Hepatito A virusas

Virusinis hepatitas A yra žmogaus infekcinė liga, pasireiškianti vyraujančiu kepenų pažeidimu ir pasireiškusi klinikiniu apsinuodijimu ir gelta. Hepatito A viruso buvo atrasta 1973 m S. Feynstonom Naudojant imuninės elektronų mikroskopu, o užkrėsti beždžionės metodą (et al.) - šimpanzės ir Kabiauodegės. Metodas imuninė elektronų mikroskopija yra tai, kad išmatos į filtratą pridedama hepatito Pacientas specifinė antikūnų (Ozdrowieniec serumo) ir nuosėdos buvo atliktas elektroniniu mikroskopu. Dėl virusų, turinčių specifinių antikūnų, sąveikos jie yra specifiškai sujungiami. Tokiu atveju juos lengviau aptikti, o antikūnų įtaka agregacijai patvirtina patogeno specifiškumą. S. Feinstone atradimas buvo patvirtintas eksperimentuose su savanoriais.

Hepatito A virusas yra sferine forma, viriono skersmuo yra 27 nm. Genome yra vienos grandinės teigiama RNR, kurios masė yra 2,6 MD. Supercapsidas nėra. Simetrijos tipas yra kubinis - icosahedras. Kapsidas yra 32 kapsomero, jį sudaro keturi polipeptidai (VP1-VP4). Pagal savo savybes hepatito A virusas priklauso Heparnovirus genčiai, šeimai Picornaviridae. Antigeniškai hepatito A virusas (HAV - hepatito A virusas) yra homogeniškas. HAV padauginti kūno pat šimpanzių, babuinų, hamadryas callitrichidae ir beždžionių (Kabiauodegės). Ilgą laiką virusas negalėjo kultivuoti. Tik 1980-aisiais. Buvo įmanoma gauti ląstelių kultūras, kuriose HAV dauginasi. Iš pradžių naudojamas šiems tikslams, įamžinta embriono inkstų ląstelių linija Rezusas (Kultūra FRhK-4), o dabar - persodinto inksto ląstelių linija žalia beždžionė (Kultūra 4647).

Pasak PSO ekspertų rekomendacijas, priėmė šią nomenklatūrą hepatito A viruso žymenys: hepatito A viruso - nacionalinių institucijų antikūnų hepatito A viruso: anti-HAV IgM ir anti-HAV IgG.

HAV yra mažos 27-30 nm skersmens dalelės, turinčios icosederginę simetriją ir homogeniškumą. Dėl elektronų difrakcijos modelio, gauto imuninės agregacijos metodu, aptikti elektroniškai tankios dalelės su paviršiškai esančiais simetriškai sutvarkytais kapsomerais. Neigiamai kontrastingai preparatuose aptinkamos ir visiškai, ir tuščios dalelės. Nucleocapsid NAV, skirtingai nuo gripo, neturi paviršiaus iškilimų ir membranų. Taip pat svarbu, kad virionas HAV nebūtų širdies formos struktūros.

Pasak fizinės-cheminės savybės hepatito A virusas yra susijusios su Picornaviridae šeima, gentis enteroviruso su atominį skaičių 72. Tačiau ši taksonomija buvo pernelyg neįprasta ir kas nusprendė, kad galima palikti terminologija "hepatito A viruso".

Kaip ir visi "Picornaviridae" šeimos virusai, hepatito A virusas turi ribonukleino rūgštį. Kai kurios laboratorijos parodė galimybę klonuoti hepatito A viruso genomą, kuris atveria perspektyvą gauti vakcinos preparatus.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7],

A hepatito A viruso atsparumas

Virusas yra palyginti atsparus aukštai temperatūrai, rūgštys, riebalų tirpikliai (nėra lipidų), dezinfekuojančiai medžiagai jis toleruoja gerai žemą temperatūrą. Visa tai prisideda prie jos ilgalaikio išsaugojimo išorinėje aplinkoje. Esant kambario temperatūrai, ji išlieka kelias savaites, 60 ° C temperatūroje iš dalies prarandama infekcija po 4-12 valandų, visiškai - po kelių minučių esant 85 ° C temperatūrai. Labai atsparus chlorui, dėl kurio jis gali patekti į vandentiekio vandenį per vandens valymo įrenginių barjerus.

