Jautrumo antibiotikams tyrimai: paruošimas, iššifravimas, kiek jų atliekama

Šiandien antibiotikų jautrumo tyrimai tampa vis populiaresni. Žmogaus mikroflora yra gana įvairi, ją atstovauja daugybė mikroorganizmų įvairiuose biotopuose.

Farmacijos kompanijos sukūrė daugybę antibakterinių vaistų – antibiotikų, kurie padeda palaikyti normalų mikrobų populiacijų santykį ir skaičių. Prasidėjus antibiotikų erai, daugelis anksčiau mirtinomis laikytų ligų buvo išgydytos. Tačiau mikroorganizmai taip pat stengiasi išgyventi, palaipsniui prisitaikydami prie antibakterinių vaistų veikimo. Laikui bėgant, daugelis jų įgijo atsparumą daugeliui vaistų, jį įtvirtino genotipe ir pradėjo perduoti iš kartos į kartą. Taigi, nauji mikroorganizmai iš pradžių yra nejautrūs tam tikriems vaistams, todėl jų vartojimas gali būti neefektyvus. Vaistininkai kuria vis daugiau naujų produktų, prideda naujų veikliųjų komponentų, keičia pagrindinę formulę. Tačiau pamažu išsivysto ir atsparumas jiems.

Padidėjusio mikrofloros atsparumo daugeliui vaistų ir net jų analogų priežastis dažnai slypi neteisingame ir nekontroliuojamame antibiotikų vartojime. Gydytojai skiria antibiotikus ir jų derinius įvairioms bakterinėms ligoms gydyti. Tuo pačiu metu nėra išankstinio jų veiksmingumo įvertinimo, neparenkama optimali dozė, o tai labai svarbu tiek gydymui, tiek siekiant užkirsti kelią tolesnio atsparumo vystymosi mechanizmams. Daugelis žmonių klaidingai skiria antibakterinį gydymą net ir virusinėms ligoms, kuris yra neveiksmingas, nes antibiotikas neveikia prieš virusus.

Terapija dažnai skiriama neatlikus išankstinio jautrumo tyrimo, neatliekamas veikliosios medžiagos ir reikiamos dozės parinkimas kiekvienai konkrečiai ligai ir biotopui. Kadangi antibiotikai skiriami „aklai“, dažnai pasitaiko atvejų, kai jie nerodo jokio aktyvumo prieš ligą sukėlusius mikroorganizmus, kurių skaičių reikia sumažinti. Vietoj to, jie veikia kitus mikrofloros atstovus, sukeldami disbakteriozę, kuri taip pat yra gana pavojinga patologija ir gali sukelti rimtų pasekmių. Ypač pavojingi atvejai, kai antibiotikas sunaikina normalią mikroflorą, kuri skirta apsaugoti organizmą ir palaikyti normalų jo funkcionavimą. Taip pat pasitaiko atvejų, kai skiriama per daug arba per mažai vaisto.

Pacientai taip pat neatsakingai žiūri į gydymą. Dažnai gydymas nutraukiamas, kai ligos simptomai nustoja varginti. Tuo pačiu metu daugelis nenori baigti viso kurso. Tai vienas iš veiksnių, prisidedančių prie bakterijų atsparumo išsivystymo. Visas kursas skirtas visiškai sunaikinti patogeninę mikroflorą. Jei kursas nebaigiamas, jis nėra visiškai sunaikinamas. Tie mikroorganizmai, kurie išgyvena, patiria mutacijas, sukuria mechanizmus, kurie suteikia jiems apsaugą nuo šio vaisto, ir perduoda jį kitoms kartoms. Pavojus yra tas, kad atsparumas išsivysto ne tik šiam konkrečiam vaistui, bet ir visai vaistų grupei.

Todėl šiandien viena veiksmingiausių racionalaus gydymo ir atsparumo prevencijos priemonių yra preliminarus jautrumo paskirtam vaistui nustatymas ir optimalios jo dozės parinkimas.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]

Procedūros nuorodos jautrumo antibiotikams tyrimai

Paprastai tokia analizė turėtų būti atliekama visais atvejais, kai reikalingas antibakterinis gydymas. Remiantis pagrindiniais antibiotikų terapijos dėsniais, bet koks antibiotikas gali būti skiriamas tik atlikus preliminarų mikrofloros jautrumo šiam agentui įvertinimą ir laboratorinėmis sąlygomis nustačius optimalią veikliosios medžiagos koncentraciją. Praktiškai dėl įvairių priežasčių ir aplinkybių toks tyrimas prieš pradedant gydymą neatliekamas, todėl gydytojas yra priverstas pasirinkti vaistą „atsitiktinai“.

