Epšteino-Barro viruso antikūnų ir PGR kraujo tyrimas: kaip atlikti, normos

Herpesu esame įpratę suprasti negražius, skausmingus pūslių bėrimus ant veido lūpų srityje, kurie vėliau sudaro rudus plutelius. Deja, tai tik vienas iš herpeso viruso veidų, kuris žmonėms gali pasireikšti 8 formomis. Tai, ką paprastai vadiname herpesu, yra 1 tipo virusas arba herpes simplex virusas. 2 tipo virusas sukelia lytinių organų pūslelinę, 3 tipo – vėjaraupius ir juostinę pūslelinę, 4 tipo – infekcinę mononukleozę ir keletą kitų gana pavojingų patologijų ir kt. Šį sąrašą galima tęsti, bet mes sutelksime dėmesį į 4 tipo herpeso virusą, kuris kitaip vadinamas Epšteino-Baro virusu. Pabandykime išsiaiškinti, kas yra 4 tipo herpeso virusas, kodėl jis pavojingas, kada ir kodėl atliekamas Epšteino-Baro viruso tyrimas ir ką rodo laboratorinių tyrimų rezultatai.

Kas yra 4 tipo herpeso virusas?

4 tipo herpesvirusą, kaip vieną iš herpesviruso infekcijos atmainų, prieš 53 metus aprašė anglų virusologas Michaelas Epsteinas. Darbe prie šio projekto profesoriui talkino jo doktorantė Yvonne Barr. Būtent šių žmonių dėka virusas ir gavo savo pavadinimą. Tačiau praėjus 15 metų po viruso atradimo, jo mokslinis pavadinimas buvo pakeistas į žmogaus herpesvirusą 4, o prieš metus virusas buvo pavadintas žmogaus gamavirusu 4.

Bet kas yra Epšteino-Baro virusas? Kaip ir bet kuris kitas virusas, 4 tipo herpesviruso virionas (virusinė dalelė) susideda iš genetinės medžiagos (šiuo atveju dvigrandės DNR) ir jį supančio baltymo apvalkalo (kapsidės). Be to, virusą supa membrana, kuri padeda jam lengvai prasiskverbti į šeimininko ląsteles.

Bet kuris virusas yra neląstelinė forma, kuri yra infekcinis veiksnys ir negali vystytis bei daugintis už gyvo organizmo ląstelių ribų. Mėgstamiausia 4 tipo herpeso viruso buveinė laikomos nosiaryklės epitelio ląstelėmis. Jos taip pat neniekina leukocitų, pirmenybę teikdamos vienai iš jų atmainų – B limfocitams. Būtent B ląstelės aktyviai dalyvauja užtikrinant organizmo imuninę apsaugą. Susilietę su antigenu, kuris mūsų atveju yra 4 tipo herpeso virusas (tiksliau, jo antigenai), B limfocitai gamina antikūnus (imunoglobulino baltymus). Juos galima aptikti paciento kraujyje atliekant Epšteino-Baro viruso (EBV) analizę.

4 tipo herpeso virusas turi 4 antigenus, kurie yra griežtai apibrėžtoje sekoje:

• EA yra ankstyvas antigenas, atsirandantis pradinėje ligos stadijoje, kai virusinės dalelės yra sintezės stadijoje (pirminė ūminė infekcija arba latentinio viruso reaktyvacija, kai imunitetas sumažėja),
• VCA yra kapsidės antigenas, esantis baltymų apvalkale ir taip pat priklauso ankstyviesiems, nes kliniškai liga šiuo laikotarpiu gali net nepasireikšti,
• MA – membraninis antigenas, atsiranda, kai virionas jau susiformavęs,
• EBNA – branduolinis (polipeptidinis arba branduolinis) antigenas yra vienas iš vėlyvųjų antigenų, kurio antikūnai gali būti aptikti net praėjus keliems mėnesiams po ligos ir išlieka kraujyje visą gyvenimą.

4 tipo herpeso virusas yra labai klastingas. Kadangi virusas yra neaktyvus už gyvo organizmo ribų, juo galima užsikrėsti tik nuo žmogaus, kuris yra infekcijos šaltinis. Ir visai nebūtina, kad jis ar ji jaustų visus ligos simptomus; infekcija gali būti latentinė, paslėpta kaip įprastas nuovargis. Pavyzdžiui, lėtinio nuovargio sindromas daugeliu atvejų yra susijęs su Epšteino-Baro virusu.

