoda signalą sustabdyti tolesnę dauginimąsi, ir ląstelės nustoja dalytis.

Šis genas taip pat kontroliuoja apoptozės procesą – savalaikę senų, pasenusių ląstelių mirtį. Kai genuose yra mutacijų, jie nustoja kontroliuoti dauginimąsi (proliferaciją) ir mirtį (apoptozę) ir duoda signalą nuolatiniam augimui, dėl ko ląstelės auga neribotai ir nuolat, nekontroliuojamai dalijasi. Tai veda prie vėžinio naviko, kuriam būdingas gebėjimas augti neribotai, susidarymo. Pačia primityviausia forma vėžį galima įsivaizduoti kaip nekontroliuojamą ląstelės dalijimąsi ir nemirtingumą. Šis procesas taip pat laikomas ląstelės nesugebėjimu laiku mirti.

Chemoterapija ir įvairūs priešvėžiniai vaistai yra skirti būtent šio geno sunaikinimui ir inaktyvavimui. Jei jo aktyvumą galima slopinti, galima sustabdyti vėžio vystymąsi. Tačiau per daugelį metų gydant tokiais tiksliniais vaistais, genas, kaip ir bet kuris organizmas, prisitaikė ir tapo atsparus daugeliui vaistų.

Po to vaistai buvo patobulinti, pakeista jų formulė, jie vėl tapo aktyvūs šio geno atžvilgiu. Tačiau ir pats genas buvo patobulintas: jis taip pat mutavo pakartotinai, kiekvieną kartą išsiugdydamas atsparumą vaistams. Bėgant metams, susikaupė daug šio geno mutacijų tipų, daugiau nei 25. Tai reiškia specifinės terapijos neefektyvumą. Siekiant negaišti laiko beprasmiam gydymui, kuris nebus veiksmingas, atliekama analizė, siekiant nustatyti šio geno mutaciją.

Pavyzdžiui, KRAS geno mutacijų nustatymas rodo, kad plaučių ir gaubtinės žarnos vėžio gydymas tirozino kinazės inhibitoriais bus neveiksmingas. Jei mutacijos aptinkamos ALK ir ROS1 genuose, tai rodo, kad reikia skirti krizotinibą, kuris greitai ir efektyviai slopina šį geną ir neleidžia toliau vystytis navikui. BRAF genas lemia melanomos navikų susidarymą.

Šiandien yra vaistų, kurie gali blokuoti šio geno aktyvumą ir pakeisti jo aplinką neribotam augimui. Dėl to naviko augimas sulėtėja arba visiškai sustoja. Kartu su priešnavikiniais vaistais galima pasiekti reikšmingų gydymo rezultatų, įskaitant naviko dydžio sumažėjimą.

[ 37 ], [ 38 ], [ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ]

Išmatų analizė vėžio ląstelėms nustatyti

Paprastai analizės esmė – aptikti paslėptą kraują išmatose. Šis požymis gali rodyti onkologinio proceso buvimą gaubtinėje arba tiesiojoje žarnoje. Vyresniems nei 45–50 metų žmonėms, kuriems yra didžiausia rizika susirgti vėžiniais navikais, šį tyrimą reikia atlikti kasmet. Tai gali rodyti kitas patologijas, tačiau tada reikalingi papildomi tyrimai diferencinei diagnostikai. Tai ankstyvas diagnostikos metodas, leidžiantis aptikti naviką jo atsiradimo stadijoje ir imtis gydymo priemonių. Dažnai šis metodas gali aptikti net ikivėžinę būklę.

Biopsija vėžio ląstelėms

Tai tyrimas, kuris duoda tiksliausius ir patikimiausius rezultatus. Jis susideda iš dviejų etapų. Pirmajame etape surenkama biologinė medžiaga tolesniam tyrimui. Medžiaga yra audinio gabalėlis, paimtas tiesiai iš organo, kuriame yra navikas. Iš tikrųjų, naudodamas specialią įrangą ir instrumentus, gydytojas nupjauna naviko gabalėlį ir siunčia jį į laboratoriją tolesniam tyrimui. Surinkimas paprastai atliekamas taikant vietinę nejautrą.

Antrajame etape biologinė medžiaga toliau tiriama citologiškai ir histologiškai. Citologinio tyrimo metu paruošiamas mikropreparatas, kuris tiriamas mikroskopu. Remiantis bendru vaizdu, išvaizda ir intarpų pobūdžiu, galima padaryti preliminarią išvadą apie tai, ar navikas yra gerybinis, ar piktybinis. Šis etapas trunka ne ilgiau kaip 30 minučių.