Šiandien jautrumo tyrimai atliekami tik tais atvejais, kai gydytojas rimtai abejoja paskirto vaisto veiksmingumu, ilgalaikio vaisto poveikio nebuvimo atvejais, taip pat pakartotinai vartojant tą patį vaistą per ribotą laiką. Jautrumas dažnai nustatomas gydant lytiškai plintančias ligas. Daugelis specialistų kreipiasi į tyrimus, jei pasireiškia šalutinis poveikis, alerginės reakcijos ir kai reikia vieną vaistą pakeisti kitu.

Analizė taip pat dažnai naudojama vaistams antibakteriniam gydymui parinkti atsigavimo laikotarpiu po operacijų, laparoskopinių intervencijų ir organų šalinimo. Chirurgijos ir pūlingos chirurgijos skyriuose toks tyrimas yra tiesiog būtinas, nes čia atsparumas išsivysto gana greitai. Be to, išsivysto itin atsparūs „ligoninėje įgyti“. Daugelis privačių klinikų vaistų skyrimą vertina visiškai atsakingai – tik patikrinusios jautrumą. Daugeliu atvejų valstybinių įstaigų biudžetas tiesiog neleidžia atlikti tokių tyrimų kiekvienam pacientui, kuriam reikalingas antibakterinis gydymas.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Paruošimas

Pasiruošimas tyrimui nereikalauja jokių specialių priemonių. Jis toks pat kaip ir bet kokiems tyrimams. Kelias dienas prieš tyrimą reikėtų susilaikyti nuo alkoholio vartojimo. Ryte, medžiagos rinkimo dieną, daugeliu atvejų negalima valgyti ir gerti. Tačiau viskas priklauso nuo analizės tipo. Tyrimo medžiaga gali skirtis priklausomai nuo ligos.

Sergant gerklės ir kvėpavimo takų ligomis, imamas tepinėlis iš gerklės ir nosies. Venerologijoje, ginekologijoje, urologijoje analizei imami tepinėliai iš lytinių organų ir kraujas. Sergant inkstų ligomis, dažnai reikalingas šlapimas. Sergant virškinimo trakto ligomis ir kai kuriomis infekcinėmis ligomis, tiriamos išmatos ir vėmimas. Kartais galima ištirti motinos pieną, nosies išskyras, akių sekretą, seiles, skreplius. Esant sunkioms patologijoms ir įtarus infekcinį procesą, tiriamas net smegenų skystis. Spektras gana platus.

Medžiagos rinkimo ypatumus lemia jos biologinė priklausomybė. Taigi, šlapimas ir išmatos surenkamos ryte į švarų indą arba specialų biologinei medžiagai skirtą indą. Motinos pienas surenkamas prieš maitinimą. Vidurinė dalis paimama tyrimui. Tepinėlis surenkamas specialiu tamponu, kuris perbraukiamas per gleivinę, o tada nuleidžiamas į mėgintuvėlį su paruošta terpe. Kraujas surenkamas į mėgintuvėlį iš piršto arba venos. Renkant tepinėlį iš šlaplės ar makšties, rekomenduojama kelias dienas susilaikyti nuo lytinių santykių.

Renkant biologinę medžiagą tyrimams, pirmiausia būtina užtikrinti teisingą surinkimą ir sterilumą. Tačiau daugeliu atvejų tai yra medicinos personalo rūpestis, pacientas neturėtų dėl to jaudintis. Dažniausiai į tokius tyrimus kreipiasi ginekologai ir urologai, antra vertus - otolaringologai, gydydami nosiaryklės ir ryklės, viršutinių kvėpavimo takų ligas.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Technika jautrumo antibiotikams tyrimai

Surinkta biologinė medžiaga steriliomis sąlygomis pristatoma į laboratoriją, kur atliekami tolesni tyrimai. Pirmiausia atliekamas pirminis jos sėjimas į universalias maitinamąsias terpes. Dalis medžiagos taip pat paimama mikroskopiniam tyrimui. Paruošiamas tepinėlis mikroskopijai, atliekamas tyrimas, kurio pagalba galima nustatyti apytikslį vaizdą, daryti prielaidą, kokie mikroorganizmai yra mėginyje. Tai leidžia parinkti optimaliausias aplinkas tolesniems tyrimams ir mikroorganizmų identifikavimui. Taip pat mikroskopu galima matyti požymius, rodančius uždegimą, onkologinį procesą.