Individualių virionų galima rasti kraujyje, seilėse, spermoje, makšties išskyrose ir įvairių organų audiniuose. Viruso dalelės kartu su seilėmis ir krauju gali patekti į aplinkinius daiktus, kur jos išliks neaktyvios, kol kažkaip nepateks į žmogaus organizmą. Daugeliu atvejų infekcija įvyksta oro lašeliniu būdu arba kontaktiniu būdu (per bučinius). Tačiau taip pat galimas intrauterininis viruso perdavimas iš motinos vaisiui, infekcija kraujo perpylimo metu (jei donoro kraujyje buvo viruso virionų) ir lytinis kontaktas.

Patekus į organizmą ir prasiskverbus į ląstelių struktūras, gali praeiti nuo 5 iki 50 dienų, kol liga pasireikš. Tačiau ji gali ir nepasireikšti, vykdama latentine forma, kaip yra daugeliu atvejų.

Taip, remiantis tyrimais, apie 90 % suaugusiųjų bent kartą gyvenime yra sirgę su EBV susijusia herpeso infekcija. Dauguma žmonių to net nežino, nes jų organizmas sugeba kovoti su viruso ataka. Tačiau ne visada taip yra.

Kaip pasireiškia Epstein-Barr virusas?

Dažniausiai gydytojai savo praktikoje turi susidurti su šiais 4 tipo herpesviruso infekcijos tipais:

• Lėtinė forma (atsiranda po ūminės ligos fazės, turi bendrų sveikatos sutrikimų simptomų),
• Latentinė arba paslėpta forma (simptomų nėra, tačiau virusas išlieka aktyvus ir išsiskiria į aplinką),
• Lėta forma (rečiau pasitaiko, simptomai pasireiškia po vieną per ilgą laiką, pasibaigiant paciento mirtimi).

Žmonės pirmą kartą užsikrečia Epstein-Barr virusu, daugiausia vaikystėje ir paauglystėje. Didžiausias sergamumas pasireiškia nuo 14 iki 18 metų amžiaus.

Pirminė virusinė infekcija skirstoma į tris skirtingas formas:

• besimptomis (klinikinių apraiškų nėra),
• kvėpavimo takai (kvėpavimo takų infekcijos simptomai: karščiavimas, nosies išskyros, bendras silpnumas ir kt.),
• Infekcinė mononukleozė, pasireiškianti trijų pagrindinių simptomų triada: aukšta temperatūra, gerklės skausmo požymiai su gelsvais plutele ant tonzilių, organų, tokių kaip kepenys ir blužnis, padidėjimas; padidėja leukocitų kiekis ir limfmazgiai.

Yra keletas būdų, kaip išbristi iš ūminės ligos fazės:

• visiškas atsigavimas,
• ligos simptomai išnyksta, tačiau virusas lieka organizme ir vystosi, nors nebesukelia pastebimų pokyčių ląstelėse (nešiojimo būsena),
• nėra ligos simptomų, virusas nepalieka organizmo, bet ir rodo mažą aktyvumą (latentinė forma),
• viruso reaktyvavimas iš latentinės formos,
• lėtinė infekcijos eiga (su ligos recidyvais, lėtinė aktyvi forma, apibendrinta su organų ir kūno sistemų pažeidimais).

Ilgalaikio viruso buvimo organizme pasekmės gali būti:

• Lėtinė infekcinės mononukleozės forma.
• Hematofagocitinis sindromas: stabili karščiavimas, sumažėjęs kraujo komponentų kiekis (padidėjęs krešėjimas), padidėjusios kepenys ir blužnis, gleivinių kraujavimas, gelta (dėl kepenų funkcijos sutrikimo), padidėję limfmazgiai, neurologiniai simptomai.
• Latentinė forma su antrinio imunodeficito išsivystymu: ilgalaikė hipertermija, bendras silpnumas, limfmazgių padidėjimas ir skausmas, raumenų ir sąnarių skausmas, dažnos infekcinės ligos.
• Autoimuninių patologijų, tokių kaip raudonoji vilkligė, reumatoidinis artritas ir kt., vystymasis.
• Lėtinio nuovargio sindromo apraiškos, pablogėjus bendrai savijautai ir darbingumui.
• Generalizuota lėtinės infekcijos forma, pažeidžianti centrinę nervų sistemą, širdies miokardą, inkstus, kepenis ir plaučius.
• Onkologinių ligų (limfocitinės leukemijos ir limfomų) vystymasis, kai stebimas patologinis limfinės sistemos ląstelių skaičiaus padidėjimas. 4 tipo herpeso virusas nesunaikina nešiklių ląstelių, bet verčia jas aktyviai daugintis, dėl to aptinkami limfoidinio audinio navikai.

Kaip matome, Epšteino-Baro virusas nėra toks nekenksmingas, kaip atrodo iš pirmo žvilgsnio, o tai reiškia, kad su juo nereikėtų elgtis nerūpestingai. Be to, 4 tipo herpeso virusui būdingi dažni viruso nešiojimo epizodai ir latentinė forma, jau nekalbant apie įvairias lėtinės infekcijos formas, kai žmogus lieka infekcijos šaltiniu net neįtardamas.