Po to audinys mirkomas ir pasėjamas į specialią maistinę terpę, kurioje yra visos ląstelių augimo sąlygos. Kultūra patalpinama optimaliomis sąlygomis, inkubatoriuje, ir laikoma mėnesį. Tyrimas yra gana ilgas ir priklauso nuo ląstelių augimo greičio. Jei tai vėžinis navikas, jis pradės aktyviai augti. Gerybinis, nevėžinis navikas neauga. Norint paspartinti augimą, galima pridėti augimo faktorių, kurie dar labiau stimuliuoja naviko augimą. Tokiu atveju rezultatus galima gauti per 7–10 dienų.

Išaugęs navikas toliau tiriamas biochemiškai ir mikroskopiškai, o galiausiai diagnozė nustatoma pagal naviko tipą, stadiją, paplitimą ir augimo kryptį. Paprastai tai yra galutinė diagnozė, kuri leidžia gauti 100 % tikslumą.

[ 43 ], [ 44 ], [ 45 ], [ 46 ]

Normalus našumas

Jei atliekama analizė naviko žymenims nustatyti, ją iššifruoti gana lengva. Sergant onkologine liga, organizme aptinkami naviko žymenys. Sveikame organizme naviko žymenų nėra, nes juos gamina tik vėžio ląstelės. Išimtis yra vėžio embrioninis antigenas, kurio organizme paprastai yra minimaliais kiekiais. Nedidelis koncentracijos padidėjimas gali rodyti įvairias somatines patologijas, o tik staigus padidėjimas, viršijantis 20 ng/ml, rodo vėžinio naviko buvimą. Be to, pagal tai, kuris antigenas aptinkamas, galima spręsti apie naviko lokalizaciją. Kiekvienas organas gamina savo tipo žymenis.

Biopsijos rezultatus iššifruoti dar lengviau. Jei maistinėje terpėje stebimas ląstelių augimas, navikas yra piktybinis; jei augimo nėra – gerybinis.

Vėžio ląstelių tyrimo norma

Nėra vienareikšmių rodiklių, apibūdinančių visas vėžio rūšis. Kiekvienas konkretus naviko žymuo turi savo normalias vertes. Be to, jos labai skiriasi priklausomai nuo žmogaus amžiaus ir fiziologinių savybių.

Apskritai galima pateikti šiuos rodiklius:

• 0–1 ng/ml – normalu;
• 1-20 – gerybinis navikas, ikivėžinė būklė, somatinės patologijos;
• 20–30 – vėžinis navikas;
• Daugiau nei 30 – metastazės.

Svarbu prisiminti, kad bet koks navikas, net ir gerybinis, gali išsivystyti į piktybinį. Naviko žymenų nebuvimas ne visada rodo vėžio nebuvimą. Tai yra papildomų tyrimų priežastis.

[ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Analizės prietaisas

Analizei atlikti reikalinga išsami technologinė laboratorinė įranga. Navikų žymenims aptikti reikalingi specialūs fermentinio imunologinio tyrimo rinkiniai, laboratoriniai stikliniai indai, dozatoriai, mikropipetės, centrifuga, inkubatorius, kultivatorius, spektrofotometras arba masių spektrometras optiniam tankiui matuoti ir imunomagnetinis separatorius.

Citologiniam, mikroskopiniam ir histologiniam tyrimui reikalingas didelės skiriamosios gebos mikroskopas. Histologiniam tyrimui reikalinga garinė pirtis, autoklavas, sauso šildymo spinta, termostatas, inkubatorius, eksikatorius, traukos spinta.

Kiek laiko trunka vėžio ląstelių tyrimas?

Naviko žymeklių nustatymas yra greitas metodas, leidžiantis gauti preliminarius rezultatus ir patvirtinti arba paneigti diagnozę. Tai atliekama gana greitai – 1–2 dienas, prireikus galima pagreitinti iki 3–4 valandų.

Patikimiausia ir tiksliausia vėžio ląstelių analizė yra biopsija, leidžianti nustatyti galutinę diagnozę. Tokia analizė atliekama nuo 14 iki 28 dienų (priklausomai nuo ląstelių kultūros augimo greičio). Prireikus ją galima pagreitinti iki 7–10 dienų, sukuriant specialias inkubacijos sąlygas, pridedant augimo faktorių.