Per kelias dienas Petri lėkštelėje auga mikroorganizmų kolonijos. Tada paimama kelios kolonijos ir perkeliamos į selektyvias maitinamąsias terpes, kurios leidžia apytiksliai nustatyti mikroorganizmų grupę. Jos kelias dienas inkubuojamos termostate, o tada pradedama identifikacija (mikroorganizmo rūšies nustatymas). Identifikacija atliekama naudojant specialius biocheminius ir genetinius tyrimus, identifikatorius. Be to, gali būti atliekami imunologiniai tyrimai.

Išskyrus pagrindinį patogeną, įvertinamas jo jautrumas antibiotikams. Tam yra keli metodai. Dažniausiai naudojamas metodas yra nuoseklus skiedimas arba diskų difuzijos metodas. Metodai išsamiai aprašyti mikrobiologijos žinynuose, gairėse ir laboratoriniuose standartuose.

Diskinės difuzijos metodo esmė yra ta, kad identifikuoti mikroorganizmai pasėjami ant maitinamosios terpės, o ant viršaus uždedami specialūs antibiotikais suvilgyti diskai. Sėja kelias dienas inkubuojama termostate, tada išmatuojami rezultatai. Įvertinamas kiekvieno antibiotiko bakterijų augimo slopinimo laipsnis. Jei bakterija jautri antibiotikui, aplink diską susidaro „lizės zona“, kurioje bakterijos nesidaugina. Jų augimas yra lėtas arba visai neauga. Augimo slopinimo zonos skersmuo naudojamas mikroorganizmo jautrumo antibiotikui laipsniui nustatyti ir tolesnėms rekomendacijoms formuluoti.

Tiksliausias yra nuoseklaus skiedimo metodas. Tam mikroorganizmai sėjami ant skystos maistinės terpės, įpilama antibiotiko, praskiesto pagal dešimtainę skiedimo sistemą. Po to mėgintuvėliai kelias dienas inkubuojami termostate. Jautrumas antibiotikams nustatomas pagal bakterijų augimo laipsnį maistiniame sultinyje, į kurį įdėta antibiotikų. Užfiksuojama minimali koncentracija, kurioje mikroorganizmai vis dar auga. Tai yra minimali vaisto dozė (būtina perskaičiuoti iš mikrobiologinių vienetų į veikliąją medžiagą).

Tai standartiniai mikrobiologiniai metodai, kurie sudaro bet kokio tyrimo pagrindą. Jie reiškia, kad visos manipuliacijos atliekamos rankiniu būdu. Šiandien daugelis laboratorijų yra aprūpintos specialia įranga, kuri visas šias procedūras atlieka automatiškai. Specialistui, dirbančiam su tokia įranga, tereikia mokėti dirbti su įranga, laikytis saugos ir sterilumo taisyklių.

Būtina atsižvelgti į tai, kad jautrumo rodikliai laboratorinėmis sąlygomis ir gyvuose organizmuose labai skiriasi. Todėl žmogui skiriama didesnė dozė nei nustatyta tyrimo metu. Taip yra dėl to, kad organizme nėra tokių optimalių sąlygų bakterijų augimui. Laboratorijoje sukuriamos „idealios sąlygos“. Dalis vaisto gali būti neutralizuota seilių, skrandžio sulčių veikimu. Dalis neutralizuojama kraujyje antikūnais ir antitoksinais, kuriuos gamina imuninė sistema.

Šlapimo antibiotikų jautrumo tyrimas

Pirma, surenkama biologinė medžiaga. Tam reikia surinkti vidurinę rytinio šlapimo dalį ir pristatyti ją į laboratoriją. Svarbu laikytis sterilumo ir nevartoti antibiotikų kelias dienas prieš analizę, kitaip galite gauti klaidingai neigiamą rezultatą. Po to atliekamas standartinis sėjimas, kurio esmė – išskirti gryną patogeno kultūrą ir parinkti antibiotiką, kuris turės optimalų baktericidinį poveikį. Nustatoma reikalinga antibiotiko koncentracija.

Šlapimo analizė dažniausiai skiriama įtarus infekcinį ir uždegiminį procesą urogenitalinėje sistemoje, esant imunodeficito ir medžiagų apykaitos sutrikimams. Paprastai šlapimas yra sterilus skystis. Tokio tyrimo trukmė yra 1–10 dienų ir priklauso nuo mikroorganizmo augimo greičio.