Šiuo atveju infekcinio agento buvimą organizme galima nustatyti tik naudojant specialią Epstein-Barr viruso, kurio biomedžiaga paprastai yra kraujas, analizę.

Procedūros nuorodos Epšteino-Barro viruso tyrimas.

Kadangi 4 tipo herpesviruso infekciją kartais ne taip lengva aptikti, ji ne visada įtariama. Tačiau yra tam tikrų požymių, pagal kuriuos gydytojas gali įtarti viruso buvimą organizme:

• labai susilpnėjusi imuninė sistema (rizikos zonoje yra pacientams, sergantiems ŽIV infekcija ir AIDS, pacientams po organų transplantacijos ar chemoterapijos),
• regioninių limfmazgių padidėjimas smakro ir pakaušio srityje ir jų skausmas, ypač jei tai pastebima po kraujo perpylimo ar organų transplantacijos iš donoro.
• ūminė kvėpavimo takų virusinė infekcija (ARVI), pasireiškianti labai aukštos temperatūros (38–40 laipsnių) fone,
• infekcinės mononukleozės požymių atsiradimas, kuris dažniausiai pasireiškia veikiant Epstein-Barr virusui.

Net jei žmogus neturi minėtų simptomų, specialistas gali įtarti remdamasis kai kuriais įprastinių tyrimų (bendro kraujo tyrimo ir biochemijos) rezultatais, taip pat imuninės būklės tyrimais.

Pilnas kraujo tyrimas Epstein-Barr virusui nustatyti gali parodyti:

• limfocitų skaičiaus padidėjimas,
• žemas hemoglobino kiekis, rodantis sumažėjusį raudonųjų kraujo kūnelių kiekį,
• padidėjęs kraujo krešėjimas dėl didelio trombocitų skaičiaus,
• virocitų (netipinių limfocitų, panašių į monocitus) atsiradimas.

Biocheminis kraujo tyrimas, kuris suteikia informacijos apie vidaus organų būklę, parodys kepenų ir blužnies veiklos pokyčius.

EBV imunologinis tyrimas gali parodyti specifinių limfocitų skaičiaus pokytį, skirtingų klasių imunoglobulinų skaičiaus neatitikimą (disimunoglobulinemija) ir imunoglobulino G trūkumą, kuris rodo silpną imuninę sistemą ir jos nesugebėjimą suvaldyti viruso atakos.

Tokie nespecifinių analizių rezultatai gali įspėti gydytojus, tačiau tiksliai pasakyti, su kuo jie susiduria, vis tiek neįmanoma. Viskas liks prielaidų ir preliminarios diagnozės etape. Daugeliu atvejų gydytojai įtaria latentinę infekcinės mononukleozės formą, nors kitos virusinės patologijos (gripas, hepatitas ir kt.) gali pasireikšti tokiu pačiu būdu.

Dėl didelio 4 tipo hepatito paplitimo ir galimybės jį perduoti iš motinos vaikui, Epstein-Barr viruso testas taip pat bus naudingas planuojant nėštumą. Jei motina anksčiau sirgo šia infekcija, jos organizme susidarė antikūnų prieš ją. Pakartotinė infekcija paprastai atmetama dėl stipraus imuniteto susidarymo, o jei ji ir įvyksta, ji nebeturės tokių pasekmių, kokios galimos po pirmojo susidūrimo su virusu. Imunitetas visą gyvenimą slopins viruso aktyvumą, nors pats virusas išliks organizme, kaip ir bet kuris iš herpeso virusų.

Jei nėščia motina užsikrečia herpeso virusu, tai gali sukelti persileidimus ir priešlaikinius gimdymus arba virusas neigiamai paveiks kūdikio intrauterininę raidą.

Onkologas gali paskirti EBV testą, jei įtariama Burketto limfoma arba norint diagnozuoti naviko procesus žmonėms, sergantiems ŽIV. Terapeutas gali naudoti šį testą herpes infekcijoms diagnozuoti (diferencinė diagnostika viruso tipui nustatyti). Kartais testas taip pat naudojamas gydymo veiksmingumui įvertinti.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Paruošimas

Priklausomai nuo tyrimo tipo, biomedžiaga jam gali būti kraujas, seilės, šlapimas, skrepliai, vaisiaus vandenų mėginys, iš gimdos kaklelio kanalo ar šlaplės paimtas iškarpas, smegenų skystis (CSF). Dažniausiai gydytojai imasi kraujo tyrimų, kurie laikomi informatyviausiais.