Apibendrinant visus duomenis, mes galime apibūdinti hepatito A virusą taip:

• gamtinis meistras yra žmogus;
• eksperimentiniai gyvūnai - marmozetas, šimpanzė;
• infekcijos šaltinis - išmatos;
• liga - epidemija ir endeminė;
• perdavimo kelias yra fecal-oralinis;
• inkubacinis laikotarpis - 14-40 dienų;
• perėjimas prie lėtinio hepatito - nenustatyta.

GAV imunologinės savybės yra tokios:

• Prototipiniai štamai - Ms-l, CR-326, GVG. Visi imunologiškai panašūs arba identiški;
• Antikūnai - IgM ir IgG, gaminami reaguojant į viruso struktūrinius baltymus ir yra apsauginiai;
• I Žmogaus serumo y-globulino trofinis poveikis - apsaugo arba susilpnina ligą vartojimo sąlyga prieš infekciją arba inkubacijos laikotarpiu.

Fizikinės ir cheminės savybės NAU yra tokios:

• Morfologija yra ne lukšto sferinė dalelė su kubine simetrija, kappidas susideda iš 32 kapsomerų;
• Skersmuo 27-30 nm;
• SsS1 Tankis (g / cm3), - 1,38-1,46 (atviros dalelės), 1,33-1,34 (subrendęs viriono), 1.29-1.31 (nesubrendusios virusas atsiskiria, tuščios dalelės);
• Sedimentacijos koeficientas yra 156-160 subrendusių virionų;
• Nukleino rūgštis - viengubos linijinės RNR;
• Santykinė molekulinė masė - 2,25 106-2,8 106KD;
• Nukleotidų skaičius yra 6500-8100.

NAV stabilumas fizikocheminiuose poveikiuose yra toks:

• Chloroformas, eteris - stabilus;
• Chloras, 0,5-1,5 mg / l, 5 ° C, 15 min. - dalinė inaktyvacija;
• Chloraminas, 1 g / l, 20 ° C, 15 min. - visiškas inaktyvavimas;
• Formalinas, 1: 4000, 35-37 ° С, 72 valandos - visiškas inaktyvavimas, 1: 350, 20 ° С, 60 min - dalinė inaktyvacija.

Temperatūra:

• 20-70 ° C - stabilus;
• 56 ° С, 30 minučių - jis yra stabilus;
• 60 ° С, 12 valandų - dalinė inaktyvacija;
• 85 ° С, 1 min - visiškas inaktyvavimas;
• Autoklave, 120 ° C 20 minučių - visiškas inaktyvumas;
• Sausa karštis, 180 ° C, 1 val. - visiškas inaktyvavimas;
• UV, 1,1 W, 1 min. - visiškai inaktyvuota.

Pateikti duomenys rodo, kad hepatito A viruso fizikinės ir cheminės savybės yra arčiausiai enteroviruso. Kaip ir kiti enterovirusai, HAV yra atsparus daugeliui dezinfekavimo tirpalų, visiškai inaktyvuojamas keletą minučių 85 ° C temperatūroje ir autoklavuojant.

Jis įrodė, kad nuo hepatito A virusas gali atgaminti pirminio ir tęstinio monomolekulinių sluoksnių kultūras žmogaus ląstelių linijų ir beždžionė. Ypač aktyviai atgaminti hepatito A viruso in vitro kultūrų pastebėta, kai naudojant kaip pradinė medžiaga ekstraktai kepenų pacientų beždžionių. Tačiau, reikia pažymėti, kad visose eksperimentų pagal hepatito reprodukcijai A viruso in vitro kultūrų Pažymėtina, kol inkubacinis laikotarpis pirminių praėjimų (-10 iki 4 savaičių), vėliau kaupimo virusinių genetinės medžiagos didėja, tačiau absoliučios vertės yra labai maži, kad kyla daug mokslininkų kalbėti apie nepilno replikacijos hepatito A viruso audinių kultūrose.