Kultūros ir antibiotikų jautrumo tyrimai

Tyrimo metu patogeną sukeliantis mikroorganizmas išskiriamas į gryną kultūrą. Kartais tokių mikroorganizmų gali būti keli (mišri infekcija). Kai kurie mikroorganizmai geba sudaryti bioplėveles, kurios yra savotiškos „mikrobų bendrijos“. Bioplėvelių išgyvenamumas yra daug didesnis nei pavienių mikroorganizmų ar asociacijų. Be to, ne visi antibiotikai geba paveikti bioplėvelę ir į ją prasiskverbti.

Norint nustatyti patogeną, jį išskirti į grynąją kultūrą, atliekama sėja. Tyrimo metu atliekama keletas sėjų įvairiose maitinamosiose terpėse. Tada išskiriama grynoji kultūra, nustatoma jos biologinė priklausomybė ir jautrumas antibakteriniams vaistams. Parenkama optimali koncentracija.

Tyrimui gali būti naudojama bet kokia biologinė medžiaga, priklausomai nuo ligos ir infekcinio proceso lokalizacijos. Trukmę lemia mikroorganizmų augimo greitis.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Išmatų jautrumo tyrimas

Išmatos tiriamos sergant įvairiomis skrandžio ir žarnyno ligomis, įtarus infekcinį procesą, bakterinę intoksikaciją, apsinuodijimą maistu. Tyrimo tikslas – išskirti sukėlėją ir parinkti jam optimalius antibakterinius vaistus, kurie pasižymės dideliu aktyvumu. Šio tipo tyrimo svarba ta, kad galima parinkti vaistą, kuris veiks tik sukėlėją ir nepaveiks normalios mikrofloros atstovų.

Pirmasis ir labai svarbus etapas yra išmatų surinkimas. Jas reikia surinkti į specialų sterilų indą ryte. Laikyti ne ilgiau kaip 1–2 valandas. Moterys, turinčios menstruacijų, analizę turėtų atidėti iki pabaigos, nes pasikeis rezultatų tikslumas. Medžiaga pristatoma į laboratoriją tyrimams. Analizė atliekama naudojant standartinius mikrobiologinius metodus – sėjant ir išskiriant gryną kultūrą. Taip pat atliekama antibiotikograma. Remiantis išvadomis, parengiamos rekomendacijos ir nustatoma tolesnė tyrimo schema.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Disbakteriozės analizė su jautrumu

Tyrimo medžiaga yra išmatos, paimtos iškart po tuštinimosi. Normalią virškinamojo trakto mikroflorą sudaro normalios floros atstovai ir keli patogeninės floros atstovai. Jų rūšinė sudėtis, kiekis ir santykis yra griežtai apibrėžti ir neviršija leistinos normos. Jei šis santykis sutrikęs, išsivysto disbakteriozė. Ji gali pasireikšti įvairiai. Infekcinės ligos gali išsivystyti, jei patogeninės mikrofloros kiekis smarkiai padidėja. Jei bet kurio mikroorganizmo kiekis smarkiai sumažėja, laisvą vietą užima kiti, nebūdingi virškinamajam traktui arba patogeniniai atstovai. Dažnai laisvą vietą užima grybelis, tada išsivysto įvairios grybelinės infekcijos ir kandidozė.

Siekiant nustatyti kiekybinę ir kokybinę žarnyno mikrofloros sudėtį, atliekama išmatų analizė dėl disbakteriozės. Paprastai visi žarnyne gyvenantys atstovai skirstomi į tris grupes: patogeninius, oportunistinius ir nepatogeninius. Atitinkamai analizė susideda iš trijų dalių. Kiekviena mikroorganizmų grupė turi savo poreikius maisto šaltiniui, energijai. Kiekvienai grupei reikalingos atskiros maistinės terpės ir selektyvių priedų.

Pirmiausia atliekama mikroskopija ir pirminis sėjimas. Tada, po sėjimo, atrenkamos didžiausios kolonijos, morfologiniais požymiais panašios į kiekvienos grupės atstovus. Jos perkeliamos į selektyvias terpes. Mikroorganizmams paaugus, jie identifikuojami ir nedelsiant tiriamas jautrumas antibiotikams. Naudojami standartiniai mikrobiologiniai metodai.

Patogeninių mikroorganizmų grupės tyrimas, be standartinių tyrimų, apima vidurių šiltinės, paratifinės ir dizenterinės bakterijų nustatymą. Taip pat nustatoma, ar asmuo yra šių mikroorganizmų nešiotojas. Išsamus disbakteriozės tyrimas taip pat apima bifidobakterijų ir laktobacilų grupės atstovų tyrimą. Tyrimas trunka apie savaitę ir priklauso nuo mikroorganizmų augimo greičio.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Bakteriofagų jautrumo tyrimas

Žarnyno infekcijos atveju bakteriofagai dažnai naudojami gydymui vietoj antibiotikų. Bakteriofagai yra bakterijų virusai, jautrūs tik jiems. Jie randa bakteriją, su kuria yra komplementarūs, prasiskverbia pro ją ir palaipsniui sunaikina bakterijų ląstelę. Dėl to infekcinis procesas sustoja. Tačiau ne visos bakterijos yra jautrios bakteriofagams. Norint patikrinti, ar tam tikras bakteriofagas parodys aktyvumą prieš mikrofloros atstovus, reikia atlikti analizę.