Akivaizdu, kad kai kurie veiksniai gali neigiamai paveikti biomedžiagos kokybę ir kiekį, todėl verta laikytis tam tikrų taisyklių dieną prieš tai:

• Bet kokius tyrimus (ypač kraujo tyrimus) rekomenduojama atlikti ryte tuščiu skrandžiu. Paskutinis valgis turėtų būti ne vėliau kaip 12 valandų prieš kraujo mėginių ėmimą, todėl vakarienei geriau gerti vandenį.
• Priimtiniausia medžiaga Epstein-Barr viruso analizei laikoma veniniu krauju, o prieš duodant kraują iš venos, jei žmogus ką tik atvyko į laboratoriją, visada rekomenduojama 15 minučių pailsėti.
• Siekiant užtikrinti, kad kraujo paėmimas vyktų be pasekmių, o tyrimo rezultatai būtų patikimi, 12 valandų prieš procedūrą nerekomenduojama dirbti aktyvaus fizinio darbo ar sportuoti, vartoti alkoholio, rūkyti.
• Tyrimų rezultatus taip pat gali paveikti vartojami vaistai. Vaistų vartojimą reikėtų nutraukti likus bent 2 dienoms iki tyrimo. Jei tai neįmanoma, apie vartojamus vaistus privalote informuoti laboratorijos slaugytoją.
• Nėštumo metu, prieš EBV tyrimą, atliekamas toksoplazmozės tyrimas, siekiant atmesti klaidingai teigiamą reakciją.
• Jei Epstein-Barr viruso kraujo tyrimas atliekamas vaikui iki 5 metų, pusvalandį prieš procedūrą vaikui reikia duoti gerti daug virinto vandens santykinai mažomis porcijomis.

Jei analizei imama kita biomedžiaga, iš anksto turite išsiaiškinti su gydytoju visus pasiruošimo analizei niuansus, priklausomai nuo naudojamos medžiagos.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Technika Epšteino-Barro viruso tyrimas.

Gydytojai svarbų vaidmenį diagnozuojant 4 tipo herpesą ir infekcinę mononukleozę skiria specifiniams tyrimams, kurie padeda nustatyti viruso DNR arba unikalius antikūnus paciento biomedžiagoje. Pagrindiniai laboratorinių tyrimų, naudojamų Epstein-Barr virusui aptikti žmogaus organizme, tipai yra fermentinis imunosorbentinis tyrimas (ELISA) ir PGR diagnostika. Pažvelkime atidžiau į abiejų metodų esmę ir jų įgyvendinimo ypatybes.

EBV fermento imunologinis tyrimas

ELISA yra pacientų veninio kraujo tyrimas (analizė), skirtas antikūnams prieš Epstein-Barr virusą nustatyti. Diagnostikos metu EBV sergančių pacientų kraujyje aptinkami IgG arba IgM tipo imunoglobulinai (iš viso yra 5 tipai) vienam iš 3 viruso antigenų (ankstyvojo, kapsidinio arba branduolinio).

Analizė atliekama imunologinėje laboratorijoje, kur iš paciento venos paimama apie 10 ml kraujo. Biomedžiaga laikoma kambario temperatūroje ketvirtį valandos, per tą laiką kraujas kreša. Krešulys kruopščiai atskiriamas nuo skystosios dalies. Skystis centrifuguojamas ir gaunamas grynas kraujo serumas. Būtent jis ir toliau tiriamas.

Metodo idėja kilo remiantis duomenimis, kad mūsų organizmas gamina specifinius antikūnus prieš kiekvieną viruso ir bakterijų tipą, kuris patenka į organizmą iš išorės. Organizmas juos atpažįsta kaip nepažįstamuosius ir sunaikina unikalių antikūnų, tvirtai prilipusių prie antigeno, pagalba.

ELISA analizės esmė pagrįsta šia reakcija. Antikūnai su prie jų pritvirtintomis žymėmis jungiasi su antigenais. Ant žymių užtepama medžiaga, kuri reaguodama su specialiu fermentu keičia mėginio spalvą. Kuo daugiau tokių „grandinių“, tuo intensyvesnė biomedžiagos spalva.

Fermentinis imunologinis tyrimas gali būti atliekamas trimis būdais:

• Tiesioginė ELISA. Tiriamasis skystis supilamas į šulinėlius ir paliekamas maždaug pusvalandžiui, kad antigenai galėtų prisitvirtinti prie šulinių sienelių. Prie sorbuotų antigenų pridedama skysčio su žymėtais antikūnais. Po reikiamo laiko (nuo pusvalandžio iki 5 valandų), kai antikūnai aptinka ir prisijungia prie antigenų, skystis nupilamas, šulinėliai kruopščiai nuplaunami ir į juos įpilamas fermentas. Viruso koncentracija kraujo vienete nustatoma spalvinimo metodu.
• Netiesioginė ELISA. Šiuo metodu tiriamasis kraujo serumas ir žymėti antikūnai pridedami prie šulinėlių paviršiuje adsorbuotų antigenų. Gaunami 2 tipų raiščiai, kai kurie iš jų yra žymėti. Rezultatas priklauso nuo antigenų koncentracijos tiriamajame mėginyje. Kuo daugiau nežymėtų antikūnų, tuo mažiau junginių žymi fermentas.