Apibendrinant literatūros duomenis apie hepatito A viruso reprodukciją iš nekontroliuojamų kultūrų, galima teigti, kad ilgalaikio HAV patyrimo in vitro faktas yra neginčytinas. Nebuvo galutinai nustatytos optimalios sąlygos stabiliai dideliam viruso replikacijos lygiui, todėl tai apriboja biologinių savybių tyrimą, reagentų, skirtų diagnostikai ir vakcinų gamybai, gamybą.

Tuo pačiu metu literatūroje galima rasti daugiau optimistinių sprendimų, susijusių su šia problema. Artimiausiu metu bus sprendžiami visi klausimai, susiję su hepatito A viruso augimu. Kai studijuoja optimalias sąlygas HAV sklidimą ląstelių kultūroje embriono inkstų rezus beždžionėmis atskleidė du etapai: infekcinio viruso gamybos etapas (iki 6-8 dienų 5th ištrauka) ir intensyvaus kaupimo virusinio antigeno etape. Taip pat parodyta, kad svarbiausias viruso antigeno kaupimas vyksta vadinamojo voleliu auginimo sąlygomis (besisukantys buteliukai). Tai atveria plačias galimybes gauti kultūrinį antigeną dideliais kiekiais, todėl atsiras pradinė medžiaga diagnostinėms sistemoms paruošti ir vakcinos preparatų gamybai.

Epidemiologija hepatito A

Hepatito A virusas yra didelis patogeniškumas žmonėms. Remiantis PSO (1987 m.) Išvadomis, ligos atsiradimui pakanka užkrėsti tik vieną virjį. Tačiau praktinė infekcinė dozė tikriausiai yra daug didesnė. Infekcijos šaltinis yra tik užkrėstas žmogus. Virusas išleidžiamas dideliais kiekiais su išmatomis 12-14 dienų prieš gelio atsiradimą ir per 3 savaites. Gelsybinis laikotarpis. Nebuvo nustatyta reikšmingų patogeno išskyrimo skirtumų pacientams, sergantiems piktybine, gelta ir asimptominėmis hepatito A formomis. Infekcijos metodas yra fecal-oralinis, dažniausiai vandeninis, taip pat namų ūkių ir maisto produktų. Infekcijos metodas yra fecal-oralinis, dažniausiai vandeninis, taip pat namų ūkių ir maisto produktų. Pagrindinis (pirminis) viruso perdavimo būdas yra vanduo. Taip pat galima infekuoti ore. Gyventojų jautrumas yra visuotinis. Dažniausiai serga jaunesni nei 14 metų vaikai. Liga pasižymi ryškiu rudens-žiemos sezoniškumu.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

A hepatito simptomai

Inkubacinis laikotarpis svyruoja nuo 15 iki 50 dienų, priklausomai nuo dozės infekuojančio virusas dydžio, tačiau iš 28-30 dienų vidurkį. Kai organizme, hepatito A viruso atkartoja regioniniuose limfmazgiuose, į kraują, o tada kepenų ląsteles ir sukelia difuzinio ūminis hepatitas, kuris kartu su pakenkimais kepenų hepatocitų ir retikuloendotelinėje ląstelių ir į jos detoksikacijos ir barjerinių funkcijų sumažėjimas. Hepatocitų žala kyla ne dėl tiesioginio veikimo viruso, kaip imunopatologinių mechanizmų rezultatas. Labiausiai būdingas vaizdą hepatito A yra ūminis Żółtaczkowy ciklinis forma: inkubacinis laikotarpis, tuo prodrominis (preicteric), gelta ir Ozdrowienie laikotarpis. Tačiau, atsižvelgiant į infekcijos židinių atskleidžia didelį pacientų skaičių su ligos simptomų ir anicteric formų infekcijos, kurių skaičius neišsiskiria per ūminių ( "ledkalnio reiškinio").