Tyrimo medžiaga yra išmatos. Analizė turi būti pristatyta į laboratoriją per valandą, kitaip jos atlikti nebus įmanoma. Analizę būtina atlikti kelis kartus. Pradinis metodas yra panašus į jautrumo antibiotikams nustatymo metodą. Pirmiausia atliekama preliminari mėginio mikroskopija, po to pirminis sėjimas į universalias maistines terpes. Tada gryna kultūra išskiriama į selektyvias maistines terpes.

Pagrindinis darbas atliekamas su gryna kultūra. Jos apdorojamos įvairių tipų bakteriofagais. Jei kolonija ištirpsta (lizuojasi), tai rodo didelį bakteriofago aktyvumą. Jei lizė dalinė, bakteriofagas funkcionuoja vidutiniškai. Nesant lizės, galime kalbėti apie atsparumą bakteriofagui.

Fagų terapijos privalumas yra tas, kad bakteriofagai neveikia žmogaus organizmo ir nesukelia šalutinio poveikio. Jie prisijungia prie tam tikrų rūšių bakterijų ir jas lizuoja. Trūkumas yra tas, kad jie yra labai specifiški ir turi selektyvų poveikį, todėl ne visada gali prisijungti prie bakterijų.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ], [ 37 ], [ 38 ]

Skreplių analizė jautrumui antibiotikams nustatyti

Analizė – tai apatinių kvėpavimo takų išskyrų tyrimas. Tikslas – nustatyti mikroorganizmų, kurie sukelia ligą, tipą. Taip pat atliekama antibiotikograma. Šiuo atveju nustatomas patogeno jautrumas antibiotikams ir parenkama optimali koncentracija. Ji naudojama kvėpavimo takų ligoms gydyti.

Skreplių ir kito plaučių bei bronchų turinio tyrimas yra būtinas norint pasirinkti gydymo režimą ir diferencijuoti įvairias diagnozes. Jis naudojamas tuberkuliozės buvimui patvirtinti arba paneigti.

Pirmiausia reikia gauti biologinę medžiagą. Ją galima gauti kosint, atsikosėjant arba paimant iš trachėjos bronchoskopijos metu. Yra specialių aerozolių, kurie skatina atsikosėjimą. Prieš imant skreplius, burną reikia praskalauti vandeniu, tai sumažins burnos ertmės bakterinio užterštumo laipsnį. Pirmiausia rekomenduojama 3 kartus giliai įkvėpti ir sukelti produktyvų kosulį. Skreplius taip pat galima paimti išsiurbiant iš trachėjos. Tokiu atveju į trachėją įkišamas specialus kateteris. Bronchoskopijos metu į bronchų ertmę įkišamas bronchoskopas. Šiuo atveju gleivinė sutepama anestetiku.

Tada medžiaga siunčiama į laboratoriją tyrimams. Atliekamas standartinis sėjimas ir mikroskopija. Tada išskiriama gryna kultūra ir atliekamos tolesnės manipuliacijos su ja. Atliekama antibiotikograma, kuri leidžia nustatyti bakterijų jautrumo spektrą ir parinkti optimalią dozę.

Įtarus tuberkuliozę, rytiniai skrepliai tiriami tris dienas. Atliekant tuberkuliozės tyrimus, rezultatas bus paruoštas per 3–4 savaites. Kadangi ligos sukėlėjas – mikobakterijos tuberkuliozė – auga labai lėtai.

Paprastai turėtų būti aptikti normalios kvėpavimo takų mikrofloros atstovai. Taip pat būtina atsižvelgti į tai, kad sumažėjus imunitetui, normalios mikrofloros rodikliai gali skirtis.