Toliau į išplautą kompoziciją pridedamas specialus reagentas, kuris naudojamas antigeno-antikūno kompleksų fermentiniam aktyvumui nustatyti.

• „Sumuštinis“. Skiriasi nuo netiesioginio metodo tuo, kad iš pradžių paviršiuje sorbuojami ne antigenai, o antikūnai. Į juos įpilamas tirpalas, kuriame yra tiriami antigenai. Nuplovus nešiklį, įpilami antikūnai su fermentinėmis žymėmis. Antikūnų perteklius vėl pašalinamas ir, naudojant vandenilio peroksidą, gaunama spalvota medžiaga, kuri tiriama spektrometriniu metodu.

Šio tipo analizė leidžia ne tik nustatyti specifinius antikūnus ir nustatyti antigenų koncentraciją, bet ir išsiaiškinti ligos stadiją. Faktas yra tas, kad skirtingi Epstein-Barr viruso antigenai atsiranda skirtinguose herpeso infekcijos etapuose, o tai reiškia, kad antikūnai prieš juos gaminami tam tikru ligos laikotarpiu.

Taigi, IgG antikūnai prieš ankstyvąjį antigeną (IgG EA) kraujyje atsiranda praėjus 1-2 savaitėms po užsikrėtimo, kai liga yra ūminėje stadijoje arba viruso reaktyvacijos stadijoje. Šio tipo imunoglobulinai išnyksta po 3-6 mėnesių. Lėtinės virusinės infekcijos eigos metu tokių antikūnų yra ypač daug, o netipinės formos atveju jų visai nėra.

IgG antikūnai prieš kapsidės antigeną (IgG VCA) taip pat atsiranda anksti, per pirmąsias 4 ligos savaites, tačiau didžiausias jų kiekis nustatomas antrąjį infekcijos mėnesį. Ūminės fazės metu jie randami daugumai pacientų, tačiau vaikams gali nepasireikšti. Lėtinės ligos eigos metu, ypač viruso reaktyvacijos laikotarpiais, IgG VCA kiekis yra ypač didelis. Šie antikūnai žmogaus kraujyje išlieka amžinai, kaip ir pats virusas, o tai rodo susiformavusį imunitetą infekciniam agentui.

IgM antikūnai prieš kapsidės antigeną (IgM VCA) gali pasirodyti dar prieš pasireiškiant pirmiesiems ligos požymiams. Jų koncentracija (titrai) ypač didelė per pirmąsias 6 ligos savaites. Šis antikūnų tipas būdingas ūminei infekcijai ir lėtinės infekcijos atsinaujinimui. IgM VCA išnyksta po 1–6 mėnesių.

IgG antikūnai prieš branduolinį geną (IgG EBNA) gali rodyti, kad žmogus anksčiau tiesiogiai susidūrė su herpeso infekcija. Ūminėje ligos fazėje jie aptinkami itin retai, dažniausiai pasireiškia sveikimo laikotarpiu (3–10 mėnesį). Jie gali būti aptinkami kraujyje praėjus keleriems metams po užsikrėtimo.

Atskirų antigenų nustatymas nesuteikia išsamaus ligos vaizdo, todėl skirtingų antikūnų tyrimai turėtų būti atliekami kartu. Pavyzdžiui, jei aptinkamas tik IgM VCA, o IgG EBNA neaptinkama, tai yra pirminė infekcija.

Deja, fermentinis imunologinis tyrimas dažnai yra nepakankamas pirminei herpetinei infekcijai ar įgimtai patologijai nustatyti. Pastaruoju atveju antikūnų gali būti visai neaptikta. Kaip pirminės ligos patvirtinamasis testas naudojamas molekulinis kraujo ar kitos biologinės medžiagos tyrimas Epstein-Barr virusui nustatyti.

KLR analizė dėl Epstein-Barr viruso

Ši analizė atliekama ūminės pirminės infekcijos stadijoje, kitaip jos rezultatas bus neteisingas.

PGR (daugiamatės grandininės reakcijos) metodo esmė yra ta, kad kiekvienas infekcinis agentas turi savo genų rinkinį, esantį DNR molekulėje. Tyrimui paimtoje biomedžiagoje patogeno DNR yra nedideliais kiekiais (patys virusai yra mikroskopinio dydžio), todėl labai sunku įvertinti situaciją. Tačiau jei atliekama specifinė reakcija, genetinės medžiagos kiekis žymiai padidės, o tai leis įvardyti patogeną.