Po infekcinio imuniteto yra stiprus ir ilgalaikis, sukeltas viruso neutralizuojančių antikūnų ir imuninės atminties ląstelių.

A hepatito mikrobiologinė diagnozė

Diagnozė hepatito A (išskyrus infekcijos gyvūnų - šimpanzių marmozet, babuinų, kurias mes), remiantis įvairių imunologiniais metodais: DGC imunofluorescenciniam metodą, hemagliutinacija imuninės sukibimo (kompleksas viruso antigeną + Antikūno dalyvaujant komplementui adsorbuotas eritrocitų ir sukelia jų sukibimą) . Tačiau, šių metodų taikymas yra ribotas dėl to, kad konkrečių virusinių antigenų ir imunofluorescenciniam reakcijos stokos reikalauja kepenų biopsijos, kuris yra nepageidautinas. Patikimas ir konkretus metodas yra imuninė elektronų mikroskopija, bet tai labai daug laiko. Todėl, kol tik priimtinas metodas imunologinį reakcijos yra imunosorbento bandinys kietą fazę į IPM, arba RIM forma, ypač atsižvelgiant į "surinkimo" imunoglobulino M. Mūsų šalis, šiam siūlomam tikslui pasiekti bandymo sistemos modifikacija - "DIAG-A-GEO". Šios bandymų sistemos darbo principas yra toks. Dėl polistireno sienų lunochek sorbuota pirmuosius antikūnų imunoglobulinai M klasės (antiimmunoglobuliny M) yra po to pridedama su nagrinėjama pacientų serumu. Jei yra antikūnas klasės IgM, jie bus susirišti su antikūnu pagrįsta-Ti-M, po to pridedama į tam tikrą viruso antigeną (hepatito A viruso), kuris gaunamas auga ląstelių kultūroje. Sistema skalaujamas, ir su juo yra pridėta priešvirusinių antikūnų pažymėtus krienų peroksidazės. Jei visi keturi sistemos komponentai sąveikauja, atsiranda keturių sluoksnių "sumuštinis":

• antiimmunoglobulinai M
• imunoglobulinai M (nuo hepatito A viruso - paciento tyrimo serume),
• virusinis antigenas
• antivirusiniai antikūnai, paženklinti fermentu.

Norėdami aptikti šį kompleksą, lunetams pridedamas fermento substratas. Pagal fermento įtaką jis sunaikinamas, susidaro spalvotas produktas. Spalvos intensyvumas gali būti kiekybiškai matuojamas spektrofotometru ar fotokolimometru.

IgM "surinkimo" metodo pranašumas yra tai, kad šios klasės imunoglobulinų antikūnai pasirodo esant pirminiam imuniniam atsakui ir rodo aktyvų infekcijos etapą, jie išnyksta po perduota liga. Priešvirusiniai antikūnai, priklausantys IgG klasei, priešingai, išlieka ilgą laiką po ligos, užtikrinant įgytą imunitetą. Siekiant nustatyti hepatito A virusą, siūloma naudoti DNR zondo metodą: zondas naudojamas kaip papildomas vRNR zondas.

Hepatito A gydymas

Dėl to, kad viruso hepatitui sutrinka interferono gamyba, hepatito A gydymas yra pagrįstas interferono ir jo endogeninės sintezės amiksino induktoriaus vartojimu.

Speciali hepatito A prevencija

Anksčiau plačiai taikomas seroprevention nuo hepatito A, naudojant gammaglobulin buvo nepateisinamas, tačiau dėmesys buvo skiriamas laikymo imunizacijos, atliekama vakcinacija nuo hepatito A. Šiuo tikslu rengiami įvairūs vakcinos variantai ir jie jau naudojami. Rusijoje efektyvi vakcina nuo hepatito A buvo gauta dar 1995 m., O dabar ji buvo sėkmingai taikoma.