Spermos analizė antibiotikų jautrumui nustatyti

Tai bakteriologinis spermos ejakuliato tyrimas, po kurio parenkami jautrūs antibiotikai ir jų koncentracijos. Dažniausiai jis atliekamas gydant nevaisingumą ir kitas vyrų reprodukcinės sistemos ligas. Tuo atveju, jei ligą lydi infekcinis procesas. Pagrindinė vyrų nevaisingumo priežastis daugeliu atvejų yra infekcija. Paprastai iš pradžių atliekama spermograma. Remiantis rezultatais, nustatomas spermos apvaisinimo gebėjimas. Jei atliekant šią analizę randamas didelis leukocitų skaičius, galime kalbėti apie uždegiminį procesą. Tokiu atveju paprastai nedelsiant skiriama mikrobiologinė analizė, nes uždegimą beveik visada lydi infekcija. Remiantis gautais rezultatais, parenkama tinkama terapija. Tyrimą paprastai skiria andrologas.

Prostatitas ir lytiškai plintančios ligos taip pat yra analizės atlikimo priežastys. Ji taip pat skiriama, jei partneriui nustatoma lytiškai plintanti liga.

Teisingos analizės pagrindas, visų pirma, yra teisingas biologinės medžiagos surinkimas. Medžiaga surenkama į specialius indus su plačiu kaklu. Laikymo temperatūra turi atitikti žmogaus kūno temperatūrą. Tokiu atveju medžiagą galima laikyti ne ilgiau kaip valandą. Užšaldytą – ne ilgiau kaip parą. Netinkama imti pasėlio vartojant antibiotikus, nes tai pakeičia klinikinį vaizdą. Paprastai pasėlis imamas prieš pradedant antibiotikų terapijos kursą. Arba nutraukite vaistų vartojimą 2–3 dienas prieš analizę.

Tada jis sėjamas ant maistinės terpės. Inkubuojamas termostate 1-2 dienas. Po to išskiriama gryna kultūra, atliekama identifikacija, nustatomas jautrumas, taip pat kiekvienos kolonijos tipas ir augimo greitis. Jautrumas antibiotikams nustatomas, jei aptinkami patogeniniai mikroorganizmai. Vidutiniškai analizė trunka 5-7 dienas.

[ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ], [ 43 ]

Glitimo jautrumo testas

Yra daug testų, kuriais galima nustatyti imunologinį jautrumą įvairioms medžiagoms ar patogenams. Anksčiau pagrindinis metodas buvo atlikti testus, pagrįstus antikūnų ir antigenų agliutinacijos reakcija. Šiandien šie testai naudojami vis rečiau, nes jų jautrumas yra daug mažesnis nei daugelio šiuolaikinių metodų, tokių kaip glitimo testai. Dažniausiai praktikoje glitimui ir išmatoms analizuoti naudojamas seilių testas.

Glitimo jautrumo testas naudojamas įvairiems žarnyno sutrikimams diagnozuoti. Jis pagrįstas imuninės sistemos reakcija. Jei į išmatas pridedama glitimo, reakcija atsiranda arba jos nėra. Tai laikoma klaidingai teigiamu arba klaidingai neigiamu rezultatu. Teigiamas rezultatas rodo polinkį į kolitą, didelę jo išsivystymo tikimybę. Jis taip pat patvirtina celiakiją.

Taip pat galima atlikti glitimo testą naudojant seiles kaip biologinę medžiagą. Galima išmatuoti antikūnų prieš gliadiną kiekį. Teigiamas rezultatas rodo jautrumą glitimui. Tai gali rodyti didelę diabeto tikimybę. Jei abu testai teigiami, galima patvirtinti diabetą arba celiakiją.

[ 44 ], [ 45 ]

Chlamidijų jautrumo antibiotikams tyrimas

Analizė atliekama gydant infekcines ir uždegimines urogenitalinio trakto ligas, įtarus chlamidiją. Tyrimo medžiaga yra makšties gleivinės iškarpa – moterims, tepinėlis iš šlaplės – vyrams. Surinkimas atliekamas procedūrinėje patalpoje, naudojant vienkartinę įrangą. Svarbu laikytis sterilumo. Prieš renkant medžiagą, 1–2 dienas prieš tyrimo pradžią reikėtų susilaikyti nuo intymumo. Jei moteris menstruuoja, medžiaga surenkama praėjus 3 dienoms po jų visiško pabaigos.

Medžiaga pristatoma į laboratoriją. Išsami analizė apima preliminarią tepinėlio mikroskopiją. Tai leidžia vizualiai nustatyti mikroflorą pagal morfologinius požymius ir teisingai parinkti maistinę terpę. Gleivių, pūlių ir epitelio dalelių kiekis gali tiesiogiai arba netiesiogiai rodyti uždegiminio proceso vystymąsi arba piktybinį ląstelių degeneraciją.