Naudojant vienkartinius instrumentus, molekuliniams tyrimams paimama medžiaga, kuri analizei dedama į specialų prietaisą. Šis prietaisas yra termostatas su specialia programa – termocikleriu arba stiprintuvu. Prietaisas kelias dešimtis kartų (apie 2–3 minutes) atlieka pilną PRC ciklą, kurį sudaro 3 etapai:

• Denatūracija (95 laipsnių temperatūroje DNR grandinės yra atskiriamos).
• Atkaitinimas (75 laipsnių temperatūroje į tiriamą medžiagą įvedami specialiai paruošti EBV „pradmenys“, kurie prisijungia prie viruso DNR).
• Genetinės medžiagos pailginimas arba dauginimas (į sėklą 72 laipsnių temperatūroje pridedamas specialus fermentas, kuris atkuria naują DNR grandinę, taip padvigubindamas genetinės medžiagos kiekį).

Jei visas polimatės reakcijos ciklas bus atliktas 50 kartų, medžiagos kiekis padidės 100 kartų. Tai reiškia, kad patogeną bus daug lengviau identifikuoti.

Epstein-Barr viruso testas vaikui

Kaip jau žinome, Epstein-Barr virusas gali sukelti daugelio ligų vystymąsi. Patekęs į žmogaus organizmą, jis lieka nuolatiniu jo gyventoju ir tik gerai koordinuotas imuninės sistemos darbas neleidžia jam aktyviai parazituoti ląstelių viduje.

Beveik 95 % pasaulio suaugusių gyventojų gyvena su EBV viduje, ir dauguma jų su virusu susipažino ankstyvoje vaikystėje. Vieni jį paveldėjo iš motinos, kiti – iš tėvų ir giminaičių, skubančių pas vaiką su bučiniais, arba oro lašeliniu būdu darželyje ar mokykloje (ten infekcinės ligos dažniausiai įgauna „universalų“ mastą).

Maži vaikai paprastai linkę kišti viską į burną, o daugiausia virionų randama seilėse. O jei darželyje keli vaikai laižo tą patį žaislą, kol mokytojai užsiėmę savais reikalais, nenuostabu, kad virusas taip aktyviai plinta didelėse vaikų grupėse.

EBV galima drąsiai vadinti vaikų ir jaunimo liga, nes iki paauglystės pusė vaikų jau turi virusą savo organizme (o iki 30 metų – apie 90 % suaugusiųjų). Skirtingo amžiaus vaikai serga savaip. Iki metų, kol vaikas aktyviai nebendrauja su žmonėmis, tikimybė jam susirgti yra maža. Vyresnis nei metų vaikas, net jei ir nelankė darželio, tampa bendraujantis, žaidžia gatvėje su bendraamžiais, aktyviai apsiperka su mama ir pan., todėl tikimybė užsikrėsti virusu tampa daug didesnė.

Tačiau tai nėra priežastis uždaryti vaiką tarp 4 sienų. Sulaukus 1–3 metų, liga daugeliu atvejų tęsiasi be jokių simptomų, išskyrus galbūt nedidelį temperatūros pakilimą ir nedidelę slogą, primenančią peršalimą. Pasirodo, kuo anksčiau vaikas susipažįsta su virusu, tuo lengviau vyksta tokia pažintis.

Negerai, jei vaikas suserga neatsiradus IgG VCA antikūnų kraujyje, nes tai gali rodyti, kad imunitetas virusui nesusiformavo, o viruso reaktyvacija galima vos tik susilpnėjus imuninei sistemai. Priežastis greičiausiai yra mažų vaikų imuninės sistemos netobulumas, kuri formuojasi kelerius metus.

Mokyklinis gyvenimas suteikia dar daugiau prielaidų ligai, ypač paauglystėje, kai jauni žmonės aktyviai bučiuojasi. Tačiau vyresniems nei 3 metų vaikams liga rečiau būna besimptomė. Daugeliu atvejų gydytojai susiduria su infekcine mononukleoze su jai būdingais simptomais.

Nepaisant to, kad patologija gali tęstis ilgai (apie 2 mėnesius), ji nėra tokia pavojinga ir nereikalauja rimtų vaistų vartojimo. Gydytojai skiria priešuždegiminių ir antivirusinių vaistų, jei prisijungia bakterinė infekcija, jie kreipiasi pagalbos į antibiotikus. Beje, penicilinai šiuo atveju nerekomenduojami, nes jie gali išprovokuoti odos bėrimą.

