Mikrobiologinis skreplių tyrimas

Mikrobiologinis tyrimas yra svarbiausia grandis diagnostinėje pneumonijos sukėlėjo paieškoje ir patikrinime. Jis apima ne tik sukėlėjo išskyrimą, bet ir jo savybių, įskaitant jautrumą įvairiems vaistams, turintiems baktericidinį ir bakteriostatinį poveikį, tyrimą.

Šiuo tikslu naudojamas skreplių sėjimo į įvairias maistines terpes metodas. Į laboratoriją pristatytame skreplių mėginyje atrenkami pūlingi gabalėliai ir kruopščiai plaunami Petri lėkštelėje izotopiniu natrio chlorido tirpalu, kuris tam tikru mastu leidžia juos išlaisvinti iš viršutinių kvėpavimo takų mikrofloros. Pūlingi skreplių gabalėliai sėjami į įvairias maistines terpes, kurių sudėtis aprašyta specialiuose mikrobiologijos vadovuose. Terpės su sėjomis inkubuojamos 37,5 °C temperatūroje 24 valandas. Iš išaugusių kolonijų išskiriamos grynos kultūros, jos identifikuojamos žinomais mikrobiologiniais metodais ir nustatomas jų jautrumas antibiotikams.

Norint nustatyti kiekybinį mikroorganizmų kiekį, skrepliai homogenizuojami, sumaišomi su maistiniu sultiniu ir iš mišinio paruošiami dešimteriopi skiediniai, kurie inokuliuojami į Petri lėkšteles su kraujo agaru. Po 24 valandų inkubacijos 37,5 °C temperatūroje rezultatai įvertinami, suskaičiuojant tos pačios išvaizdos kolonijas ir atsižvelgiant į medžiagos praskiedimo laipsnį. Iš kolonijų paruošiami tepinėliai ir tiriami mikroskopu.

Rezultatų interpretavimas

Skreplių mikrobiologinio tyrimo rezultatų interpretavimas yra gana sudėtingas, ir tai paaiškinama daugeliu veiksnių. Jau minėta apie nuolatinį bronchų turinio užkrėtimą viršutinių kvėpavimo takų ir burnos ertmės mikroflora bei dažną daugumos tipiškiausių kvėpavimo takų ligų sukėlėjų (pneumokokų, streptokokų, stafilokokų ir kt.) buvimą normaliame sveikų žmonių tracheobronchų turinyje. Šiuo atžvilgiu, atliekant mikrobiologinius tyrimus, skrepliuose išskiriama įvairių mikroorganizmų asociacija, kurių dauguma šiuo konkrečiu atveju yra oportunistiniai, todėl ligos sukėlėjo nustatymas yra labai sudėtingas. Todėl, norint interpretuoti skreplių mikrobiologinio tyrimo rezultatus, būtina atsižvelgti į tam tikros rūšies bakterijų kiekybinį dominavimą (daugiau nei 106–107 mcg ^/ml ), tam tikrų mikroorganizmų atsiradimą paūmėjimo fazėje ir jų išnykimą remisijos laikotarpiu. Labai svarbu atsižvelgti į klinikinį ligos vaizdą.

Pagrindiniai ir galimi įvairių klinikinių pneumonijos formų sukėlėjai

Klinikinė pneumonijos forma	Pagrindiniai patogenai	Galimi patogenai
Krupusas	Pneumokokai	Streptokokai, Klebsiella
Po gripo	Stafilokokai, pneumokokai, klebsiella	Haemophilus influenzae, streptokokai
Abscesavimas	Stafilokokai, bakteroidai, mišri flora	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Siekis	Bakteroidai, anaerobiniai streptokokai	Stafilokokai, pneumokokai
Pooperacinis laikotarpis	Stafilokokai	Pneumokokai, Klebsiella
Tarpinis	Mikoplazmos	Ornitozės, psitakozės sukėlėjai
Antrinė pneumonija ligoninės pacientams, kuriems anksčiau nebuvo taikytas antibakterinis gydymas	Stafilokokai, pneumokokai, klebsiella, bakteroidai	Escherichia coli, serratia ir kt.
Antrinė pneumonija, išsivystė antibakterinio gydymo fone	Fakultatyviniai patogeniniai mikroorganizmai	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus ir kt.
Pacientams, sergantiems lėtiniu bronchitu	Pneumokokai, Haemophilus influenzae	Stafilokokai, streptokokai
Pacientams, sergantiems alkoholizmu	Pneumokokai, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, pirmuonys
Įgyto imunodeficito sindromo atveju	Pneumocistitas, grybeliai	Citomegalovirusai
Pacientams, kuriems priežiūrą teikia pašaliniai asmenys	Pneumokokai, stafilokokai, hemofilinės speneliai	Klebsiella, Escherichia coli

Kiekybiškai vertinant pacientų, sergančių plaučių uždegimu, mikrobinės taršos tyrimo rezultatus, būtina nepamiršti itin didelio šio rodiklio jautrumo antibiotikų skyrimui. Net ir trumpalaikis gydymas antibakteriniais vaistais gali smarkiai sumažinti mikrobinę taršą, o tai neleidžia tinkamai įvertinti skreplių tyrimo rezultatų. Todėl prieš skiriant gydymą antibiotikais patartina surinkti skreplius.

Taip pat reikėtų atkreipti dėmesį, kad specialios selektyvios maistinės terpės naudojamos kultivuoti tarpląstelinius pneumonijos sukėlėjus (mikoplazmą, legioneles, chlamidijas, riketsijas). Įprastiniai mikrobiologiniai tyrimai naudojant įprastas maistines terpes (agarą) niekada neduoda teigiamų rezultatų. Todėl konkrečių mikrobiologinių tyrimų metodų pasirinkimas turėtų būti atliekamas dalyvaujant gydančiam gydytojui, kuris privalo informuoti laboratorijos gydytoją apie savo įtarimus dėl galimo tarpląstelinių sukėlėjų vaidmens pneumonijos atsiradime šiam pacientui.

Reikėtų pridurti, kad realioje klinikinėje praktikoje net ir techniškai tobulas skreplių mikrobiologinis tyrimas leidžia nustatyti patogeną ne daugiau kaip 40–60 % atvejų. Todėl patogenui patikrinti gali būti naudojami ir kiti šiuolaikiniai tyrimo metodai. Bakteriologinio tyrimo informacinę vertę galima žymiai padidinti, kai kaip tiriamą biologinę medžiagą naudojamas ne skrepliai, o tracheobronchinis aspiratas – skystis, gautas bronchoalveolinio lavažo (BAL), bronchoskopijos ir kt. metu.

Be to, pneumonijos sukėlėjams nustatyti gali būti naudojamas įvairių biologinių medžiagų (bronchoskopijos medžiagos, kraujo, pleuros turinio ir kt.) imunofluorescencijos metodas, PGR diagnostikos metodai, specifinių antikūnų kiekio kraujo serume tyrimas. Deja, šie diagnostikos metodai dar nerado plataus klinikinio pritaikymo ir šiuo metu naudojami tik dideliuose specializuotuose centruose ir laboratorijose.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]