Tada atliekamas pirminis sėjimas. Kultūra kelias dienas inkubuojama termostate ir identifikuojama remiantis kultūrinėmis savybėmis. Tada kultūra perkeliama į selektyvias maitinamąsias terpes, skirtas chlamidijoms kultivuoti. Gautos kolonijos identifikuojamos naudojant biocheminius tyrimus. Tada jautrumas antibiotikams nustatomas naudojant standartinius metodus. Parenkamas jautriausias antibiotikas ir jo koncentracija. Chlamidijoms kultivuoti reikalingos specialios terpės, sukurtos specialiai šio tipo mikroorganizmams, kuriose yra visos reikalingos medžiagos ir augimo faktoriai.

Taip pat galima atlikti tyrimą naudojant biologinį metodą. Tam žiurkės užkrečiamos patogenu. Kai kuriose laboratorijose vietoj žiurkių naudojama specialiai auginama audinių kultūra. Taip yra dėl to, kad chlamidijos yra tarpląsteliniai parazitai, todėl jų auginimui reikalingos specialios sąlygos. Tada mikroorganizmai nustatomi PGR metodu. Jautrumui nustatyti jie persodinami į selektyvią chlamidijoms skirtą maistinę terpę, o po kelių dienų užfiksuojami rezultatai. Atsparumas arba jautrumas vertinamas pagal infekcinio proceso slopinimą ląstelėse.

[ 46 ], [ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Kiek laiko užtrunka atlikti antibiotikų jautrumo tyrimą?

Vidutiniškai analizė atliekama per 5–7 dienas. Kai kurios analizės užtrunka ilgiau. Pavyzdžiui, diagnozuojant tuberkuliozę, rezultatų tenka laukti nuo 3 savaičių iki mėnesio. Viskas priklauso nuo mikroorganizmų augimo greičio. Dažnai laboratorijos darbuotojams tenka susidurti su atvejais, kai pacientai prašo analizę atlikti greičiau. Ir jie netgi siūlo „papildomą mokestį“ už skubumą. Tačiau čia reikia suprasti, kad šiuo atveju niekas nepriklauso nuo laboratorijos asistento veiksmų. Priklauso tik nuo to, kaip greitai mikroorganizmas auga. Kiekvienas tipas turi savo, griežtai apibrėžtą augimo greitį.

Normalus našumas

Nėra absoliučių universalių normų verčių visoms analizėms. Pirma, šios vertės gali skirtis kiekvienam biotopui. Antra, jos yra individualios kiekvienam mikroorganizmui. Tai yra, to paties mikroorganizmo, tarkime, gerklės ir žarnyno, normos vertės yra skirtingos. Taigi, jei gerklėje vyrauja stafilokokas kaip normalios mikrofloros atstovas, tai žarnyne vyrauja E. coli, bifidobakterijos ir laktobakterijos. To paties mikroorganizmo vertės skirtinguose biotopuose taip pat gali labai skirtis. Pavyzdžiui, Candida paprastai gali būti tam tikru kiekiu urogenitalinėje mikrofloroje. Burnos ertmėje jų paprastai nėra. Candida buvimas burnos ertmėje gali rodyti jų dirbtinį introdukavimą iš natūralios buveinės.

Šlapimas, kraujas, smegenų skystis yra biologinės aplinkos, kurios paprastai turėtų būti sterilios, t. y. jose neturėtų būti jokios mikrofloros. Mikrofloros buvimas šiuose skysčiuose rodo stiprų uždegiminį, infekcinį procesą, taip pat rodo bakteremijos ir sepsio išsivystymo riziką.

Apskritai yra apytikslė klasifikacija. Mikrobiologijoje matavimo vienetas yra KSV/ml, tai yra kolonijas sudarančių vienetų skaičius 1 mililitre biologinio skysčio. Užterštumo laipsnis nustatomas pagal KSV skaičių ir svyruoja nuo 101 ^iki 109. ^Atitinkamai, ¹⁰¹ yra minimalus mikroorganizmų skaičius, 109 ^yra sunkus infekcijos laipsnis. Tuo pačiu metu diapazonas iki 103 ^laikomas normaliu, visi rodikliai, viršijantys šį skaičių, rodo patologinę bakterijų dauginimąsi.

Kalbant apie jautrumą antibiotikams, visi mikroorganizmai skirstomi į atsparius, vidutiniškai jautrius, jautrius. Šis rezultatas dažnai išreiškiamas kaip kokybinė charakteristika, rodanti MID – minimalią slopinamąją antibiotiko dozę, kuri vis dar slopina mikroorganizmo augimą. Kiekvienam žmogui, taip pat ir kiekvienam mikroorganizmui, šie rodikliai yra griežtai individualūs.

[ 54 ], [ 55 ], [ 56 ], [ 57 ]

Analizės prietaisas

Atliekant bakteriologinius tyrimus, ypač nustatant jautrumą antibiotikams, vieno prietaiso nepakaks. Reikalinga pilna, išsami bakteriologijos laboratorijos įranga. Būtina kruopščiai suplanuoti ir parinkti įrangą, kuri atitiktų kiekvieną tyrimo etapą. Biologinės medžiagos rinkimo etape reikalingi sterilūs instrumentai, dėžės, konteineriai, laikymo kameros ir transportavimo įranga medžiagai pristatyti į laboratoriją.

Laboratorijoje pirmiausia reikės aukštos kokybės mikroskopo tepinėlio mikroskopijai. Šiandien yra daugybė mikroskopų, pasižyminčių įvairiomis savybėmis – nuo tradicinių šviesos iki fazinio kontrasto ir atominės jėgos mikroskopų. Šiuolaikinė įranga leidžia nuskaityti vaizdą trimatėje erdvėje ir ištirti jį dideliu didinimu, pasižymint dideliu tikslumu.

Mikroorganizmų sėjimo ir inkubavimo etape gali prireikti autoklavų, sauso šildymo spintų, eksikatorių, garinių vonių ir centrifugos. Reikalingas termostatas, kuriame vyksta pagrindinė biologinės medžiagos inkubacija.

Mikroorganizmų identifikavimo ir antibiotikogramos atlikimo etape įvairiems skaičiavimams ir kultūrų biocheminių savybių įvertinimui gali prireikti mikromanipuliatorių, masių spektrometrų, spektrofotometrų, kolorimetrų.

Be to, šiuolaikinės laboratorijos gali būti aprūpintos aukštųjų technologijų įranga, kuri atlieka visus aukščiau paminėtus pagrindinius tyrimų etapus, net ir rezultatų apskaičiavimą automatiniu režimu. Tokie prietaisai apima, pavyzdžiui, sudėtingą bakteriologinės laboratorijos įrenginį, pagrįstą skrydžio laiko masės spektrometru. Ši prietaisų linija leidžia visą laboratorijos teritoriją padalyti į tris zonas. Pirmoji zona yra nešvari, kurioje priimami ir registruojami tyrimai. Antroji zona yra darbo zona, kurioje faktiškai atliekami pagrindiniai mikrobiologiniai tyrimai. O trečioji zona yra sterilizavimas ir autoklavas, kuriame atliekamas darbinės medžiagos paruošimas ir utilizavimas.

Modeliai leidžia inkubuoti esant įvairioms temperatūroms ir sąlygoms. Juose yra įmontuotas kraujo ir kitų biologinių mėginių analizatorius, kuris pateikia didelio tikslumo ir patikimumo rezultatus. Rinkinį sudaro elektroninės svarstyklės, bidistiliatoriai, centrifugos, autoklavai ir sterilizavimo spintos, automatinė terpės viryklė, vandens vonelė su įmontuotu maišytuvu, pH matuokliai, termometrai ir mikroskopai.

Taip pat naudojamas mikrobiologinis analizatorius, į kurį dedami tiriamieji mėginiai, maistinė terpė ir jautrumo nustatymo testų rinkiniai. Prietaisas atlieka reikiamus tyrimus ir pateikia paruoštą išvadą.

Vertybių pakėlimas ir nuleidimas

Iššifruoti analizę gali tik gydytojas. Tačiau dažnai pacientai, gavę rezultatus, puola į paniką, pastebėję daugybę nesuprantamų simbolių ir skaičių. Kad nepasiklystumėte, patartina bent jau bendrą supratimą, kaip iššifruoti jautrumo antibiotikams analizę. Paprastai pirmas rezultatuose nurodomas ligą sukėlusio mikroorganizmo pavadinimas. Pavadinimas pateikiamas lotyniškai. Jis taip pat gali nurodyti organizme vyraujančios normalios mikrofloros atstovą, todėl panikuoti nereikėtų. Antras punktas nurodo užkrėtimo laipsnį, t. y. mikroorganizmų skaičių. Paprastai šis skaičius svyruoja nuo 101 ^iki 109. ^Trečias punktas nurodo patogeniškumo formą, o ketvirtas – antibakterinių vaistų, kuriems šis mikroorganizmas yra jautrus, pavadinimus. Šalia nurodoma minimali slopinamoji koncentracija, kuri slopina mikroorganizmo augimą.

[ 58 ], [ 59 ], [ 60 ], [ 61 ], [ 62 ], [ 63 ]