Nemanykite, kad jei vaikas ar paauglys suserga infekcine mononukleoze, tai reiškia, kad jų organizme apsigyveno Epšteino-Baro virusas. Ši liga turi ir kitų, retesnių patogenų, tokių kaip citomegalovirusas (5 tipo herpeso virusas). Norėdami suprasti, su kuo jie susiduria, gydytojai skiria Epšteino-Baro viruso testą ir, jei reikia, kitus laboratorinius tyrimus.

Taip pat tiesa, kad infekcinė mononukleozė nėra vienintelė EBV apraiška vaikystėje. Yra ir kitų su šiuo patogenu susijusių ligų, tačiau mūsų regione jos retos.

Taigi, Burkitto limfoma (kuriai EBV yra skolingas savo aptikimas) daugiausia aptinkama Afrikos šalių vaikams, labai retai Amerikoje ir dar rečiau Europoje (ir tik AIDS fone). Žandikaulio navikas, pažeidžiantis limfmazgius, inkstus ir kitus organus, aptinkamas 3–8 metų vaikams.

Nosiaryklės vėžys, nemaža dalis kitų limfomų, plaukuotoji burnos leukoplakija – visa tai EBV apraiškos labai sumažėjusio imuniteto fone, kuris atsiranda sergant ŽIV infekcija ir vėlesne AIDS stadija.

Įgimtas imunodeficitas ir Epstein-Barr viruso pridėjimas yra pavojingas mišinys, galintis sukelti proliferacinio sindromo atsiradimą vaikui. Šiuo atveju padidėjęs B limfocitų skaičius lemia granulių atsiradimą daugelyje organų, o tai neleidžia jiems normaliai funkcionuoti. Tai liga, pasižyminti dideliu mirtingumu, tačiau ji nesivysto esant normaliam imunitetui.

Galima sakyti, kad vaikystėje Epstein-Barr virusas yra pavojingas daugiausia imunodeficito atvejais dėl įvairių komplikacijų išsivystymo. Daugeliu atvejų viskas apsiriboja infekcine mononukleoze. Ir nors specialaus gydymo nereikia, gydytojai vis tiek nori nustatyti patogeno pobūdį, todėl vaikui skiriamas bendras kraujo tyrimas, fermentinis imunologinis tyrimas ir PGR.

Kadangi vaikystėje daugiausia pasireiškia pirminė infekcija, visiškai įmanoma apsiriboti tik pilnu kraujo tyrimu ir PGR, kuris yra gana informatyvus, kai liga pirmą kartą nustatoma.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

Normalus našumas

PGR analizės rezultatai apdorojami elektroforezės būdu arba naudojant žymėtus „pradmenis“. Pastaruoju atveju pakanka tiesiog pridėti reagento (chromogeno) ir pagal spalvą nustatyti, ar mėginyje yra virionų. Teigiamas elektroforezės rezultatas rodomas, kai tiriamame mėginyje aptinkamos skirtingo ilgio DNR grandinės.

Ligos inkubaciniu laikotarpiu ir besimptomio viruso nešiojimo metu PGR duos neigiamą rezultatą, taip pat ir visiškai nesant viruso organizme. Pirminės infekcijos pradžioje ir ankstyvosiose stadijose PGR realiuoju laiku gali duoti tiek teigiamus, tiek neigiamus rezultatus, kurie jokiu būdu nepaaiškina situacijos.

Tačiau ligos įkarštyje (ūminėje fazėje), lėtinės eigos metu arba viruso reaktyvacijos metu (paūmėjimo metu) ir netipinių formų atveju analizė bus teigiama. Jei žmogus serga ilgą laiką ir virusas jo organizme yra neaktyvios būsenos, PGR analizė duos neigiamą rezultatą, t. y. šios analizės atlikimas šiuo laikotarpiu taip pat netinkamas, taip pat per ankstyvose ligos stadijose.

Reikia pasakyti, kad tikslūs šio tipo laboratorinių tyrimų rezultatai galimi tik esant pirminei infekcijai ir nesant kitų virusų virionų.

Dabar, dėl Epstein-Barr viruso fermentinio imunologinio tyrimo. Jam keliami tie patys reikalavimai. 5 arba 6 tipo herpes viruso, toksoplazmozės ir ŽIV infekcijos buvimas organizme gali iškreipti rezultatą ne mažiau nei neatsargus požiūris į analizę ar prasta naudojamų reagentų kokybė. Tokiu atveju gali prireikti papildomų tyrimų, atsižvelgiant į galimus patogenus.

Normalūs tyrimų rezultatai, rodantys viruso nebuvimą organizme, laikomi neigiamais visų 4 tyrimų rezultatais: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA ir IgG EBNA. Taip, kiekvienas tyrimas atliekamas atskirai, nes antigenai atsiranda skirtingais ligos laikotarpiais. Kartais gali būti skiriami tik atskiri tyrimai, tačiau daugeliu atvejų reikia atlikti visus 4 tyrimus, tačiau skirtingais ligos laikotarpiais.

Pavyzdžiui, ligos inkubaciniu laikotarpiu, taip pat ir nesant infekcijos, kraujyje neaptinkamas nė vienas iš 4 antikūnų tipų. Toks rezultatas negali būti laikomas pakankamu, nes jis neleidžia atskirti pirmą kartą susirgusio žmogaus nuo sveiko žmogaus.

Pirminės ligos pradžioje kraujyje atsiranda tik IgM VCA antikūnai. Ankstyvosiose ligos stadijose prie jų prisijungia IgG VCA.

Ūminė pirminės infekcijos stadija vyksta susidarant trijų tipų antikūnams: IgG VCA, IgM VCA ir IgG EA, o didžiausias IgG antikūnų kiekis aptinkamas prieš kapsidės antigeną. Po ūminės ligos fazės šešis mėnesius išlieka ta pati antikūnų sudėtis, tačiau IgM VCA kiekis palaipsniui mažėja iki nulio.

Praėjus šešiems mėnesiams po ligos, kraujyje atsiranda IgG EBNA antikūnų, IgG EA imunoglobulinų vis mažėja, o IgM VCA visiškai nebėra.

Lėtinės ligos eigos ar viruso reaktyvacijos atvejais gali būti skirtingų rodiklių. Dažniausiai kraujyje aptinkami visi 4 antikūnų tipai. Tačiau gali būti, kad imunoglobulinai IgM VCA ir IgG EBNA neaptinkami.

Virusinės infekcijos komplikacija naviko procesais atsiranda nesant IgM VCA antikūnų, o IgG EBNA imunoglobulinai ne visais atvejais aptinkami.

Tačiau fermentinis imunologinis tyrimas nustato ne tik tam tikrų antikūnų buvimą, bet ir jų koncentraciją, o tai leidžia tiksliau įvertinti patologijos stadiją ir galimas jos pasekmes. Čia nereikia kalbėti apie konkrečius skaičius. Juk kiekviena laboratorija analizę atlieka vienu iš galimų būdų, naudodama įvairius reagentus, todėl skirtingų laboratorijų analizės rezultatai skaitmeniniu formatu gali skirtis.

Pacientui privaloma pateikti formą, kurioje būtų nurodytos ribinės (etaloninės) vertės. Jei rezultatas yra mažesnis už ribinę vertę, tai laikoma normaliu (neigiamu) rodikliu. Jei nustatytas skaičius viršija etaloninę vertę, viskas rodo teigiamą rezultatą, o tai reiškia, kad virusas gyvena organizme. Nustatytos vertės vertė rodo ligos stadiją ir organizmo kolonizaciją EBV virionais, t. y. patologijos sunkumą.

Jei ELISA testas neigiamas, tai reiškia tik tai, kad asmuo anksčiau neturėjo kontakto su EBV. Tačiau neįmanoma užtikrintai pasakyti, ar virusas šiuo metu yra organizme. Neigiamą rezultatą gali lemti patogeno inkubacija organizme ir besimptomis viruso nešiojimas. Kartais, norint įsitikinti, kad organizme nėra viruso, po kurio laiko būtina atlikti antrą tyrimų seriją.

Jei Epstein-Barr viruso ELISA rezultatas tik šiek tiek viršija referencines vertes, rezultatas laikomas abejotinu. Priežastis dažniausiai yra ankstyva ligos stadija arba kito viruso virionų buvimas organizme. Tokiu atveju po 2 savaičių rekomenduojama atlikti pakartotinį EBV ir galbūt kitų patogenų tyrimą.

[ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]

Kalbant apie klausimą, kiek laiko užtrunka atlikti Epstein-Barr viruso testą ir kada galima tikėtis rezultatų, ypatingų sunkumų tikėtis nereikėtų. Rimtoje, gerai įrengtoje laboratorijoje po biomedžiagos pateikimo teks palaukti ne ilgiau kaip 2 dienas. Situacijose, kai reikia skubiai atlikti analizę, atsakymą galima gauti net po poros valandų.

Epšteino-Baro viruso tyrimas turėtų būti atliekamas patikimoje laboratorijoje, kurioje yra ir aukštos kokybės reagentų, ir kvalifikuotų specialistų. Juk tyrimas kainuoja pinigus (ir ne mažai, vieno tipo antikūnų tyrimas kainuoja apie 150–170 UAH), ir nenorėčiau gauti klaidingo rezultato, o tada galbūt vėl kreiptis į kitą laboratoriją dėl pakartotinio tyrimo.

[ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ]